油茶WRKY基因家族鉴定及逆境胁迫表达分析

【目的】WRKY转录因子在植物应对生物和非生物胁迫中起重要调控作用。油茶是我国南方丘陵地区重要的经济树种,常受各种逆境胁迫影响。深入挖掘油茶WRKY基因家族成员并探讨其应对逆境胁迫的表达调控模式具有重要意义。【方法】以油茶全基因组数据为参考,利用生物信息学方法,鉴定分析了CoWRKYs基因家族成员,并基于油茶逆境胁迫的相关转录组数据,明确CoWRKYs在低磷、干旱和低温等非生物胁迫下的表达模式,最后基于qRT-PCR方法解析CoWRKYs在不同逆境胁迫下的瞬时表达特征。【结果】CoWRKYs基因家族包含89个成员(CoWRKY1~CoWRKY89)。根据系统发育特征可将其分为3大类,I类、II类和III类的数量分别为20、55和14。保守基序分析表明,进化关系密切的CoWRKYs蛋白具有相同或相似的基序组成。CoWRKYs在低磷、干旱、低温等非生物胁迫下表达谱分析的结果显示,65个CoWRKYs呈现显著表达差异,其中17个CoWRKYs同时受三种非生物胁迫的调控,且大部分基因在逆境胁迫下表现为上调表达,推测这些CoWRKYs在油茶的非生物逆境胁迫中可能起正调控作用。qRT-PCR结果表明,5个基因(CoWRKY11、CoWRKY14、CoWRKY20、CoWRKY29和CoWRKY56)在低磷、干旱和高盐胁迫下均被诱导表达,但不同基因在各逆境胁迫下的表达模式存在差异。其中,CoWRKY14在低磷胁迫24 h表达量是对照组的44倍(P <0.05)。推测该基因以正向调控促进磷吸收与转运,提升油茶耐低磷能力。CoWRKY20、CoWRKY29和CoWRKY56在干旱胁迫12 h的表达量分别是对照的24.2、32.3和34.8倍(P <0.05),呈现高表达模式,推测其在油茶干旱胁迫响应中具有重要作用。【结论】大部分CoWRKYs基因参与油茶抗逆胁迫响应,且表现为正向调控。其中CoWRKY11、CoWRKY14、CoWRKY20、CoWRKY29和CoWRKY56在低磷、干旱和盐胁迫下可以被快速诱导激活,参与油茶逆境胁迫响应。本研究为油茶WRKY转录因子的进一步功能分析奠定了理论基础,为油茶抗逆品质的遗传改良提供参考依据。

油茶NAC基因鉴定及对干旱胁迫响应分析

【目的】NAC是参与调控植物逆境胁迫反应的一类特异转录因子,在植物应对干旱胁迫中具有重要的调控作用。油茶是南方丘陵山地重要的经济树种,主产区夏季干旱严重影响了油茶生产。研究油茶应对干旱胁迫的响应机制具有重要意义。【方法】为明确油茶NAC基因家族成员并探究其对干旱胁迫响应的表达特征,本研究以油茶全长转录组为参考,通过蛋白序列比对和保守功能域,鉴定了67个CoNAC基因家族成员,进一步明确了各基因的结构、理化性质、系统进化关系、亚细胞定位。基于油茶干旱转录组数据,明确各CoNAC在油茶不同干旱程度和复水下的表达水平,并采用qPCR对CoNAC在不同油茶品种和不同干旱胁迫程度下的表达特征进行验证。【结果】根据系统发育关系,67个CoNAC可分为17个亚类,其中ANAC2亚类最多,有13个成员。亚细胞定位预测表明,大部分CoNAC蛋白都定位在细胞核,少数定位在细胞质、线粒体、叶绿体或细胞外。基于不同干旱程度和复水的转录组高通量测序数据,研究发现CoNAC基因表达模式存在一定差异。其中,在中度和重度干旱胁迫期,CoNAC28、51、52、56、60和61等基因的表达量随着干旱胁迫程度加强而持续增加。复水后,CoNAC28、51、52、56、60和61等基因均无表达或表达呈明显下降趋势。qPCR验证结果显示,在干旱胁迫和复水后,4个候选的CoNAC基因均表现出较为相似的表达趋势,即在干旱处理时表达量均呈显著上调,复水后下调,这与转录组表达谱结果基本相同。而候选CoNAC51和CoNAC52基因的表达趋势在干旱和复水后存在在品种间差异。在耐旱性较弱的长林18中,CoNAC52在干旱胁迫和复水后表现为先下调后上调,而CoNAC51基因表达量呈上升趋势。在相对较耐旱长林53中,2个基因的表达模式均呈现随着干旱胁迫上调,复水后下调。由此说明它们的表达调控在不同油茶品种中对水分的敏感程度不同,不同油茶品种对干旱胁迫的响应机制存在差异。【结论】CoNAC基因表达与油茶抗旱性有关,且CoNAC51和CoNAC52在不同油茶品种的表达模式差异能在一定程度上帮助解析油茶的耐旱机制。本研究为油茶NAC转录因子进一步功能分析奠定了理论基础,为油茶耐旱性的遗传改良提供参考依据。

芳樟叶片转录组测序及萜类合成调控相关基因表达分析

通过Illumina HiSeqTM 2000高通量测序技术对芳樟和杂樟(对照)叶片进行转录组学测序分析,并对所涉及的Unigene在GO、Nr、Nt、Pfam、KOG、Swiss-prot和KEGG中进行分类、功能注释和Pathway注释。结果表明:2类樟树叶片转录组检测共产生34.45 GB clean数据,组装了312 457个Unigene。其中,11 685个Unigenes鉴定为芳樟叶和杂樟叶的差异表达基因,在芳樟中6 481个被鉴定为上调的Unigenes和5 204个为下调Unigenes;对其进行GO功能富集发现并鉴定了编码萜类合成酶Unigenes 39个,包括单萜生物合成6个,二萜生物合成7个,倍半萜和三萜生物合成12个,萜类骨架合成14个。对萜类合成酶TPS14基因进行转录组FPKM和q-PCR验证发现,其表达量在芳樟中较杂樟更低,可能与其转录过程的选择性剪切有关。通过SSR位点分析,从88 016个Unigene中共检测到134 851个SSR位点,其中单个SSR位点有103 478个Unigene,含2个及2个以上SSR位点有31 373个Unigene。

杜牧与许浑诗混同初探

据有关史料载,作为许浑诗保留下来的,约530多首,作为杜牧的诗保留下来的,总数也与此不相上下。读《全唐诗》则发现这样的情况:把作为杜牧的诗而收录的50多首诗(1972年的《杜牧研究资料汇编》说是53首),又作为许浑的诗而重复收录了。一诗二主的数量之多,是颇为异常的现象。

小剂量布比卡因复合芬太尼腰-硬联合麻醉用于老年人下腹部及下肢手术体会

腰硬联合麻醉具有起效迅速,肌松完全,又可通过硬膜外导管给药延长麻醉时间,实行硬膜外术后镇痛等优点。传统观点认为老年人脊麻平面扩展快,加之心血管调节能力差,容易发生低血压,因此广大麻醉工作者在选择老年人脊麻时非常保守,大多倾向于选择硬膜外麻醉或气管插管全麻（心功能较差者）。随着医学的发展,临床经验的积累,近年来腰硬联合麻醉广泛用于下腹部及下肢手术。

新疆主要玉米杂交种及其亲本种子种苗的鉴定

玉米杂交种Sc704、京早8号、伊单5号、新玉6号、新玉3号、石单3号、沈单3号及其亲本的种子,以及种苗的芽鞘、叶鞘、第一片真叶,都各有固定的颜色和形态特征。这些特征,可用于识别品种的真伪,也可用于检验种子质量和田间去杂去劣。

双管喉罩通气全身麻醉在高血压病人手术中的临床观察

术前病人需要麻醉,这是减少病人痛苦,保证手术顺利进行和取得成功的重要条件。严重高血压会增加手术病人的心血管应激反应,增加麻醉的危险性。血压增高导致术野出血增加,患者心肌做功和耗氧量增加,有可能发生脑和心血管意外。高血压患者术中亦可发生低血压,可能发生心肌灌注不足,

顺式阿曲库铵类过敏反应一例

患者，女，11岁，体重32kg。ASAI级，诊断为腺样体增生，入院3d。血常规示PLT286．0×10^9，嗜酸性粒细胞0，62×10^9，嗜酸性粒细胞比率0．65％，凝血功能正常，心电图示窦性心率，心率93次／min。X线示：两肺及心膈正常，既往有过敏性紫癜，已治愈，否认药物过敏史，拟在静吸复合麻醉下行等离子腺样体切除术。

新生儿颞浅、桡、股动脉配对取血查血气分析的研究

1992年9月至1993年10月开封市儿童医院新生儿病区住院呼衰患儿进行了分组配对取血查BGA对照观察的研究，甲组为颞浅与股动脉同步取血50例，乙组为颞浅与桡动脉同步取血40例，并进行统计学处理，差异不显著，说明颞浅动脉取血标本合格，并优于其他取血部位。

改良角形压舌板引导下放置双管喉罩法

喉罩通气(LMA)作为一种新型的气道处理技术,由于其操作简便,插入喉罩过程中不会像插入气管导管那样引起心率和血压的明显改变,以及术后咽喉痛发生率低等优点,已经越来越广泛地应用于临床。对于喉罩的插入方法,多数用盲探手指弓导插入法和明视下插入法1]。为了增加放置双管喉罩的成功率而又减小其对口咽部的机械刺激,我们自制了角形压舌板,用于引导放置喉罩。临床应用104例,取得较好效果,并与盲探手指引导法对照,报道如下。1资料与方法1.1一般资料2009年6~12月。

组合喷射通气在全身麻醉硬质气管镜气道肿瘤治疗的应用

研究组合喷射通气在全身麻醉硬质气管镜气道肿瘤治疗的应用。方法 选择2020年10月至2021年10月时段我院收治的60例行硬质气管镜治疗的患者进行回顾性分析,按随机双盲法,每组各30例。对照组采用常频喷射通气,观察组采用高频喷射通气结合常频喷射通气。统计两组患者不同阶段的血流动力学、不同阶段的动脉血气以及术中不良事件。结果 两组患者在不同时段HR和MAP无显著差异(P>0.05);在T2、T3、T4这三个时段,观察组pH和PaO2/FiO2高于对照组(P<0.05),PaCO2低于对照组(P<0.05);观察组不良事件发生率低于对照组(P<0.05)。结论 将高频喷射通气结合常频喷射通气应用在全身麻醉硬质气管镜气道肿瘤治疗中,具有较高安全性和可行度,减少了手术操作对患者带来的伤害,提高了手术中的氧合指数,并将动脉血二氧化碳分压浓度维持在正常范围,同时能有效降低术中发生的不良事件,值得临床推广。

把绘画的乐趣还给儿童

因为孩子们喜欢画画，所以参加美术兴趣小组学习的孩子很多。但有些孩子在参加了一段时间后反而变得不爱画画儿了，还有些家长反应：“为了参加比赛，孩子们要画许多自己不喜欢也不感兴趣的内容，虽然得了奖，但对绘画自发的喜爱却减少了。”这是美术教师不希望看到的。为了避免这样的现象发生，在教学实践中，我注重给予儿童表达真情实感的自由，树立他们独立创作的信心与勇气，把绘画活动充满乐趣作为教学追求的目标之一。为了实现这个目标，我对4岁半至12岁的少年儿童进行了实践性研究。