SCN4A基因突变导致的一个先天性副肌强直家系研究

目的分析一个疑似先天性副肌强直家系致病突变,为产前分子诊断提供依据。方法针对该家系临床表型进行分析,确定待测基因。用PCR-直接测序法分析目标基因的外显子及其侧翼序列,寻找致病突变。对筛查出的突变用Poly Phen和NCBI网站进行致病性与保守性分析,同时结合家系分析评估突变位点的致病性。结果对目标基因SCN4A进行突变分析,发现家族中患者均存在c.3473C>T杂合突变,健康成员均未发现该突变,属于常染色体显性遗传;生物信息学分析该突变位点编码氨基酸由脯氨酸变成亮氨酸,突变所在区域高度保守,该突变具有高度致病性。结论证实了一个先天性副肌强直家系中SCN4A基因的新致病突变c.3473C>T,为患者选择胚胎植入前诊断健康婴儿提供了依据。

产吴茱萸碱或吴茱萸次碱结构类似物的吴茱萸内生真菌的筛选

为了筛选可表达吴茱萸碱或吴茱萸次碱以及结构类似物的内生真菌,采用纯培养技术与菌丝尖端分离技术获得吴茱萸内生真菌23株,对其进行液体发酵培养,对内生真菌发酵液和菌丝体的乙醇提取物进行薄层层析分析,结果表明,23株吴茱萸内生真菌中有5株可产吴茱萸次碱或其结构类似物。

龙开口水电站碾压混凝土重力坝固结灌浆施工

介绍龙开口水电站碾压混凝土重力坝固结灌浆施工,通过固结灌浆提高岩石整体性与均质性,减少岩体变形等诸多优点。

高坪桥水库混凝土面板施工及质量控制

高坪桥水库堆石坝混凝土面板采用无轮无轨滑模施工工艺,滑升速度快,表面光滑平整。施工中采取大坝填筑到顶经过预沉降5个月后再进行面板混凝土浇筑的方案。本文对混凝土的原材料、配合比、运输、坍落度、模板、振捣、养护、防裂等工序进行了翔实地施工和质量管控论述,具有较好的参考价值。

浅谈导流洞下闸封堵施工技术

水利水电工程导流洞在完成导流任务后,必须进行下闸封堵。科学合理地进行导流洞的封堵不仅可以保证后续施工的安全,还可以对整个施工工程的顺利进行起到保护作用。龙游县高坪桥水库工程导流洞下闸封堵在枯水期进行,施工方案合理,技术保障到位,通过精心组织施工,封堵严密可靠,无渗漏,做到了一次成功封堵,按期顺利地完成了导流洞封堵施工任务。

COL6A3基因新突变导致的Bethlem肌病家系研究

目的应用遗传性肌病基因芯片捕获测序对一个肌营养不良家系进行分子遗传学检测，从基因水平确定其病因，进而分析其临床特点，为遗传咨询和产前诊断提供依据。方法针对一个肌营养不良家系，首先通过表型进行临床诊断，检测特定的基因。在未能找到致病突变情况下，采用遗传性肌病目标捕获测序芯片，应用高通量目标区域捕获测序结合Sanger测序和生物信息学分析，确定该家系患者的致病突变。利用PolyPhen网站与NCBI网站对突变类型进行致病性与保守性分析，预测突变位点致病性。结果基因芯片捕获测序方式提示先证者COL6A3基因存在C．3353A〉C杂合突变，进一步的Sanger测序证实该家系中4例患者均存在同样的突变，而家系中正常成员则无此突变。生物信息学分析该突变导致编码氨基酸由组氨酸变成了脯氨酸，该位点区高度保守，突变后具有高度致病性。患者智力正常，肌活检提示肌源性损害，血清肌酸激酶轻度升高，疾病进展缓慢，亦符合Bethlem肌病临床特征。结论目标区域捕获测序是一种高效的基因诊断方法，应用该技术在一个遗传性肌病家系中发现COL6A3基因第8外显子c3353A〉C杂合突变，该突变可能导致Bethlem肌病，呈常染色体显性遗传方式。

两例携带idic（Y）（p）女性表型性发育异常患者的遗传学分析

目的对2例携带．dic（Y）（p）女性表型的性发育异常患者进行遗传学分析，探讨其临床表现与核型的相关性。方法应用常规染色体G显带分析患者的核型，荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）确定核型中嵌合体的比例，通过Sanger测序检测外周血中的SRY基因。结果常规G显带核型分析显示例1核型为mos．45，X[38]／46，X，＋mar[151]／47，XY，＋mar[5]／47，X，＋mar×2[2]／46，XY[4]。FISH检测发现其核型中存在12种细胞系，部分细胞系含有SRY基因，其中标记染色体为idic（Y）（p）。未发现SRY基因突变。例2核型为mos．45，X[25]／46，X，＋mar[35]。FISH检测证实标记染色体为未携带SRy基因的idie（Y）（p）。结论携带idie（Y）（p）的患者核型不稳定。女性患者有身材矮小和女性第二性征发育不全等特征。核型分析结合FISH检测可以进一步精确确定idic（Y）的断点，识别复杂的嵌合体类型，可为患者的诊断及预后分析提供依据。

一例轻型雄激素不敏感综合征患者AR基因新突变的鉴定分析

目的探讨1例轻型雄激素不敏感综合征患者的临床和分子遗传特征。方法收集患者临床资料，提取患者外周血单个核细胞全基因组DNA，用特异性引物-聚合酶链反应行雄激素受体（androgen receptor，AR）基因8个外显子扩增，扩增产物纯化后行直接Sanger测序，结果与GenBank比对。应用PolyPhen-2在线软件预测突变对蛋白功能影响，并查询比对突变所在位置在不同物种间的保守性；同法扩增90名无血缘关系的正常男性AR基因突变外显子片段，用限制性内切酶片段长度多态性分析该突变是否存在于正常人群。结果该患者AR基因第1外显子176位密码子发生AGC→AGA（S176A）错义突变；PolyPhen-2软件分析该突变很可能损害蛋白结构和功能（突变预测分值0．999），显示该密码子在不同物种间高度保守，90名无血缘关系的正常男性AR基因分析未发现该突变。结论AR基因的$176A突变可能是导致轻型雄激素不敏感综合征的一种新突变。