黄芪甲苷对Ⅰ型糖尿病大鼠心肌细胞PGC-1α和NRF-1表达的影响

目的探讨黄芪甲苷(ASIV)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌细胞能量代谢及线粒体合成的影响。方法50只6周龄的SD大鼠,分为5组,每组10只,分别是空白组、模型组、ASIV 10、20、40 mg·kg-1组。除空白组,其余40只尾静脉注射STZ(35 mg·kg-1)建立Ⅰ型糖尿病心肌病模型。连续给药16周后,检测其左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张期末压(LVEDP)、左心室最大上升/下降速率(±dp/dtmax),苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理切片。ELISA检测心肌组织中ATP、ADP、AMP的含量。Western blot法检测心肌组织中过氧化体增殖物激活型受体γ共激活因子1α(PGC-1α)和核呼吸因子(NRF-1)蛋白表达,RTPCR检测心肌组织中PGC-1α和NRF-1 m RNA的表达。结果与空白组相比,模型组大鼠的LVEDP上升,LVSP、±dp/dtmax下降,ATP/ADP、ATP/AMP比值均下降。与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组变化不明显,中、高剂量组LVEDP下降,LVSP、±dp/dtmax上升,ATP/ADP、ATP/AMP比值均上升,PGC-1α与NRF-1的蛋白表达和m RNA表达均增加,有一定的剂量依赖性。结论黄芪甲苷通过提高PGC-1α和NRF-1的表达促进Ⅰ型糖尿病大鼠心肌细胞内线粒体的生物合成,提高能量代谢。

黄芪甲苷对高糖诱导的乳鼠心肌细胞氧化应激的影响

目的:观察高糖对心肌细胞的氧化损伤及黄芪甲苷(ASIV)对心肌细胞的保护机制。方法:培养SD乳鼠原代心肌细胞,用33.3mmol/L葡萄糖诱导心肌细胞,观察不同浓度黄芪甲苷(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)和NOX4抑制剂apocynin(100μmol/L)对高糖诱导的心肌细胞的影响。MTT法检测各组细胞存活率,DHE荧光染色检测各组心肌细胞活性氧簇(ROS)含量,使用试剂盒定量检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)的含量,Western blot法检测心肌细胞中NOX4蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,高糖组细胞受到损伤,细胞存活率明显下降,细胞内ROS、MDA生成增加,SOD、GSH-Px活力下降。高糖+黄芪甲苷(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)各组和高糖+NOX4抑制剂apocynin(100μmol/L)组均能有效抑制高糖对乳鼠心肌细胞氧化应激方面的损伤,表现为细胞存活率提高,细胞内的ROS、MDA表达明显下降,而SOD、GSH-Px活力显著增加,Western blot实验结果中NOX4的蛋白表达减少,且黄芪甲苷的药物作用具有一定的剂量依赖性。结论:黄芪甲苷能够通过减少NOX4的表达抑制高糖对乳鼠心肌细胞造成的氧化损伤。

黄芪多糖对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨黄芪多糖对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡蛋白及能量代谢的影响。方法:SD大鼠50只,随机分为对照组、糖尿病心肌病组、黄芪多糖200、400、800mg/kg组,后4组腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备糖尿病模型。造模后第7周起,对照组和糖尿病心肌病组给予纯净水,其余三组分别给予黄芪多糖200,400,800mg/kg连续给药6周,于第12周末用超声心动图仪测定,分别检测大鼠心脏质量指数、左心室质量指数、左心室舒张期末压(LVEDP)、左心室收缩压(LVSP),取左心室组织进行TUNEL染色,观察组织凋亡率。用RT-PCR检测过氧化体增殖物激活型受体r共激活因子1a(PGC-1a)的表达;Western检测Bax、bcl-2、caspase-3、PGC-1a的表达;ELISE检测血清中AMP、ADP、ATP含量。结果:糖尿病心肌病组的HMI和LVMI分别增加了55%和39%,LVEDP增大了2.2倍,LVSP降低23%;Bax,caspase-3分别降低了1.68倍和1倍,PGC-1a减少76%,bcl-2增加了62﹪;ATP/ADP,ATP/AMP比值分别降低了83%、82%;给药黄芪多糖800mg/kg组与糖尿病心肌病组比Bax,caspase-3表达降低了56%、41%;PGC-1a,bcl-2表达增加了2.5倍,1.3倍;ATP/ADP,ATP/AMP比值升高了4.1倍,4.0倍。结论:黄芪多糖可能通过影响PGC-1a的表达来减轻糖尿病大鼠心肌细胞的凋亡。