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儿童纵隔神经源性肿瘤单中心外科治疗经验 被引量:1
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作者 曹正浓 刘丹 +1 位作者 王雅楠 贾慧敏 《临床小儿外科杂志》 CAS CSCD 2022年第3期231-235,共5页
目的 分析儿童纵隔神经源性肿瘤行手术治疗患儿的临床特征、治疗方法及预后。方法 收集中国医科大学附属盛京医院小儿外科2012年1月至2021年12月间收治的30例纵隔神经源性肿瘤患儿临床资料,对其临床症状、影像学表现、治疗方法、病理类... 目的 分析儿童纵隔神经源性肿瘤行手术治疗患儿的临床特征、治疗方法及预后。方法 收集中国医科大学附属盛京医院小儿外科2012年1月至2021年12月间收治的30例纵隔神经源性肿瘤患儿临床资料,对其临床症状、影像学表现、治疗方法、病理类型及预后资料进行回顾性分析。结果 30例患儿平均年龄4.7岁(1~13岁),男20例,女10例。8例患儿未出现特异性症状(8/30,26.7%),7例为检查过程中意外发现,1例为肾上腺节细胞神经母细胞瘤术后随诊过程中发现;18例患儿因呼吸道症状就诊(18/30,60.0%),表现为咳嗽、咳痰、喘息等;2例胸背痛(2/30,6.7%);2例锁骨上淋巴结肿大(2/30,6.7%);12例伴发热(12/30,40.0%)。行胸腔镜手术16例(53.3%),胸腔镜辅助开胸手术9例(30.0%),开胸手术5例(16.7%)。术后病理检查结果:神经母细胞瘤4例(13.3%),神经节母细胞瘤8例(26.7%),节细胞神经瘤16例(53.3%),神经鞘瘤1例(3.3%),原始神经外胚层肿瘤2例(6.7%)。30例中良性16例(53.3%),恶性14例(46.7%)。结论 小儿纵隔肿瘤症状不典型,难以早期发现,胸部CT及MRI是诊断的主要手段,经手术治疗后预后相对较好。 展开更多
关键词 膈/外科学 膈/病理生理学 肿瘤/外科学 肿瘤/诊断 治疗结果 儿童
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139例梅克尔憩室患儿诊断方式的临床分析
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作者 柳思佳 李勇 +2 位作者 刘丹 曹正浓 贾慧敏 《国际儿科学杂志》 2023年第1期66-69,共4页
目的分析比较超声、放射性核素显像、CT三种影像学检查在儿童梅克尔憩室(Meckel′s diverticulum,MD)术前诊断中的作用。方法回顾性分析2013年1月至2021年1月在中国医科大学附属盛京医院小儿普外胸外科住院疑似MD的139例患儿术前影像学... 目的分析比较超声、放射性核素显像、CT三种影像学检查在儿童梅克尔憩室(Meckel′s diverticulum,MD)术前诊断中的作用。方法回顾性分析2013年1月至2021年1月在中国医科大学附属盛京医院小儿普外胸外科住院疑似MD的139例患儿术前影像学资料,根据主要临床表现将病例分为便血组(69例)和非便血组(70例),分别比较三种检查方法在两组病例诊断中的灵敏度、特异度、准确率,探寻疑似MD患儿的诊断路径。结果(1)139例中经手术及术后病理确诊MD 122例。术前行超声检查121例,确诊MD 56例;行放射性核素显像66例,阳性46例;行CT检查116例,确诊MD 21例。(2)便血组超声诊断MD灵敏度78.2%(43/55),特异度88.9%(8/9),准确率79.7%(51/64);放射性核素显像诊断MD灵敏度81.4%(35/43),特异度50%(4/8),准确率76.5%(39/51);CT诊断MD灵敏度28.6%(14/49),特异度100%(8/8),准确率38.6%(22/57)。非便血组超声诊断MD灵敏度22.5%(11/49),特异度87.5%(7/8),准确率31.6%(18/57);放射性核素诊断MD灵敏度44.4%(4/9),特异度50%(3/6),准确率46.7%(7/15);CT诊断MD灵敏度12.1%(7/58),特异度100%(1/1),准确率13.6%(8/59)。(3)三种检查方法对便血组的诊断灵敏度均高于非便血组(均P<0.05),差异有统计学意义。结论对便血的患儿建议行超声及放射性核素显像联合应用以提高MD诊断率;若无便血,患儿仅以腹痛、呕吐等症状来就诊,建议行CT平扫或增强检查,有助于发现并发症及改善预后。 展开更多
关键词 儿童 梅克尔憩室 诊断 超声 放射性核素显像 CT
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TXNIP/NLRP3通过调控Wnt/β-catenin通路促进大鼠先天性肛门直肠畸形的发生
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作者 沈苗苗 刘丹 +3 位作者 曹正浓 戈舞 廉鹏 贾慧敏 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第5期439-446,共8页
目的研究胎鼠肛门直肠发育过程中硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)/NOD样受体家族含pyrin结构域3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)轴在泄殖腔发育中的作用。方法50只Wistar孕鼠被随机分为先天性肛门... 目的研究胎鼠肛门直肠发育过程中硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)/NOD样受体家族含pyrin结构域3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)轴在泄殖腔发育中的作用。方法50只Wistar孕鼠被随机分为先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)组和正常组,每组各25只,孕10 d分别按125 mg/kg给予乙烯硫脲(ethylene thiourea,ETU)及等量生理盐水灌胃,孕14 d、孕15 d和孕16 d剖宫取胎,显微镜下收集胎鼠的后肠组织。通过蛋白印迹法和免疫组织化学检测NLRP3炎性小体和TXNIP蛋白的表达量。进一步在IEC-6中转染si-NC/TXNIP,通过实时定量PCR和蛋白印迹法检测TXNIP在mRNA和蛋白水平的敲减效率,用蛋白印迹法、细胞免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测si-NC组和si-TXNIP组NLRP3炎性小体、β-catenin的蛋白变化及细胞上清液中IL-1β和IL-18的含量。采用2^(-△△CT)法分析目的基因mRNA相对表达量变化,观察各组细胞目的基因表达量的变化趋势,Western blot条带和免疫组织化学图片用ImageJ软件进行半定量分析,P<0.05表示有统计学意义。结果与正常组相比,TXNIP和NLRP3炎性小体的蛋白表达在ARM胎鼠的孕15 d和孕16 d时增加(P=0.0012、P=0.0081);与si-NC组相比,si-TXNIP组NLRP3活化受到抑制(P=0.0131),cleaved-caspase-1的蛋白表达降低(P=0.0386),细胞上清液中的IL-1β和IL-18含量减少(P=0.0035、P=0.0259),以及β-catenin的蛋白表达量降低(P=0.018)。结论TXNIP/NLRP3轴可能通过调控Wnt/β-catenin通路参与ARM的发生。 展开更多
关键词 肛门直肠畸形 硫氧还蛋白质类 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1
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先天性肺气道畸形中SOX10及COL2A1的差异表达分析 被引量:2
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作者 刘丹 曹正浓 +1 位作者 戈舞 贾慧敏 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第4期294-298,共5页
目的通过对SOX10及COL2A1在先天性肺气道畸形(congenital pulmonary airway malformation,CPAM)病变组织及正常组织中的表达分析,探讨SOX10及COL2A1在CPAM的发育过程中的作用。方法2018年11月至2020年11月,中国医科大学附属盛京医院收治... 目的通过对SOX10及COL2A1在先天性肺气道畸形(congenital pulmonary airway malformation,CPAM)病变组织及正常组织中的表达分析,探讨SOX10及COL2A1在CPAM的发育过程中的作用。方法2018年11月至2020年11月,中国医科大学附属盛京医院收治的30例CPAM患儿中,男19例,女11例;年龄为(44.67±37.42)个月;术前诊断为CPAM 1型17例,2型13例。收集所有患儿术中的病变肺组织及病变周围正常肺组织,将术中收集的病变肺组织作为CPAM组,将病变周围正常肺组织作为对照组。将CPAM组和对照组分别进行免疫组织化学染色、蛋白质印迹法检测及实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测,使用t-test统计学方法对蛋白质印记法及qRT-PCR结果进行统计学分析。结果免疫组织化学染色的结果显示SOX10及COL2A1在CPAM组的表达相对于正常组织中,主要高表达于病变肺组织中的囊壁、血管壁、肺间质及异常支气管壁上,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹法及qRT-PCR检测结果显示病变肺组织中SOX10及COL2A1的表达量明显高于在对照组中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论SOX10及COL2A1在CPAM组织中存在高表达,可能参与CPAM发育过程中的囊壁、血管及异常支气管的形成过程。 展开更多
关键词 SOX10 先天性肺气道畸形 COL2A1
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长链非编码RNA在先天性肛门直肠畸形发生发展中的作用机制研究
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作者 曹正浓 刘丹 +2 位作者 廉鹏 戈舞 贾慧敏 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期145-151,共7页
目的探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)发生发展中的作用机制。方法采用随机数字表法将42只健康SPF级Wistar孕鼠分为ARM组和对照组,孕10 d时分别予1%乙烯硫脲(ethylene t... 目的探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)发生发展中的作用机制。方法采用随机数字表法将42只健康SPF级Wistar孕鼠分为ARM组和对照组,孕10 d时分别予1%乙烯硫脲(ethylene thiourea,ETU)及生理盐水灌胃,并分别于孕16、17、19 d取7只大鼠剖宫取胎。分别对ARM组及对照组胎鼠在孕16、17、19 d三个时间点末端直肠组织lncRNA进行高通量测序分析,对具有显著差异的lncRNA进行靶基因预测,筛选出可能与ARM发生相关的lncRNA进行进一步验证与研究。采用实时荧光定量PCR检测ARM组及对照组胎鼠末段肛门直肠组织中的lncRNA AARB07048878.1表达水平差异,通过特异性干扰试剂及过表达质粒转染大鼠小肠隐窝上皮细胞系(IEC-6细胞系)细胞,采用CCK-8试剂法检测细胞增殖能力变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,采用Western blot检测细胞中Wnt5a蛋白的表达水平。实验数据两两比较采用独立样本t检验,多组间比较采用ANOVA。结果高通量测序及靶基因预测分析显示lncRNA AARB07048878.1可能与ARM发生相关。荧光定量PCR检测显示,相较对照组,ARM组胎鼠在孕16、17、19 d时lncRNA AARB07048878.1表达均下调,其中17 d时ARM组(0.48±0.13)与对照组(1.00±0.24)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰lncRNA AARB07048878.1表达后,干扰组与对照组比较,IEC-6细胞增殖能力下降(加入试剂后2 h:1.90±0.01比2.04±0.04;4 h:3.18±0.03比3.27±0.02),细胞凋亡率上升[(18.34±4.20)%比(11.57±3.54)%],Wnt5a蛋白表达降低(0.77±0.12比1.00±0.17),且组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01或<0.05)。过表达lncRNA AARB07048878.1后,过表达组与空白组比较,细胞增殖能力提高(加入试剂后2 h:1.96±0.04比1.80±0.03;4 h:3.44±0.06比3.16±0.03),细胞凋亡率下降[(8.48±2.89)%比(12.19±0.40)%],Wnt5a蛋白表达增加(1.29±0.07比1.00±0.12),且组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA AARB07048878.1可能通过抑制细胞增殖,促进细胞凋亡影响先天性肛门直肠畸形发生发展,其作用可能通过抑制Wnt5a表达实现。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 先天性肛门直肠畸形 机制
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lncRNA AC119762.8-201在乙烯硫脲诱导大鼠胚胎肛门直肠畸形中表达的初步研究
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作者 戈舞 刘丹 +3 位作者 曹正浓 廉鹏 沈苗苗 贾慧敏 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2021年第7期650-658,共9页
目的验证lncRNA AC119762.8-201在乙烯硫脲(ethylene thiourea,ETU)诱导的大鼠胚胎肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)中的差异表达;研究干扰及过表达lncRNA AC119762.8-201后对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(intestinal epithelial ce... 目的验证lncRNA AC119762.8-201在乙烯硫脲(ethylene thiourea,ETU)诱导的大鼠胚胎肛门直肠畸形(anorectal malformation,ARM)中的差异表达;研究干扰及过表达lncRNA AC119762.8-201后对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(intestinal epithelial cell line,IEC-6)的细胞增殖、迁移(上皮-间质转换)及Wnt5a蛋白表达水平的影响。方法选用体重250~300 g的健康成年未育的Wistar大鼠30只,其中雌鼠24只,雄鼠6只;雌雄大鼠按4∶1的比例于晚上合笼过夜,次日晨雌鼠做阴道涂片,在光镜下见到精子或阴道栓即确认已交配,当日为孕0 d(E0),选取明确受孕的18只雌鼠按随机数字表法随机分为大鼠ETU-ARM致畸组(9只)和大鼠生理盐水对照组(9只)。孕10 d(E10)时,将大鼠ETU-ARM致畸组一次性灌胃注入1%ETU(125 mg/kg),大鼠生理盐水对照组灌入等量生理盐水。在孕16 d(E16)、17 d(E17)和19 d(E19),对两组孕鼠剖宫并取出胎鼠。无菌操作下,从大鼠ETU-ARM致畸组中共取得162只胎鼠,根据肉眼及解剖显微镜下观察,若胎鼠出现无尾或短尾畸形,且肛门与外界不相通,直肠末端与尿道之间有瘘管连通,则纳入胎鼠ARM组(简称ARM组),ARM组共122只致畸胎鼠,致畸率为75.31%(122/162);从大鼠生理盐水对照组取得141只胎鼠,胎鼠尾部均正常,无肛门直肠畸形,肛门与外界相通且直肠末端与尿道之间无瘘管连通,为胎鼠正常组(简称正常组)。解剖显微镜下,在无菌条件下取出ARM组和正常组胎鼠的直肠末端组织置于-80℃冰箱保存备用。采用实时定量聚合酶链反应(quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测lncRNA AC119762.8-201的表达;提取IEC-6细胞质和细胞核RNA,通过qRT-PCR检测lncRNA AC119762.8-201在细胞中的定位;采用siRNA序列或过表达质粒转染的方法下调或上调IEC-6细胞中lncRNA AC119762.8-201的表达,通过细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖,蛋白质印迹法检测细胞上皮-间质转换及Wnt5a蛋白表达水平的影响。结果通过qRT-PCR验证lncRNA AC119762.8-201在ARM组及正常组胎鼠肛门直肠组织中的表达水平;结果显示在E16、E17及E19时,与正常组相比,lncRNA AC119762.8-201的表达水平分别为(0.47±0.02比1.01±0.08,0.80±0.16比1.00±0.02,0.41±0.06比1.02±0.09),lncRNA AC119762.8-201在ARM组中的表达水平下降,并且在E16和E19,ARM组及正常组之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。通过qRT-PCR验证lncRNA AC119762.8-201在IEC-6细胞质及细胞核中的表达水平。结果提示lncRNA AC119762.8-201在IEC-6细胞中有表达,且在细胞质(1.01±0.08)及细胞核(1.01±0.05)中均存在表达,差异无统计学意义(P>0.05)。在转染干扰si-RNA(si-NC和si-lnc)和过表达质粒(over-NC质粒和over-lnc质粒)对lncRNA AC119762.8-201表达水平的影响方面,转染si-RNA的结果显示,与转染si-NC的细胞(1.01±0.18)相比,转染si-lnc后,lncRNA AC119762.8-201的表达水平明显下调为(0.43±0.13),差异具有统计学意义(P<0.05);转染过表达质粒的结果显示,与转染over-NC质粒的细胞(0.98±0.02)相比,转染over-lnc质粒后,lncRNA AC119762.8-201的表达水平明显上调为(2960.31±167.95),差异具有统计学意义(P<0.01)。在lncRNA AC119762.8-201对细胞增殖的影响方面,结果提示当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时,细胞增殖能力呈下降趋势,6 h时的si-NC比si-lnc为(3.17±0.01比3.15±0.02),差异无统计学意义(P>0.05);12 h为(3.40±0.01比3.26±0.01),差异具有统计学意义(P<0.01);18 h为(3.55±0.01比3.35±0.05),差异具有统计学意义(P<0.01);24 h为(4.02±0.01比4.04±0.02),差异无统计学意义(P>0.05);相反,当过表达lncRNA AC119762.8-201时,细胞增殖能力呈升高趋势,6 h时的over-NC比over-lnc为(3.21±0.04比3.30±0.02),差异无统计学意义(P>0.05);12 h为(3.39±0.01比3.57±0.04),差异具有统计学意义(P<0.01);18 h为(3.59±0.01比3.69±0.03),差异具有统计学意义(P<0.01);24 h为(3.76±0.01比3.79±0.03),差异无统计学意义(P>0.05)。lncRNA AC119762.8-201在干扰或过表达状态下对E-cadherin、β-catenin、N-cadherin及Vimentin表达水平的影响,蛋白质印迹法检测结果提示,当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时,转染si-NC后E-cadherin和β-catenin的表达水平明显低于转染si-lnc后的表达水平,转染si-NC与转染si-lnc后E-cadherin的表达水平相比为(0.32±0.01比0.57±0.04),差异具有统计学意义(P<0.05);转染si-NC与转染si-lnc后β-catenin的表达水平相比为(0.89±0.03比1.48±0.05),差异具有统计学意义(P<0.01);转染si-NC后N-cadherin和Vimentin的表达水平明显高于转染si-lnc后的表达水平,转染si-NC与转染si-lnc后N-cadherin的表达水平相比为(1.47±0.01比0.90±0.0003),差异具有统计学意义(P<0.01);转染si-NC与转染si-lnc后Vimentin的表达水平相比为(2.02±0.03比1.02±0.02),差异具有统计学意义(P<0.01)。相反,当过表达lncRNA AC119762.8-201时,转染over-NC后E-cadherin和β-catenin的表达水平明显高于转染over-lnc后的表达水平,差异均具有统计学意义(P<0.05);转染over-NC后N-cadherin和Vimentin的表达水平明显低于转染over-lnc后的表达水平,差异均具有统计学意义(P<0.01)。lncRNA AC119762.8-201在干扰或过表达状态下对Wnt5a表达水平的影响,蛋白质印迹法检测结果提示,当干扰lncRNA AC119762.8-201的表达时,转染si-NC后Wnt5a的表达水平明显高于转染si-lnc后的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01);相反,当过表达lncRNA AC119762.8-201时,转染over-NC后Wnt5a的表达水平明显低于转染over-lnc后的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论本研究通过动物模型验证了lncRNA AC119762.8-201在ARM组大鼠肛门直肠组织中的表达水平较正常组降低,其表达水平的降低可能会抑制细胞增殖、细胞上皮-间质转换及Wnt5a的表达,从而影响ARM的发生和发展。 展开更多
关键词 大鼠 肛门直肠畸形 长链非编码RNA 细胞增殖 细胞迁移
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