anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1纳米粒子的构建及其治疗哮喘小鼠的应用

采用基因工程方法分别将抗表皮生长因子受体(EGFR)的单链抗体(anti-EGFR scFv)和靶向白介素-4-受体(IL-4R)的AP1短肽分别修饰到铁蛋白重链亚基(FTH1)的N端,再通过蛋白表达、体外混合复性后成功制备了anti-EGFR scFv-FTH1/AP1-FTH1双靶向纳米粒子。结果表明:该纳米粒子能正确组装成铁蛋白的特征笼状结构,粒径为(13.2±1.3)nm。在哮喘小鼠模型中发现该纳米粒子能有效抑制哮喘多种症状,且在缓解气道高反应方面的效果优于单靶向anti-EGFR scFv-FTH1/FTH1纳米粒子。

碳纳米管修饰电极用于高效液相色谱对全血中巯基化合物的测定

研究了羧基化多壁碳纳米管修饰电极 (MWNT CME)的制备方法和该修饰电极对巯基化合物的电催化行为 ,并首次以该修饰电极为电化学检测器 ,与高效液相色谱 (HPLC)联用 ,分离检测了半胱氨酸 (L Cys)和谷胱甘肽 (GSH)两种巯基化合物。结果表明在 3 .0× 1 0 - 7～ 1 .0× 1 0 - 3mol L浓度范围内 ,L Cys和GSH的浓度分别与其氧化峰的峰电流呈良好的线性关系 ,线性相关系数分别为 0 .9987和 0 .9990 ;检出限分别为 1 .2×1 0 - 7mol L和 2 .2× 1 0 - 7mol L。将该方法用于人全血中L Cys和GSH的测定 ,获得了满意的结果 ,为电分析化学在临床医学。

纳米银粒子修饰电极法测定血红蛋白

报道了一种利用纳米材料修饰电极检测血红蛋白的新方法。制作了以纳米银粒子修饰的银电极，并研究了血红蛋白在该修饰电极上的直接电化学行为。实验结果表明，血红蛋白在该修饰电极上具有良好的电流响应。在2．0×10^-7～1．0×10^-5mol／L浓度范围内，血红蛋白的氧化峰电流与其浓度呈良好线性关系；检出限为7．4×10^-8mol／L。研究了该修饰电极对血红蛋白的催化机理，利用该电极所建立的方法实现了对血红蛋白的分析测定。

微渗析活体取样-高效液相色谱电化学检测法测定鼠脑中的单胺类神经递质

采用微渗析活体取样技术和高效液相色谱电化学检测法,测定了鼠脑纹状体中的3种单胺类神经递质多巴胺(DA)、3,4二羟基苯乙酸(DOPAC)和5羟吲哚乙酸(5HIAA)。在3.0×10-8～1.0×10-5mol/L浓度范围内,DA、DOPAC和5HIAA的浓度分别与氧化峰的峰电流呈良好的线性关系。通过在灌流液中加入1.0×10-5mol/L的NO释放剂硝普钠(SNP),研究了NO对DA释放的影响,结果表明:受NO刺激后纹状体中DA的量为基础水平的150%。

过氧化聚吡咯膜修饰电极色谱电化学用于帕金森试验动物的研究

研制了一种新型的过氧化聚吡咯膜修饰电极（ＯＰＰｙ／ＣＭＥ）作为液相色谱电化学检测器，该电极可以用来检测生物体内的单胺类神经递质及其代谢产物。用药物建立了帕金森动物试验模型，对不同情况下的试验动物脑内单胺类神经递质及其代谢产物通过微渗析取样和液相色谱电化学检测联用技术进行了测定。初步探讨了试验动物产生帕金森病的机理，为研制和筛选更有效的治疗帕金森病的新药提供了一种准确、可靠的分析手段。

聚四氨基酞菁铜微型传感器及其在一氧化氮测定中的应用

利用电化学聚合的方法制备了聚四氨基酞菁酮[Cu(TAPc)]微型传感器,并探讨了微型传感器对一氧化氮(NO)的电化学响应.结果表明,电化学聚合Cu(TAPc)微型传感器对NO具有良好的催化氧化作用.示差脉冲伏安法(DPV)和示差脉冲安培法(DPA)的结果表明,该传感器对NO的响应具有较低的检测限和较高的灵敏度.NO的浓度在1.20×10^(-8)～1.00×10^(-6)mol/L范围内与传感器的电流响应呈线性关系,相关系数为0.9998;检出限为6.00×10^(-9)mol/L.生物体内常见共存物质如抗坏血酸、儿茶酚胺类神经递质及其代谢产物、NO的降解产物NO_2^-等不干扰NO的测定.所研制的微型传感器可以满足NO的活体分析的要求.

高效液相色谱法测定鱼肉中的碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O两种工业染料

碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O均为工业用着色剂,不能作为食品添加用色素。为此建立了鱼肉样品中同时检查碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的高效液相色谱定量分析方法,以甲醇-0.03%磷酸水溶液(pH 2.0)为流动相,Hydrosphere-C18色谱柱分离,二极管阵列检测器检测,检测波长为440 nm,可以实现鱼肉样品中添加的碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的含量分析。该方法碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的线性范围均为0.1～10μg/mL,最低检出浓度均为0.04μg/mL,方法的回收率为95%～116%,相对标准偏差(RSD)为2.0%～3.5%。此外,还进一步考察了前处理方法中采用磷酸-甲醇直接研磨鱼肉并抽提被分析物,抽提液适当蒸发浓缩,可以实现鱼肉样品中添加0.25μg/g的碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的分析检测,以及自制浸泡黄鱼样品中的碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O的分析检测。

铁蛋白重链亚基纳米载药系统的构建及其特性

靶向给药能将药物传递到指定位置,从而改变药物的疗效并减少毒副作用。构建了一种具有高度生物安全性的人表皮生长因子-铁蛋白重链亚基纳米粒子(EGF-5Cys-FTH1),该纳米粒子能有效靶向于过表达的表皮生长因子受体(EGFR)的乳腺癌细胞。由于采用了基因突变增加了蛋白的载药位点,所构建的阿霉素/铁蛋白重链亚基(DOX/EGF-5Cys-FTH1)纳米载药系统显示了较高的载药量,即1mol EGF-5Cys-FTH1可载72mol阿霉素,且具有pH可控释放的特性。与游离DOX相比,该载药系统相比于对乳腺癌耐DOX的MCF-7/ADR细胞具有更好的致死作用。这些研究为探索构建蛋白类的载药系统治疗癌症提供了新方法。

微渗析-液相色谱电化学检测法测定全血中的半胱氨酸和谷胱甘肽

采用微渗析取样作为样品预处理技术,与高效液相色谱电化学检测联用,建立了一种测定血中半胱氨酸(Cys)和谷胱甘肽(GSH)的新方法。电化学检测以玻碳电极为工作电极,结果表明在3.5×10-6～1.0×10-3mol/L浓度范围内,Cys和GSH的浓度分别与氧化峰的峰电流呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.9971和0.9982,检测限分别为1.2×10-6mol/L和3.2×10-6mol/L。

微渗析活体取样与液相色谱安培检测法联用测定鼠脑中黄嘌呤和次黄嘌呤

采用微渗析活体取样技术和高效液相色谱安培检测法 ,测定了鼠脑纹状体中的黄嘌呤和次黄嘌呤。安培检测以玻碳电极为工作电极 ,检测电位为 0 .9V。在 5 .0× 1 0 - 7～ 1 .0× 1 0 - 4 mol/L浓度范围内 ,黄嘌呤和次黄嘌呤的浓度分别与峰电流呈良好的线性关系 ,检出限分别为 8 0× 1 0 - 8mol/L和 3 0× 1 0 - 7mol/L。

高效液相色谱法测定虾中的酸性红1、铬变素FB和丽春红2R3种人工合成色素

为建立食品中非食用和食用色素酸性红1、铬变素FB和丽春红2R的高效液相色谱定量检测方法,虾样品经乙醇-氨水提取,以乙腈-10 mmol/L醋酸铵水溶液(pH 8.0)为流动相,Hydrosphere-C18色谱柱分离,二极管阵列检测器检测,检测波长为504 nm,外标法定量分析了自制浸泡虾皮中的色素含量。该方法线性范围为2.0×10-7～1.0×10-4mol/L,酸性红1、铬变素FB和丽春红2R最低检出浓度分别为7.7×10-8、9.1×10-8和5.9×10-8mol/L;该方法的回收率为95%～107%,相对标准偏差(RSD)为1.5%～2.5%。

高效液相色谱法测定3,4-二氟苯腈和3,4-二氯苯腈

3，4-二氟苯腈是一种重要的中间体，目前合成方法有采用3，4-二氯苯腈为原料，通相转移催化制备，由此建立了反应过程中同时测定3，4-二氟苯腈和3，4-二氯苯腈的高效液相色谱定量分析方法。以C18色谱柱为分离柱，70％甲醇水溶液为流动相；紫外检测波长设定为210nm，可以实现反应液中这两种物质的同时检测。3，4-二氟苯腈和3，4-二氯苯腈的最低检出浓度分别为0．04和0．03μg／mL，线性范围分别为0．1—500和0．1～100μg／mL，方法的回收率为92％-106％，相对标准偏差（RSD）为1．0％-2．5％。此外，进一步考察C18SPE小柱富集微量3，4-二氯苯腈的方法，可以实现3，4-二氟苯腈粗品中3，4-二氯苯腈的含量分析，自制的3，4-二氟苯腈样品中，3，4-二氯苯腈的含量为0．2％，加标回收率为97％。

亚微米铂粒子修饰电极液相色谱电化学检测巯基化合物的研究

该文研究了亚微米铂粒子修饰电极的制备方法。并将该修饰电极与高效液相色谱脉冲安培检测法(HPIC-PAD)联用,分别检测了半胱氨酸(L-Cys)、谷胱甘肽(GSH)和青霉胺(PEN)三种巯基化合物。结果表明该修饰电极对这三种巯基化合物有良好的催化氧化作用;由于PAD的周期性的阳极高电位和阴极低电位能很好地清洗和再活化电极表面,应用PAD方法能有效提高巯基化合物的电流响应。此外,结果还表明,L-Cys、GSH和PEN的电流响应与其浓度呈现良好的线性关系,其检出限分别为1.1×10^(-7)mol/L、1.8×10^(-7)mol/L和3.8×10^(-7)mol/L(S/N=3)。与微渗析技术联用,该方法成功地用于大鼠脑中L-Cys和GSH的测定。这为电分析化学在临床医学、生理学等生命科学中的应用提供了新的手段。

Pt/PolyCuTAPc/Nafion修饰电极及其应用的研究

本文报道了用电化学聚合方法制备聚四氨基铜酞菁Pt/PolyCuTAPc/Nafion修饰铂微电极 ,并用该修饰电极制得了气氧传感器 ,研究了传感器的电化学行为并应用于气氧的测定。实验发现 ,该传感器对氧有很好的催化还原作用 ,对气体氧测定具有很高的灵敏度、选择性及较好的抗污染能力 ,响应时间小于 5s ,平行测定 7次气氧浓度 ,相对标准偏差为 0 .36 %。

高效液相色谱法同时测定冷饮中禁限用色素胭脂虫红酸、喹啉黄和碱性蓝26

在儿童食品中对胭脂虫红酸、喹啉黄和碱性蓝26的添加的监控是十分重要的。建立了棒冰样品中同时检测胭脂虫红酸、喹啉黄和碱性蓝263种红黄蓝色素的高效液相色谱定量分析方法，以乙腈-0．1％甲酸水溶液（pH4．0）为流动相，Hydrosphere．C18色谱柱分离，双波长检测器检测，其检测波长随出峰情况分别先后调整为280、410和595Nm；可以实现棒冰样品中添加的胭脂虫红酸、喹啉黄和碱性蓝26的含量分析。该方法胭脂虫红酸和喹啉黄的线性范围均为0．4—100μg／mL，最低检出浓度均为0．2μg／mL，而碱性蓝26的线性范围为0．3—50μg／mL，最低检出浓度均为0．1μg／mL；方法的回收率为90％-98％，峰面积的相对标准偏差（RSD）为0．5％-3．7％。此外，我们还进一步考察了前处理方法中采用聚酰胺固相萃取法实现棒冰样品的净化和富集，与高效液相色谱法联用可以实现上述3种色素的同时分析检测。

海水中噻唑啉酮和异噻唑啉酮的高效液相色谱测定

标题化合物为一类新型的海洋防污剂,但在海水样品中因其较低的溶解度使得其含量十分低。为此,建立了同时分析检测6种标题类化合物的高效液相色谱定量分析方法,以甲醇-水溶液为流动相,Eclipse XDB-C18色谱柱分离,二极管阵列检测器检测,检测波长为225和280 nm,可以实现有机溶剂中（甲醇）样品中添加的1,2-苯并异噻唑-3（2H）-酮（BIT）、3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐水合物（MBT）、5-氯-2-苯并噻唑啉酮（CBT）、6-溴-2-苯并噻唑啉酮（BBT）、2-正辛基-4-异噻唑啉-3-酮（OIT）和4,5-二氯-2-正辛基-4-异噻唑啉-3-酮（DCOIT）6种化合物的含量分析。它们的检测下限分别为1.7×10^-6、4.1×10^-5、1.8×10^-6、1.1×10^-6、3.6×10^-7、2.5×10^-7mol/L,回收率为92%~110%,RSD为2.6%~3.6%。此外,我们还进一步考察了C18小柱固相萃取前处理方法,可以实现海水样品中添加2.5×10^-7mol/L DCOIT的分析检测,方法的回收率为92%。

N-甲基-2-吡咯烷酮有机试剂中微量阴离子杂质的分析

高纯度的化学试剂是许多食品分析、制药分析、工业制造等行业中的关键性基础化工材料之一，其中微量杂质的分析是发展这类试剂产业的关键技术环节之一。建立了高纯度有机试剂中的3种阴离子的离子色谱定量分析方法，分别以5和20mmol／L NaOH为流动相，Ionpac AS11-HC阴离子通用分析柱进行分离，电导检测器检测，可以实现HPLC级甲醇样品中添加的Cl^-、SO4^2-和NO3^-的含量分析。该方法3种离子的线性范围在5—100μg／L之间，3种阴离子的最低检出浓度分别为2（Cl^-）、5（SO4^2-）和5μg／L（NO3^-），方法的回收率为93％-107％，相对标准偏差（RSD）为2．0％～3．5％。此外，我们还进一步考察了前处理方法中采用WAX固相萃取技术对色谱纯的N-甲基-2-吡咯烷酮试剂中的阴离子进行富集，可以实现该样品中上述3种阴离子的分析检测。

异噻唑啉酮化合物的合成及其在海洋防污领域的研究进展

为了保护海洋环境、维护海洋生态平衡,环境友好型海洋防污剂已逐渐取代传统的海洋防污剂,成为目前海洋防污剂研究的主导方向。标题化合物是一类新型的高效广谱杀菌剂,具有高效、低毒、药效持续时间长、对环境安全等优点,因此被广泛地应用于海洋防污领域。总结了近年来异噻唑啉酮类化合物的制备方法以及其在海洋防污方面的研究进展,最后对此类化合物的应用和发展趋势进行了展望。

铁蛋白纳米粒子的修饰及细胞内化特性的研究

通过基因工程的方法将人表皮生长因子(EGF)和TAT分别修饰于FTH1亚基的N端,采用原核表达系统可获得EGFR靶向修饰的铁蛋白重链亚基蛋白(EGF∷FTH1)和修饰有穿膜肽的铁蛋白重链亚基蛋白(TAT∷FTH1)。随后,将变性的EGF∷FTH1与TAT∷FTH1以一定比例混合进行复性得到TAT/EGF-FTH1双功能化的纳米粒子。荧光显微镜的结果表明,TAT的修饰能有效增强纳米粒子的内化效果。

二维液相色谱测定绿豆芽中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸

在豆芽食品中对添加的植物生长调节剂的监控是十分重要的。在此基础上建立了绿豆芽抽提样品中赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸4种植物生长调节剂的二维液相色谱定量分析方法。实验中以ZB-10 C18(ODS-AP,10 mm×10 mm)为第一维色谱柱,V(甲酸)∶V(甲醇)∶V(水)=1∶10∶89溶液等度洗脱,实现绿豆芽样品的前处理净化;随后通过阀切换将分析物转移至第二维色谱柱(Supersil ODS 2. 5μm,4. 6 mm×150 mm),以甲醇-0. 1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,并以紫外254 nm为检测波长实现上述4种植物生长调节剂的分离分析。该方法中,赤霉素、6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸的线性范围分别为0. 004~2、0. 000 1~0. 2、0. 005~2以及0. 008~2 mg/m L,检出限分别为1. 4、0. 03、1. 6、2. 4μg/m L;峰面积的RSD为2%~3%,回收率为95%~104%。实际样品的分析中,发现该绿豆芽样品中赤霉素和2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0. 018 mg/g和0. 006 mg/g,4-氯苯氧乙酸未检出。另外,还发现样品中由于存在干扰物而不能准确定量分析低浓度的6-苄基腺嘌呤。研究表明,该方法可以应用于绿豆芽的直接抽提样品,对其中的赤霉素、4-氯苯氧乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸能准确进行定量分析,不需进一步的样品前处理。