30株水禽沙门菌的分离鉴定与血清型分析

目的通过分析佛山及其周边地区水禽沙门菌感染的血清型分布特征,为防控水禽沙门菌病与制定公共卫生安全措施提供参考信息。方法本试验对发病水禽采用细菌分离纯化、生化特性鉴定、PCR方法鉴定获得30株水禽沙门菌,以玻片凝集反应法作血清型鉴定。结果 30株水禽沙门菌的血清型含4(B、D、C1、E1)个群别7种血清型,B群有25株沙门菌分离株,包括19株鼠伤寒沙门菌(S.Typhimurium)、3株乙型副伤寒沙门菌(S.Paratyhi)、2株印第安纳沙门菌(S.Indiana)、1株斯坦利沙门菌(S.Stanley);D群有肠炎沙门菌(S.Enteritidis)1株;C1群有2株波茨坦沙门菌(S.Potsdam);E1群有2株明斯特沙门菌(S.Muenster)。结论 30株水禽沙门菌分离株均为人兽共患血清型,其中B群鼠伤寒沙门菌为优势血清型,对于水禽感染沙门菌病的防控,应优先考虑鼠伤寒沙门菌感染。

番鸭源基因Ⅶ型新城疫病毒的生物学特性和免疫原性评价

为了解我国近年水禽主要流行的基因Ⅶ型新城疫病毒的生物学特性和免疫原性,通过攻毒试验和免疫保护试验测定了1株本实验室分离保存的番鸭源基因Ⅶ型新城疫病毒MDK/FS-SS/E/2007的致病指数、雏番鸭致病性和免疫保护性等特征。致病指数评价结果显示,该毒株符合新城疫病毒强毒株标准。雏鸭致病试验结果显示,攻毒组动物均出现沉郁、瘫痪和扭颈等神经症状,剖检可见脑部充血、出血,胰腺、脾脏和肝脏等器官出现变性坏死等典型新城疫临床特征。免疫保护试验结果显示,以该毒株制备的油乳灭活疫苗对雏番鸭进行3次免疫,免疫后42 d血清HI抗体几何平均滴度水平可达1∶238.9,能为番鸭提供有效保护。研究结果为水禽新城疫诊断与免疫防控研究提供了参考资料。

12个新城疫病毒分离株的F基因和HN基因序列分析

自1997年-2016年从广东佛山、肇庆、云浮等地疑似新城疫的家禽病料分离鉴定获得12株新城疫病毒,采用RT-PCR方法对所有分离株的F基因和HN基因进行扩增,产物经克隆并测序后与GenBank数据库中的参考毒株做遗传进化分析。12个分离株的F基因遗传进化分析结果显示,9株属于基因Ⅶ型,2株属于基因Ⅸ型,1株属于基因Ⅵ型。F基因同源性分析结果显示,12个毒株与目前疫苗株La Sota、B1、Mukteswar和Clone30的同源性在81.6%~91.5%之间,12个毒株间同源性的差异较大,9个Ⅶ型分离株之间的同源性在84.8%~99%之间;HN基因同源性分析结果显示,12个毒株与目前疫苗株La Sota、B1、Mukteswar和Clone30的同源性在80.9%~91.9%之间,12个毒株间同源性的差异较大,9个Ⅶ型分离株之间的同源性在84%~98.5%之间。氨基酸序列分析表明,12个分离株与NDV强毒株的氨基酸特征相符,有10个分离株的HN基因第514氨基酸残基出现Ⅰ→Ⅴ的变异,有9个分离株的F基因和HN基因的中和抗原位点出现变异。试验提示,当前广东部分地区的分离株与传统疫苗株之间存在抗原性差异,故应加强广东地区新城疫病毒的分子遗传监控。

鼠伤寒沙门菌人工感染鹅的病理组织学观察

为研究鼠伤寒沙门菌感染鹅的病理组织学变化,采取肌肉注射鼠伤寒沙门菌的方法,人工感染58日龄健康鹅,对试验鹅进行病理剖检,并采取心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、脑、胰腺和肠道病料制作病理切片,观察病理组织学变化。结果可见,受感染鹅18 h内开始出现死亡,死亡率达66.7%;主要病理变化为皮下、心肌、肝脏、脾脏、肠道、脑膜等多组织器官多处充血、出血,肝脏实质肿胀,表面可见大量大小不一的雪花状坏死灶,胆囊、脾脏肿大;病理组织学变化为心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肠道等多组织器官的细胞变性、坏死,大量红细胞及炎性细胞浸润。研究结果表明,鼠伤寒沙门菌感染鹅,致病性强、死亡率高,感染鹅可出现全身多组织器官充血、出血与组织细胞变性、坏死的急性败血症。

广东部分地区规模化种鸡场鸡白痢血清学调查

为了解广东部分地区规模化种鸡场鸡白痢血清流行学情况,试验随机抽检6个种鸡场775份血清,其中公鸡317份、母鸡458份进行血清学调查。结果显示:不同区域种鸡群鸡白痢平均阳性率为40.6%,其中公鸡平均阳性率为27.1%、母鸡平均阳性率为52.2%。调查结果表明:广东部分地区种鸡场鸡白痢感染情况较为严重,不同种鸡场鸡白痢阳性率、相同品种种鸡在不同鸡场以及同一鸡场内的不同品种鸡群的鸡白痢阳性率均存在差异。

1例鸡源血清4型禽腺病毒感染的实验室诊断

本研究从广州番禺某鸡场送检病死鸡中分离获得1株疑似Ⅰ群禽腺病毒。病鸡剖检以心包积液、肝脏呈土黄色并伴有出血点,肾脏肿胀、出血为主要特征。实验室通过血凝试验、PCR鉴定、序列测定及遗传进化分析、动物回归试验、病理组织学观察等进行一系列检测。结果显示,该毒株不能凝集鸡红细胞,根据FAdV的六邻体(Hexon)基因设计引物,进行PCR扩增和单克隆测序,PCR扩增出分子量约为550bp的特异性条带,通过序列测定和遗传进化分析表明,该分离病毒株与FAdV-4的相似性最高。同时用该分离毒株的鸡胚尿囊液感染28日龄雏鸡,试验鸡可复制出与临床相似病例,病理组织学观察可见,心肌细胞有炎性细胞浸润,肝内有嗜碱性包涵体等病变特征。综上,分离株B13为Ⅰ群FAdV-4。

4株鸭圆环病毒全基因组克隆与遗传进化分析

通过对广东佛山、中山等地出现以脱毛,皮肤潮红,生长缓慢为特征的樱桃谷商品肉鸭群的病鸭组织进行病原检测,初步诊断为鸭圆环病毒(DuCV)感染。采用常规PCR方法,扩增出4株DuCV的全基因序列,并进行序列比较及遗传进化分析。结果显示:4株DuCV全基因与德国株AY228555,广西株KC460527、KC460530、KC460532、KC460535属于同一进化分支,同源性为94.8%～99.3%,均属于DuCV-1型;而与DuCV-2型代表株台湾株AY394721的同源性为82.9%～83.4%。该研究为鸭圆环病毒感染的监控和诊断提供了依据。

H7N9亚型禽流感油乳灭活苗诱导鸭产生HI抗体的研究

为了解H7N9亚型禽流感油乳灭活苗对不同品种鸭诱导免疫应答的基本能力和不同接种方法诱导各种鸭产生HI抗体的情况,试验采用H7N9亚型禽流感油乳灭活苗对4个品种(番鸭、白鸭、水鸭、麻鸭)的雏鸭进行3种不同程序的免疫试验(2周龄肌肉注射0.3 mL/只为程序1,2周龄肌肉注射0.5 mL/只为程序2,2周龄肌肉注射0.3 mL/只、3周龄肌肉注射0.6 mL/只为程序3)。结果表明,程序1免疫的雏鸭可在免疫后2周产生4.09~5.73 log_2HI抗体,免疫后1~8周均值为4.54~7.03 log_2;程序2免疫的雏鸭可在免疫后2周产生4.20~6.27 log_2的HI抗体,免疫后1~8周均值5.53~6.57 log_2;程序3免疫的雏鸭可在免后2周达到4.91~7.36 log_2,免疫后1~8周均值6.31~7.87 log_2。结果提示,该疫苗对4种鸭都具有良好的免疫原性,免疫后可较快地产生较高水平的抗体,且维持较长时间(8周以上),同时初步建立了鸭H7N9亚型禽流感油乳灭活疫苗的基本免疫程序。

H7N9亚型禽流感油乳灭活疫苗诱导鸡鸭鹅产生HI抗体的试验

本试验采用H7N9亚型流感油乳灭活疫苗,对雏鸡、雏番鸭和雏鹅作3种不同程序的免疫试验["2周龄,0.3 mL/只,肌肉注射"(程序1)、"2周龄,0.5 mL/只,肌肉注射"(程序2)、"2周龄,0.3 mL/只,3周龄0.6 mL/只,肌肉注射"(程序3)],以了解H7N9亚型禽流感油乳灭活疫苗对鸡、番鸭、鹅诱导免疫应答的基本能力和不同接种方法诱导鸡、番鸭、鹅产生HI抗体反应的情况。研究结果表明,本疫苗对3种雏禽都具有较好的免疫原性,以番鸭反应最强,鹅、鸡次之;不同免疫程序分析表明,雏鸡和雏鹅,以程序3优于程序2,程序2优于程序1;雏番鸭,以程序3和程序2优于程序1。3种动物(鸡、鸭、鹅)各周平均HI效价分别为4.46 Log2、6.31 Log2、5.60 Log2。研究结果为H7N9亚型禽流感油乳灭活疫苗的评价及相关禽类的免疫程序的制订提供了依据。

广东部分地区水禽源沙门氏菌的分离鉴定与药物敏感性分析

为了了解水禽沙门氏菌对目前常用抗菌药物的耐药情况,试验对采集自广东部分地区27个水禽场疑似患病水禽的病变样品进行沙门氏菌的分离鉴定,并对分离菌株采用琼脂二倍稀释法进行20种常用抗菌药物的敏感性试验。结果表明：共分离到33株水禽沙门氏菌,它们对氨苄西林（AMP）、阿莫西林（AML）和恩诺沙星（ENR）的耐药率高达100%;对氯霉素（CHL）、氟苯尼考（FFC）、萘啶酸（NAL）和强力霉素（DOX）的耐药率均超过80.0%;对喹口恶啉类药物最为敏感,耐药率仅为12.1%。33株沙门氏菌有19种耐药谱,并且出现严重的多重耐药性,多重耐药率高达97.0%;其中6重耐药菌株占比为36.4%,在多重耐药率中所占比例最高。说明水禽沙门氏菌耐药现象非常严重和复杂,对抗菌药物的耐药谱越来越广,可选药物越来越少,联合用药效果越来越差。

水禽源沙门菌的分离鉴定与PFGE分子分型

为了明确目前广东省水禽源沙门菌的优势血清型及其分子流行病学动态,采用细菌分离纯化、生化特性鉴定和PCR扩增从316份样品中分离鉴定出188株水禽源沙门菌;采用玻片凝集法将分离株分为4(B、D、C1、E1)个群别8种血清型;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型法对分离株进行分子分型,得到PFGE-XbaⅠ带型62种,菌株间相似度为54.1%~100.0%,分为A^I共9个聚类簇与11个单一基因型。结果表明,广东水禽源沙门菌优势血清型为鼠伤寒沙门菌,PFGE-XbaⅠ带型具多样化,其中11种PFGE-XbaⅠ带型在区域和年份小范围集中流行,32种带型跨区域与跨时间交叉分布呈散在"流行暴发",不同血清型分离株的PFGE-XbaⅠ带型差异较大,相同血清型的分离株PFGE-XbaⅠ带型一般具有相同图谱型或聚类在一起。本研究采用PFGE法进行分子分型分析具有流行病学意义,并探明了本地沙门菌分离株血清型与分子分型的关系。

1株鹅源H9N2亚型禽流感病毒分子进化分析及对鹅的致病性

从广东地区鹅群采集的咽喉拭子中分离到1株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）并命名为A／Goose／Guangdong／A11／2016（H9N2）（GS／A11）。采用RT—PCR方法扩增出病毒的全基因片段，并进行序列比较及遗传进化分析。推导氨基酸序列分析表明，GS／A11的HA蛋白裂解位点序列为^333PSRSS↓GL^340，无连续碱性氨基酸，符合低致病性禽流感特征；GS／A11上的Q226L突变提示结合人α-2，6唾液酸受体的能力增加；M2蛋白中出现了与金刚烷抗性相关的S31N突变。基因遗传进化树分析显示，分离株病毒为三元重组基因型。为了解H9N2亚型对鹅的致病性，以10^9×EID80剂量经静脉注射6周非免疫鹅，攻毒显示，攻毒鹅无明显临床症状，仅表现为局部器官感染，可经喉气管和泄殖腔排毒。研究提示，该株H9N2亚型AIV对鹅无明显致病力，但感染后可持续排毒。该现象为流感病毒在鹅及其他禽类中流行并发生基因重组提供了机会，故应加强鹅H9N2亚型AIV的检测及分子遗传的演变监控。

2022年北京冬奥会冰球赛事转播创新思考

随着2022年北京冬奥会地临近,各类冰雪运动项目的转播工作在新技术加持下,正紧锣密鼓地进行测试当中。冰球作为冬奥会中最具观赏性的,也是唯一可以身体对抗的球类赛事,自然成为2022年北京冬奥会的重要赛事项目之一。该文将从我国冰球赛事转播的现状和特点出发,以期提出对2022年北京冬奥会冰球赛事转播方案创新路径上的新思路。