聚对苯二甲酸乙二酯三维支架及碱性成纤维生长因子和乳酸对成人骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景:诸多实验聚焦在改变传统的细胞培养方式,希望利用三维支架材料能够获得更多细胞量。目的:观察人骨髓间充质干细胞在三维培养条件下的增殖特点。方法:检测不同质量浓度的碱性成纤维生长因子和乳酸对人骨髓间充质干细胞增殖的影响。在确定最佳条件基础上,进一步测定聚对苯二甲酸乙二酯三维支架上人骨髓间充质干细胞的增殖和代谢的特点。通过Celltracker Green染色,激光共聚焦显微镜观察人骨髓间充质干细胞在三维支架材料上的活性。利用扫描电镜观察人骨髓间充质干细胞在三维支架材料上的形态分布特点。结果与结论:当培养基中碱性成纤维生长因子质量浓度为5μg/L,乳酸质量浓度少于0.9g/L时,最有利于促进三维支架材料上人骨髓间充质干细胞的增殖。在此优化条件下,人骨髓间充质干细胞在实验组(含5μg/LbFGF)和对照组(不含bFGF)中的扩增倍数分别为15.3和9.6,比生长速率分别为0.136/d和0.113/d,实验组的细胞量比对照组提高了160%。激光共聚焦显微镜和扫描电镜检测结果表明,人骨髓间充质干细胞在三维支架材料上呈立体、多层生长,聚对苯二甲酸乙二酯三维支架的特有结构为细胞提供相对较大的生长空间。

重组艰难梭菌毒素B对小鼠结肠癌CT26细胞的诱导凋亡作用

本文探讨了重组艰难梭菌毒素B(rTcdB)对小鼠结肠癌CT26细胞的诱导凋亡作用。采用不同浓度rTcdB处理CT26细胞,通过MTT法检测细胞增殖抑制率;比色法测定Caspase3活性;细胞形态学和流式细胞技术检测细胞凋亡。结果表明,rTcdB显著抑制了CT26细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性;Caspase3活性在处理6h后显著升高,至18h达到最大值,与对照组相比差异显著,具有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜观察到典型细胞凋亡形态学变化,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)异位到了膜外侧,细胞膜呈明亮的绿色荧光;通过流式细胞仪检测结果表明,细胞凋亡率呈时间-剂量依赖性增加。实验结果表明,重组艰难梭菌毒素B能够诱导小鼠结肠癌CT26细胞凋亡。