天花粉毒蛋白免疫毒素对黑色素瘤细胞的体外抑制

用单链致核糖体失活蛋白天花粉蛋白(TCS)和抗人黑色素瘤单抗(Ng76)构建了免疫毒素(Ng76—TCS),它对体外培养的人黑色素瘤细胞M21具有强烈的抑制活性,IC_(50)为5.6×10^(-10)mol/L,其毒性比游离的TCS 和Ng76的混合物高2000倍,比TCS 与正常小鼠免疫球蛋白的复合物(NIgG—TCS)高160倍,而它对非靶细胞HeLa 的IC_(50)为7.0×10^(-?)mol/L,毒性较靶细胞低125倍。结果表明,免疫毒素TCS—Ng76对体外培养的黑色素瘤细胞有很强的选择性杀伤作用.

抗天花粉蛋白单抗用于天花粉蛋白免疫毒素的亲和纯化

天花粉蛋白（ＴＣＳ）是一种单链致核糖体失活的蛋白，用细胞融合技术筛选到一株分泌抗该蛋白单抗的杂交瘤细胞株（Ｔ１Ａ９），并将单抗Ｔ１Ａ９制成免疫亲和凝胶，用此亲和凝胶纯化以ＴＣＳ和抗人黑色素瘤单抗Ｎｇ７６构建的免疫毒素，能有效地分离掉样品中的游离抗体，提高免疫毒素的毒效。体外细胞毒性实验表明，亲和纯化的免疫毒素对黑色素瘤细胞（Ｍ２１）的杀伤作用比分子筛（ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００）层析后的样品提高了６．３倍。它对Ｍ２１细胞的半致死浓度（ＩＣ＿（５０））为１．０×１０￣（－１０）ｍｏｌ／Ｌ。比ＴＣＳ和Ｎｇ７６的混合物的毒性（ＩＣ＿（５０）＝２．５×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）提高了２５００倍。ＴＣＳ是制备免疫毒素的一种有效和常用的“弹头”，用此法纯化这类免疫毒素将会有一定的普遍性。

完整乙肝病毒Dane颗粒标志物preS1蛋白检测药盒的研制

乙肝病毒表面抗原的ｐｒｅＳ１主要存在于含ＤＮＡ的４２ｎｍ乙肝病毒颗粒表面，可作为完整病毒颗粒存在的标志。我们在筛选到抗ｐｒｅＳ１单抗的基础上，研制出ｐｒｅＳ１蛋白的检测试剂盒。经实验证实，ｐｒｅＳ１蛋白与ＨＢＶ－ＤＮＡ之间有很好的相关性，符合率为８０％。该试剂盒具有专一性强，重复性及稳定性好，操作简便等优点，可以作为检测乙肝病毒复制的一个血清学指标。对正确判断病人是否带有乙肝病毒颗粒和确定乙肝感染病程具有重要的参考价值。

抗Ⅲ型前胶原肽单克隆抗体的制备及初步应用

制备出两株分泌抗ＰⅢＰ（Ⅲ型前胶原肽）单克隆抗体的杂交瘤细胞株。竞争抑制ＥＬＩＳＡ试验表明：两株单抗与ＰＣＩ（Ｉ型前胶原）及ＣⅢ（Ⅲ型胶原）无交叉反应。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ示两株单抗均针对ＰⅢＰ构象决定簇。应用所制备的单抗对人肝细胞癌组织及大鼠、小鼠成纤维母细胞进行免疫定位。结果显示两种成纤维母细胞均呈明显膜阳性；肝癌细胞浆内呈粗颗粒状染色，提示肝癌细胞具有合成Ⅲ型前胶原的能力。

人肝细胞癌Ⅲ型前胶原的免疫定位

为探讨胶原在人肝细胞癌发生中的作用，应用抗Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）单克隆抗体对人肝细胞癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１及３０例人肝细胞癌组织进行免疫定位。结果肝癌细胞株呈明显膜阳性。１８例人肝细胞癌组织的癌细胞浆内，血窦壁明显阳性，而其相应的癌周肝细胞则呈阴性或弱阳性，表明肝癌细胞比癌周肝细胞合成更多的胶原。胶原的过度合成可能在肝癌的发生和发展中起一定作用。

笋瓜籽毒蛋白Maximin──一种新的蛋白质生物合成抑制剂的分离纯化及性质

笋瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｍａｘｉｍａ）种籽经去壳捣碎，乙醚脱脂，硫酸铵分级沉淀，阳离子交换层析及凝胶过滤等步骤，纯化到一种有蛋白质生物合成抑制活性的碱性蛋白，命名为Ｍａｘｉｍｉｎ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示单一条带，其分子量约为２８ｋＤ。该蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白生物合成有较强的抑制，ＩＣ_（５０）为４．０×１０^（－１０）ｍｏｌ／Ｌ，与天花粉蛋白（ＴＣＳ）毒性相似。从这些特性可见，该蛋白似为单链核糖体失活蛋白（ＲＩＰ）家族中的新成员，可望作为免疫毒素的一种新“弹头”。

测定铁蛋白浓度的双抗体夹心ELISA建立及应用

用抗人肝癌铁蛋白多抗和６Ｄ６单抗，建立了一种高灵敏度的测定铁蛋白的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。可溶性三羧甲基氨的铁络合物（ＦｅＮＴＡ）能促进细胞铁蛋白的生物合成，此法对ＦｅＮＴＡ处理后Ｈｅｌａ细胞中铁蛋白含量的测定表明，ＦｅＮＴＡ浓度升高，铁蛋白合成增加。血清铁蛋白测定结果显示，肝癌、肺癌病人的血清铁蛋白水平显著增高，本法可能对这两种癌的诊断具有一定的价值。

Construction of Luffin A Immunotoxin and Its in vitro Inhibition Against Human Melanoma Cell M_(21)

1 Introduction In recent years, significant progress has been made in applying immunotoxin (IT)in the therapy of leukemia and marrow transplantation. By 1990, several ITs havebeen put into clinical trials under the permission of FDA (Foodand Drug Administration, USA).