SARS患者尸检肺组织的免疫组织化学观察

目的通过对严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)肺组织病变的免疫组织化学研究,结合组织学观察,探讨SARS肺部病变的特点及发病机制。方法以常规HE染色组织学观察结合CD8、CD20、CD34、LCA、CD56、CD68及AE1/AE3等单克隆抗体免疫组织化学染色,分别观察淋巴细胞、巨噬细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管等在肺病变中的数目及分布特点,观察肺组织内血管变化、肺泡上皮增生以及机化和纤维化改变,从而分析SARS肺病变的特点。结果从病变早期至早期纤维化,SARS肺组织中毛细血管数目增多,血管分布符合肺泡壁结构轮廓;炎细胞反应表现为淋巴细胞数目下降而巨噬细胞数目显著增多;Ⅱ型肺泡上皮显著增生;在晚期纤维化及实变的肺组织中,血管数目减少,管腔增大,分布分散,失去肺泡壁的结构轮廓。结论SARS肺部病变具有血管反应、渗出、增生及纤维化等特点,其中巨噬细胞渗出可能在发病过程中起关键作用。

头颈部鳞癌人乳头状瘤病毒16/18感染状态与Ki-67、P53表达的关系

目的通过测定人头颈部鳞状细胞癌组织中人乳头状瘤病毒(HPV)16/18感染和Ki-67、P53蛋白的表达,探讨HPV16/18感染和Ki-67、P53蛋白表达的相关性及意义。方法采用荧光定量PCR方法测定头颈部鳞癌患者肿瘤组织中HPV16/18DNA的含量,同时以免疫组织化学方法测定Ki-67、P53蛋白的表达状态。结果 62.8%的患者在头颈部鳞癌组织中检测到HPV16/18DNA,46.15%的患者肿瘤组织表达P53蛋白为阳性。患者肿瘤组织Ki-67的表达在2%～70%。HPV16/18DNA含量与患者的性别、吸烟、饮酒和临床分期无相关性(P>0.05),与病理学分级呈正相关(r=0.350,P=0.001),与Ki-67表达无相关性(P=0.179),与P53表达呈负相关(r=-0.197,P=0.04)。结论头颈部鳞癌的发生可能和HPV16/18感染有关,致病机制涉及P53蛋白的降低表达。

fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及意义

目的探讨fascin蛋白在结、直肠腺瘤和癌中的表达及其临床病理意义。方法用免疫组化方法检测41例结、直肠癌,38例腺瘤及20例正常上皮中fascin蛋白的表达。肿瘤细胞染色>5%的病例定为阳性。结果41例结、直肠癌中有17例(41·5%)表达,而且fascin蛋白的表达和浆膜侵犯(P=0·005)、肿瘤分级(P=0·002)、TNM分期(P=0·011)、淋巴结转移(P=0·011)、p53表达(P=0·047)及Ki-67表达(P=0·034)等因素相关,与年龄、性别、组织学类型无关。27例中、重度异型增生腺瘤中仅3例(11·1%)表达,11例轻度异型增生腺瘤及正常上皮均不表达。结论在结、直肠癌的多步发生过程中,fascin蛋白表达看来是一迟发事件,通常在癌中表达,并与肿瘤侵袭和转移相关,有可能成为新的治疗靶点。

MMP2、MMP9、Galectin-3、CK19、及Ret在甲状腺滤泡型肿瘤中的表达

目的 探讨MMP2、MMP9、Galectin 3、CK19和Ret在甲状腺良、恶性滤泡型肿瘤中的表达情况 ,以及其在病理诊断中的价值。方法 运用免疫组化方法检测 35例甲状腺滤泡癌、36例甲状腺腺瘤MMP2、MMP9、Galectin 3、CK19和Ret的表达情况。结果 MMP2和MMP9在甲状腺滤泡癌表达阳性率为 10 0 % ,而在甲状腺腺瘤中表达分别为 2 7.8%及 4 7.2 % ,二者在良、恶性肿瘤的表达差异极显著 (P <0 .0 1)。Galectin 3表达阳性率分别为 4 8.6 %及13.9% (P <0.0 5 )。CK19在甲状腺滤泡癌中阳性有所增高 ,但与腺瘤比较表达无差异。Ret几乎不在甲状腺滤泡型肿瘤中表达。同时观察 15例甲状腺滤泡癌癌旁组织 ,5种蛋白均不表达或表达甚少。结论 MMP2、MMP9及Galectin-3在恶性甲状腺滤泡型肿瘤中的表达高于良性 ,可能三者与促进甲状腺滤泡型肿瘤的浸润机制有关 ,其免疫组化染色虽无绝对特异性 。

肾球旁细胞瘤2例临床病理探讨

目的分析肾球旁细胞瘤的临床病理特征,探讨其生物学行为及预后因素。方法采用光镜和免疫组化方法,结合临床资料对比研究2例肾球旁细胞瘤的临床病理特点。结果 2例肾球旁细胞瘤患者均为男性,年龄分别为46岁和9岁,有高血压症状;均行肾部分切除术,术后随访1～6个月,无复发或转移。肿瘤位于肾皮质,直径2 cm,界清。例1具有典型的良性肾球旁细胞瘤特征,即瘤组织实性、片状分布,细胞呈圆形,大小较一致,胞质淡染或弱嗜酸性,胞核呈圆形或椭圆形,染色质细腻,缺乏核分裂;间质毛细血管和血窦丰富,透明变性的厚壁血管呈簇状分布。例2则由椭圆形、多角形、梭形及带状细胞构成,核异型性明显,核分裂8～10个/10HPF,可见病理性核分裂;部分区域呈席纹状或旋涡状生长。免疫组化示肿瘤细胞vimentin和CD34弥漫强(+),SMA不同程度(+);例1和例2的Ki-67指数分别为<1%和20%。结论肾球旁细胞瘤是一种良性肿瘤,少部分病例为恶性潜能未定。提示恶性潜能的临床病理指标包括血管或包膜浸润、肿瘤体积大、高核分裂象及年长或年幼患者。明显核异型对预后的影响尚不确定。

原发性心滑膜肉瘤4例临床病理分析

目的报道4例原发性心滑膜肉瘤，并总结分析此类疾病的临床病理特征。方法通过光镜、免疫组化及荧光原位杂交技术（FISH）分析其临床病理特征及免疫组化特点。结果本组4例心滑膜肉瘤年龄22～52岁，平均41岁；男女之比为1：3，均无滑膜肉瘤病史。1例有吸烟史。4例肿瘤最大径6～24cm，平均12．5cm；2例肿瘤位于心包，1例位于心房，1例位于心室。均行肿瘤局部切除术。镜下检查3例为单相型滑膜肉瘤，1例为双相型滑膜肉瘤。4例随访1天～24个月，3例死亡，1例存活。免疫组化：4例AEl／AE3、EMA、vimentin和bcl-2均（＋），3例CD99（＋），3例calponin（＋），1例S-100散在（＋）；4例desmin、SMA、CD34和calretinin均（-）；Ki一67阳性指数5％～35％，平均18％。结论原发性心滑膜肉瘤比较少见，诊断应首先排除转移性。单相型滑膜肉瘤较双相型多见，心包为最常见部位。原发性心滑膜肉瘤预后较差，特别是心包滑膜肉瘤预后极差，术后放、化疗有助于延长生存时间。

Survivin在人结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达

目的研究Survivin(SVV)在人结直肠腺瘤和腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测90例结直肠腺瘤、25例结直肠腺瘤伴重度不典型增生和108例结直肠腺癌组织中SVV、P53和Bcl-2的表达情况。结果SVV在结直肠腺管状腺瘤、绒毛状腺瘤、绒毛腺管状腺瘤等结直肠腺瘤组织中的表达率分别为30%(12/40)、40.9%(9/22)和35.8%(10/28),3组间差异无显著性(P>0.05)。SVV在绒毛腺管状腺瘤组织伴重度不典型增生组织,DukesA、B、C期结直肠腺癌组织中的表达率分别为68%(17/25)、75%(27/36)、81.3%(26/32)和95%(38/40),均明显高于结直肠腺瘤各组(P<0.05)。P53和Bcl-2在上述各组病例组织中的表达差异均无显著性(P>0.05)。SVV的高表达与Bcl-2和P53表达无相关性(P=0.487,P=0.437)。结论SVV在结直肠癌发生早期即有表达异常,可能与结直肠腺瘤癌变具有一定关系。SVV表达对结直肠腺瘤和腺癌的鉴别诊断具有一定意义。

母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤5例临床病理分析

目的探讨母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤的临床病理学特征。方法应用光镜及免疫组化法观察5例母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤的组织学特点及免疫表型,并复习相关文献。结果 5例中3例为男性,2例为女性,年龄分别为53、72、40、14及15岁。5例病变均以皮肤斑块或结节为首发表现,并均累及骨髓,其中1例累及淋巴结。皮肤病变显示肿瘤细胞在真皮弥漫分布,不累及表皮。肿瘤细胞中等大小,核圆形或椭圆形,染色质细腻。5例均表达CD56、CD123、CD43,3例表达CD4;5例均不表达CD8、Td T及EBER。5例均行化疗,1例死亡,2例放弃治疗后失访,2例健在。结论母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤是一种罕见的肿瘤,具有独特的临床病理特点,诊断依靠病理组织学及部分辅助方法。

免疫蛋白酶体亚基在干燥综合征唇腺中的表达

目的观察免疫蛋白酶体亚基人低分子质量多肽(LMP)2、LMP7在干燥综合征(pSS)患者唇腺中的表达情况,探讨其在pSS诊断、鉴别诊断和发病机制中的作用。方法收集40例pSS患者、15例非pSS的结缔组织病患者和9例正常人的下唇唇腺组织标本,通过免疫组织化学方法,观察LMP2和LMP7在3组唇腺组织中的表达情况;计算腺泡阳性率,半定量分析LMP2和LMP7在各组唇腺组织中的表达强度。对数据进行平方根反正弦转换后,采用单因素方差分析比较3组间的LMP2和LMP7的腺泡阳性率差异,用Spearman进行pSS组的腺泡阳性率与各临床检查结果的相关性分析。结果 LMP2和LMP7表达在腺泡细胞和导管上皮细胞。LMP2的腺泡阳性率3组间差异无统计学意义(P=0.369),LMP7的腺泡阳性率3组间差异均有统计学意义(P<0.01),pSS组高于结缔组织病组,结缔组织病组高于正常组;仅pSS组内的LMP7的腺泡阳性率高于LMP2(P<0.01)。pSS组内LMP2和LMP7腺泡阳性率与临床各检验结果无相关性(P>0.05)。结论 pSS患者唇腺中LMP7的表达明显增强,LMP2无明显上调,提示LMP7和LMP2两亚基的个体基因调节机制不同。

HER-2免疫组化染色方法及注意事项

研究表明,30%的人类肿瘤中存在表皮生长因子受体-2（HER-2）基因的扩增/过表达,其中20%的浸润性乳腺癌有HER-2基因的扩增/过表达。影响HER-2判读的重要因素是染色方法的标准化和结果判读标准。本文旨在探讨HER-2标准化的IHC染色方法。

肺腺样囊性癌中Myb与预后及p16与HPV感染的关系

目的探讨肺腺样囊性癌（PACC）中Myb蛋白表达及其与预后的关系,p16蛋白表达及其与HPV感染状况的关系。方法收集北京协和医院2000—2014年间PACC共27例,采用免疫组化En Vision法检测其Myb、p16的表达,并对p16阳性细胞数〉40%的病例用原位杂交方法进行HPV检测。结果 27例PACC,男女之比为8∶19,年龄24～74岁,平均年龄51岁;24例为肺原发性,3例为肺转移性。肺原发性病例中,18例随访1～132个月,其中5例复发或转移,1例死亡;6例失访。19例Myb（＋）（79.2%）,26例p16（＋）（100%）,对p16阳性细胞数〉40%的11例加做HPV ISH均为（-）。无复发和转移组Myb阳性率（66.7%,8/12）低于复发或转移组（100%,8/8）,原发性PACC组Myb阳性率（76.2%,16/21）低于转移性PACC组（100%,3/3）,差异不显著（P〉0.05）。结论大多数PACC中Myb为（＋）,但可能与预后无关。虽然p16也呈（＋）,但未检测到HPV感染,推测其可能不是PACC中p16蛋白阳性的原因。

气管上段腺样囊性癌的临床病理

目的探讨气管上段腺样囊性癌的临床病理特征及诊断和鉴别诊断要点。方法收集2000年1月至2014年2月在北京协和医院确诊的4例气管上段腺样囊性癌病例,通过光镜、免疫组织化学及组织化学染色分析其临床病理特征、免疫组织化学特点、诊断及鉴别诊断要点。结果 4例气管上段腺样囊性癌患者中,男1例,女3例,平均年龄47岁（38~57岁）;既往均无腺样囊性癌病史,1例患者既往有结节性甲状腺肿手术史。镜下检查4例均为筛状/管状型腺样囊性癌,3例累及甲状腺组织,3例累及神经组织,未见淋巴结受累。免疫组织化学染色示4例P16、CD117、BCL-2、P63、SMA均阳性,Ki-67指数平均8%,TTF-1和P53均阴性;4例中基底膜样物胶原Ⅳ阳性;组织化学染色示AB/PAS阳性。术后均接受总剂量为48~56 Gy的放疗,随访6~120个月,平均72.5个月,1例术后96个月复发,3例随访期间无复发及转移。结论气管上段腺样囊性癌是罕见的原发于气管的低度恶性肿瘤,肿瘤生长缓慢,就诊时多数已侵及甲状腺组织,需要与原发于甲状腺的恶性肿瘤相鉴别,特别是在甲状腺穿刺及术中冰冻检查时。结合电子喉气管镜下表现、典型的形态学及免疫组织化学和组织化学染色有助于准确诊断。手术难以切除干净,术后放疗对延缓疾病复发有一定帮助。

免疫组化手工操作与机器制片染色比较

自动免疫组化染色机的问世,不仅使人们从繁琐的手工劳动中解放出来,大大提高了工作效率,同时也使免疫组化染色的质量得到了一定的保障。使用全自动免疫组化染色机,可以有效地保证染色的准确性、可重复性及整体染色的一致性。笔者通过手工操作与机器染色两种染色方式对乳腺癌ER、PR和HER2三种抗体进行比较,探讨两种染色方式对抗体染色结果的影响。

简介全自动免疫组化染色机

免疫组化染色就是用免疫学方法进行组织化学染色,免疫组织化学技术是利用已知的特异性抗体与特异性抗原结合的特点,通过化学反应使标记于特异性抗体上的显色剂显现出颜色,从而在抗原抗体结合部位确定组织、细胞结构的技术。

肺转移性腺样囊性癌3例临床病理观察

目的 报道3例肺转移性腺样囊性癌（ACC）,并总结分析此类疾病的临床病理特征.方法 通过组织形态、免疫组化及组织化学染色分析其临床病理特征及免疫组化特点.结果 3例肺转移性ACC患者年龄分别为37岁、54岁和60岁,男女之比为2∶1;既往均有头颈部腺样囊性癌病史,确诊后9-14年（平均11年）出现肺内结节.胸部CT或X线检查示肺内多发结节,未见气管病变.1例经皮肺穿刺活检,2例行肺楔形切除术.镜下示3例均为筛状/管状型,未见实性区及高级别转化区域.3例均可见粉染基底膜样物质和蓝染黏液样物.3例随访3-48个月（平均25个月）,1例穿刺确诊后接受化疗,23个月后死亡;2例肺楔形切除术后放疗,病灶缩小,未见其他脏器受累.免疫组化：3例CD117、bcl-2和p16均（＋）;SMA和p63肌上皮（＋）;3例基底膜样物胶原Ⅳ均（＋）;3例GFAP及TTF-1均（-）;仅1例p53（＋）;Ki-67阳性指数2％-10％,平均6％.组织化学：3例AB/PAS均（＋）.结论 肺内原发性ACC非常罕见,诊断应首先排除转移性.筛状/管状型ACC转移到肺可以经历较长时间,发现肺内多发结节应考虑到转移癌.手术切除及术后放疗有助于治疗.

S100A4及CEACAM-1蛋白与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性

目的探讨S100A4及CEACAM-1蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法收集整理102例手术切除的甲状腺乳头状癌病例标本,分析其相关临床病理因素并应用免疫组织化学EnVision及Histofine Simple Stain MAX两步法检测癌组织中S100A4、CEACAM-1、cyclinD1及p27Kip1蛋白的表达,运用单因素及多因素分析研究上述因素与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的相关性。结果 S100A4及CEACAM-1蛋白在甲状腺乳头状癌标本中的阳性率分别为79.4%(81/102)和51.0%(52/102);通过单因素分析,发现年龄<45岁、肿物直径>1cm、S100A4阳性表达及CEACAM-1阴性表达与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关。性别、纤维化、肿物包膜完整、组织学亚型(滤泡型或其他亚型)、伴发桥本甲状腺炎、多灶、侵及甲状腺包膜外(镜下),cyclinD1及p27Kip1的阳性表达与淋巴结转移无关。进一步的多因素分析发现:年龄<45岁、S100A4阳性表达及CEACAM-1阴性表达为甲状腺乳头状癌淋巴结转移的独立性危险因素。结论 S100A4的阳性表达及CEACAM-1的阴性表达与甲状腺乳头状癌淋巴结转移相关,可作为甲状腺乳头状癌淋巴结转移的预测因素。

细胞角蛋白和Ret蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达

目的 探讨甲状腺乳头状癌中细胞角蛋白 (CK)和ret的表达及其在病理诊断中的价值。方法 分别采用免疫组织化学EnVision法及LSAB法检测CK19、CK17、CK8、CK2 0及ret在 6 9例甲状腺乳头状癌、14例结节性甲状腺肿和 4 2例癌旁正常滤泡中的表达。结果 CK19、ret在乳头状癌组织的阳性率 (85 5 %、6 8 1% )明显高于结节性甲状腺肿和正常滤泡组织阳性率 (2 5 0 %、5 4 % ) ,二者差异有统计学意义 (P <0 0 1)。CK17在乳头状癌中有少量表达 (15 9% ) ,主要集中在鳞化及分化差或小灶浸润区域。分别有 75 4 %及 2 6 8%的乳头状癌及良性区域CK8染色阳性 ,所有病例CK2 0阴性。结论 CK19、CK17及ret在甲状腺乳头状癌中表达增加 ,在病理诊断中有一定价值。

肺黏膜相关淋巴组织边缘区B细胞淋巴瘤及良性淋巴组织增生性疾病的临床病理分析

目的研究肺原发性黏膜相关淋巴组织边缘区B细胞（MALT）淋巴瘤及良性淋巴组织增生性疾病的临床病理形态、免疫组织化学表型和B细胞重链基因重排，比较肺MALT淋巴瘤和良性淋巴组织增生性疾病的差异。方法回顾性的分析原发性肺MALT淋巴瘤13例，7例肺良性淋巴组织增生性疾病资料。对标本行常规HE染色，EnVision免疫组织化学染色（抗体包括AE1／AE3、CD20、CD79α、CD3、CD5、CD10、CD21、bcl-2、bcl-6、cyclinD-1）及免疫球蛋白重链IgH基因重排检测。结果13例肺MALT淋巴瘤，细胞成分多样，分别由不同比例的小淋巴细胞样细胞、中心细胞样细胞、单核样B细胞组成，常伴有浆细胞分化。肿瘤细胞以弥漫性和滤泡边缘区排列为主，常见反应性淋巴滤泡和滤泡中心的植入。肿瘤细胞呈串珠状直接侵犯肺泡间隔和沿支气管血管束向周边及肺膜扩散。MALT淋巴瘤中，均未见坏死。9例可见肿瘤细胞侵犯血管壁，6例可见胸膜累及，2例肺门淋巴结侵犯。9例肺MALT淋巴瘤可见淋巴上皮样病变，免疫组织化学显示上皮细胞内的淋巴细胞CD20阳性，CD3阴性。7例肺良性淋巴组织增生性疾病，2例可见淋巴上皮样病变，免疫组织化学显示，其淋巴上皮样病变内的淋巴细胞，部分CD20阳性，部分CD3阳性。9例肺MALT淋巴瘤进行了免疫球蛋白重链IgH基因重排，8例阳性；7例良性淋巴组织增生性疾病均为阴性。结论肺MALT淋巴瘤在细胞组成和排列上与其他部位结外MALT淋巴瘤相同，肿瘤细胞呈串珠状直接侵犯肺泡间隔和沿支气管血管束向周边及肺膜扩散。在肺内淋巴上皮样病变常见于MALT淋巴瘤，并有助于诊断，但并非其特异性病变，一些肺的反应性淋巴组织增生也可出现，用免疫组织化学有助于区别两种病变。免疫球蛋白重链IgH基因重排可以帮助鉴别肺MALT淋巴瘤和良性淋巴组织增生性疾病。