家蚕5龄幼虫期乙酰化修饰丝胶蛋白对蚕丝性能的影响

乙酰化修饰即在翻译中或翻译后的蛋白质分子链上嫁接乙酰基团,是通过化学修饰改变蛋白质性质的方式之一,丝胶蛋白是高度乙酰化的蛋白质。以丝腺组织大量合成丝蛋白的家蚕5龄第2天幼虫供试,分别将去乙酰化酶抑制剂TSA和乙酰化酶抑制剂C646自幼虫第2腹节注射入体内丝腺,上调和下调丝胶蛋白的乙酰化水平,探究通过乙酰化修饰丝胶蛋白的方法改善蚕丝性能的可行性。收集试验组家蚕的茧丝进行力学性能测试、红外光谱分析、X射线衍射分析、扫描电子显微镜(SEM)观察,结果证实丝胶蛋白的乙酰化修饰并不会改变蚕丝丝素的晶体结构,但具有增强丝胶与丝素表层附着力的作用。研究结果可为蚕丝精练脱胶和染整工艺的改进提供新的理论依据。

家蚕AGO2蛋白的单克隆抗体制备

Argonaute（AGO）蛋白家族在小RNA诱导的基因沉默中发挥重要作用。基于家蚕基因组测序发现的AGO蛋白编码序列,选择Bm AGO2为目标蛋白质,制备该蛋白质的单克隆抗体,为进一步研究其介导的miRNA靶基因以及基因调控网络奠定试验基础。通过分析Bm AGO2蛋白的抗原性分布,筛选出Bm AGO2抗原表位区aAGO2,设计引物扩增目的片段,构建重组表达载体p ColdⅡ-aAGO2原核表达aAGO2蛋白,以纯化后的aAGO2蛋白免疫BALB/c小鼠。剖取免疫小鼠脾脏,将脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合。以HAT选择培养基及间接ELISA法筛选阳性克隆,经Western blotting和免疫沉淀检测,获得2株生长状态好、能分泌高效价抗体的单克隆杂交瘤细胞株I5-A9和E1-3。经抗体亚型检测后,选择细胞株I5-A9进行大量培养,菌液注射小鼠腹腔制备的腹水经辛酸-硫酸铵沉淀及Protein A/G亲和层析纯化,获得了纯度较高的Bm AGO2单克隆抗体。利用获得的抗体免疫共沉淀家蚕卵巢培养细胞Bm N以及家蚕5龄幼虫的内源Bm AGO2蛋白,从分离的结合RNA检测到小RNA被显著富集,表明成功制备了可用于免疫共沉淀的Bm AGO2单克隆抗体并分离BmAGO2结合的RNA。

论伴侣动物对老年人焦虑情绪和幸福度的作用

目的研究伴侣动物对老年人焦虑情绪和幸福度的作用,进而通过饲养伴侣动物来降低老年人的焦虑情绪,提高老年人的生活幸福度。方法采用随机取样方式在济南市槐荫区抽取140名已经退休或离职的老年人作为研究对象,分为实验组（有伴侣动物的老年人）和对照组（没有伴侣动物的老年人）,各70人,平均年龄在55~65岁之间。采用焦虑自评量表和纽芬兰纪念大学幸福度量表对所有被试施测,剔除无效数据后,对有效样本进行数据统计分析。结果 1实验组幸福度得分显著高于对照组,t=3.969,p〈0.05;性别对被试的幸福度影响不显著,t=0.67,p〉0.05;曾从事的职业队被试的幸福度影响不显著,t1=1.187,p1〉0.05;t2=2.177,p2〈0.05;t3=1.048,p3〉0.05;t4=0.679,p4〉0.05;t5=0.178,p5〉0.05;t6=0.952,p6〉0.05。2实验组焦虑情绪得分显著低于对照组,t=-1.990,p〈0.05;性别对被试的焦虑情绪影响不显著,t=0.328,p〉0.05;曾从事的职业队被试的焦虑情绪影响不显著,t1=1.059,p1〉0.05;t2=2.109,p2〈0.05;t3=1.113,p3〉0.05;t4=0.694,P4〉0.05;t5=-0.064,p5〉0.05;t6=-0.956,p6〉0.05。结论伴侣动物对老年人的焦虑情绪和生活幸福度有着重要的社会支持作用。