茉莉酸信号转录抑制关键组分JAZ与NINJA互作体系建立及复合体结晶条件筛选

[目的]本文旨在建立JAZ与NINJA蛋白离体和活体互作以及2个蛋白复合体晶体筛选的体系,并获得2个蛋白复合体晶体。[方法]采用酵母双杂交和双分子荧光互补法用于活体条件下JAZ与NINJA蛋白互作区域的验证;在离体条件下,通过氢氘交换质谱(HDX)和Alpha Screen验证JAZ与NINJA蛋白的互作区域并进一步筛选2个蛋白互作的最小区域;使用原核(大肠杆菌)表达系统、亲和层析和凝胶过滤层析纯化等手段获得NINJA截短蛋白。将NINJA截短蛋白与JAZ多肽按照物质的量比为1∶1.5混合孵育一段时间,通过坐滴结晶方法进行复合体结晶,最终获得复合体晶体。[结果]成功创建了JAZ与NINJA离体和活体互作体系;获得JAZ多肽与NINJA(342~406)的复合体晶体的条件分别是0.2 mol·L^(-1) CaCl_(2)·2H_(2)O、0.1 mol·L^(-1) BIS-Tris(pH6.5)、45%2-甲基-2,4-戊二醇与0.2 mol·L^(-1)醋酸铵、0.1 mol·L^(-1) Tris(pH8.5)、45%2-甲基-2,4-戊二醇。[结论]JAZ蛋白ZIM结构域的TIFY基序和羧基端与NINJA(342~406)是JAZ与NINJA蛋白互作所必需的;JAZ蛋白ZIM结构域是JAZ同源和异源互作所必需的;成功获得了JAZ与NINJA复合体晶体。

背阔肌切取联合腺体切除双腔镜背阔肌乳房重建术技术要点

传统腔镜和机器人辅助背阔肌乳房重建术虽然实现了供区瘢痕小,但存在手术操作难、时间长、并发症发生率高、美容学获益有争议等问题。逆序法联合辅助孔的双腔镜创新技术能够解决上述困境,具有缩短手术时间、简化手术程序、提高手术安全性且视野清晰、美容学效果较好等优点。

局部进展期直肠癌新辅助治疗研究进展

目的分析各新辅助治疗策略的优劣,为临床诊疗提供参考,并为进一步研究探索提供方向。方法检索并查阅近年来国内外医学数据库(PubMed、EMBASE、Cochrane Library、维普数据库、中国知网、万方数据库等),对局部进展期直肠癌新辅助治疗的相关文献进行综述。结果新辅助治疗可以降低肿瘤分期、提高保肛率、降低局部复发率,但并未显著降低远处转移率和侧方淋巴结转移率,也未改善长期生存。越来越多的优化新辅助方案应运而生。分子靶向药物和免疫治疗正被尝试应用于临床,结合新兴生物学标志物的研究,以提高局部进展期直肠癌患者的疗效,并减少治疗相关副作用,改善患者的生存获益。结论新辅助治疗是局部进展期直肠癌标准治疗策略,对新辅助治疗模式的探索有望进一步提高治疗效果、减轻毒副反应,并改善生存预后。通过结合肿瘤分子生物学指标识别和筛选获益人群,有望成为未来研究的重要方向。