LncRNANNT-AS1通过调控miR-582-5p/NCKAP1轴激活Hippo-YAP/TAZ信号通路促进膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞干性影响

目的检测膀胱癌中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase antisense RNA 1,NNT-AS1)表达情况,研究其对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响及可能分子机制。方法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测膀胱癌组织标本及细胞中LncRNA NNT-AS1表达情况;将膀胱癌细胞转染分为sh-NC组,sh-NNT-AS1组,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组和sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组。采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度值(A值);Transwell实验检测细胞迁移、侵袭穿膜数;细胞成球实验检测干细胞干性。检索starBase和TargetScan数据库,并通过双荧光素酶报告基因实验预测验证LncRNA NNT-AS1和miR-582-5p,miR-582-5p与NCKAP1的靶向结合关系。Western blot检测膀胱癌干细胞标志蛋白(CD44,ALDH1A1,Oct4,Nanog)及Hippo-YAP/TAZ信号通路相关蛋白表达灰度值。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LncRNA NNT-AS1表达水平(0.34±0.07 vs 1.15±0.21)明显升高,差异有统计学意义(t=16.364,P<0.001)。与人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞(1.00±0.01)相比,膀胱癌细胞T24,5637,UM-UC-3和TCC-SUP中LncRNA NNT-AS1表达(6.03±0.17,4.66±0.36,5.47±0.26,3.02±0.20)明显升高,差异有统计学意义(t=17.472~51.160,均P<0.001)。与sh-NC组相比,在24,48和72 h时sh-NNT-AS1组细胞增值能力(A值)均显著降低(0.80±0.01 vs 1.07±0.06,1.18±0..07 vs 1.83±0.03,1.89±0.07 vs 2.53±0.06),差异有统计学意义(t=7.688,14.783,12.024,均P<0.05);sh-NNT-AS1组细胞迁移穿膜数(55.00±2.65个vs 354.30±7.84个)、细胞侵袭穿膜数(45.67±2.33个vs 303.00±9.07个)及膀胱癌干细胞成球数(20.85±2.17个vs 41.35±3.67个)显著降低,差异具有统计学意义(t=-62.641,-47.596,8.328,均P<0.001)。与sh-NC组相比,sh-NNT-AS1组细胞中CD44(0.04±0.01 vs 1.12±0.02),ALDH1A1(0.23±0.01 vs 1.16±0.05),Oct4(0.17±0.02 vs 1.10±0.04),Nanog(0.49±0.03 vs 1.24±0.03)的蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=83.656,31.591,36.019,30.619,均P<0.001)。与si-NC组相比,sh-NNT-AS1组CD44+CD133+细胞比例(9.30%±0.79%vs 88.50%±2.77%)明显降低,差异有统计学意义(t=-47.624,P<0.001)。双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-582-5p为LncRNANNT-AS1靶基因,NCKAP1为miR-582-5p靶基因;LncRNA NNT-AS1靶向调控miR-582-5p/NCKAP1轴。与sh-NNT-AS1组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞增值能力(A值)均明显升高(0.98±0.03 vs 0.73±0.06,1.74±0.04 vs 1.22±0.05,2.33±0.16 vs 1.69±0.14),差异有统计学意义(t=5.977~11.628,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞增值能力(A值)显著降低(0.69±0.04,1.01±0.07,1.39±0.08),差异有统计学意义(t=7.877~16.323,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞迁移穿膜数(322.31±28.45个vs 81.42±13.22个)、细胞侵袭穿膜数(316.07±30.21个vs 92.13±12.65个)及膀胱癌干细胞成球数(38.55±2.20个vs 18.98±1.16个)显著增加,差异具有统计学意义(t=15.115,13.158,14.592,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞CD44(1.05±0.08 vs 0.10±0.01),ALDH1A1(1.20±0.16 vs 0.22±0.02),Oct4(1.32±0.14 vs 0.19±0.03),Nanog(0.97±0.12 vs 0.15±0.04),YAP(1.29±0.11 vs 0.42±0.07)和TAZ(1.41±0.16 vs 0.35±0.05)蛋白表达灰度值均显著增加,差异具有统计学意义(t=10.650~21.243,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞迁移穿膜数(65.33±12.60个)、细胞侵袭穿膜数(71.08±15.19个)、膀胱癌干细胞成球数(11.36±1.05个)均显著降低,差异具有统计学意义(t=16.125,14.395,21.365,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞CD44(0.25±0.05),ALDH1A1(0.61±0.11),Oct4(0.22±0.08),Nanog(0.44±0.07),YAP(0.25±0.09)和TAZ(0.30±0.04)蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=6.412~17.889,均P<0.001)。结论膀胱癌中LncRNA NNT-AS1表达上调,其对膀胱癌细胞增殖、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响,可能是通过调控miR-582-5p/NCKAP1分子轴,激活Hippo-YAP/TAZ信号通路完成。

经尿道前列腺电切联合钬激光一期治疗前列腺增生伴膀胱结石的临床分析

目的探讨经尿道前列腺电切(transurethral resection of the prostate,TURP)联合钬激光一期治疗良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)伴膀胱结石的疗效。方法 108例患者先行钬激光治疗膀胱结石,然后行TURP治疗BPH。结果 108例患者碎石时间10～65 min,平均31 min;TURP时间35～115 min,平均54 min。1例患者术后出现出血而行二次镜下止血,其余患者术后未出现明显出血;108例患者术中术后均未出现电切综合征、膀胱穿孔、结石残留、尿道狭窄等并发症。术后5～7 d拔除导尿管后排尿通畅。7例出现暂时性尿失禁,经康复治疗后痊愈。术后3个月复查,无膀胱结石复发,国际前列腺症状评分(international prostate symptom score,IPSS)由(21.6±4.7)分下降至(6.9±1.1)分(P<0.01),生活质量评分(quality of life,QOL)由(5.4±0.9)分下降至(2.2±0.6)分(P<0.01),最大尿流率(maximum flow rate,Qmax)由(6.9±1.4)mL/s升至(16.8±2.3)mL/s(P<0.01)。结论 TURP联合钬激光一期治疗BPH伴膀胱结石,安全有效、创伤小、恢复快、并发症少、住院时间短、费用降低,逐渐为众多的老年男性患者所接受。

索利那新联合肾镜下EMS五代超声碎石清石术在膀胱结石腔内碎石治疗中的价值分析

目的探讨索利那新联合肾镜下电子医疗系统(EMS)五代超声碎石术在膀胱结石治疗中的应用价值。方法回顾性研究,根据治疗方法将2015年5月至2017年3月河北省定州市人民医院就诊的130例膀胱结石患者分为两组,以单纯接受肾镜下EMS五代超声碎石术治疗者为对照组,以接受索利那新联合肾镜下EMS五代超声碎石术治疗者为联合组,每组各65例。比较两组患者手术治疗情况、术后膀胱功能恢复情况、膀胱功能改善情况和手术前后炎性因子变化情况。结果联合组患者手术时间(31. 56±11. 18) min、住院时间(8. 98±1. 15) d、术后24 h内膀胱痉挛次数(1. 19±0. 23)次/h及膀胱痉挛持续时间(0. 12±0. 08) s均低于对照组(36. 02±10. 21 min、10. 12±1. 12 d、2. 73±0. 16次/h、0. 31±0. 11 s),差异具有统计学意义(P <0. 05)。同时,入组时,两组患者间自我评价量表(OABSS)、国际前列腺症状评分(IPSS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),而术后3 d后,联合组OABSS评分(5. 53±1. 02分)、IPSS评分(3. 01±0. 85分)、TNF-α(15. 53±9. 05 nmol/L)、CRP(13. 19±8. 35μg/L)及IL-6(11. 81±9. 32 pg/ml)水平均低于对照组(7. 61±1. 38分、3. 93±0. 69分、22. 62±10. 22 nmol/L、20. 21±9. 12μg/L、15. 58±8. 19 pg/m),差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论索利那新联合肾镜下EMS五代超声碎石术可有效改善膀胱结石的治疗效果及术后恢复情况。

良性前列腺增生伴膀胱结石Ⅰ期腔内治疗的临床分析

目的探讨Ⅰ期腔内治疗良性前列腺增生(BPH)伴膀胱结石的疗效。方法 62例BPH伴膀胱结石患者先应用钬激光行膀胱结石碎石,然后行经尿道前列腺电切术(TURP)。结果 62例患者均成功Ⅰ期行钬激光碎石术和TURP,碎石时间15～75 min,平均42 min;TURP时间45～105 min,平均67 min。术后无大出血、电切综合征、膀胱穿孔、结石残留、严重感染、尿道狭窄等并发症发生。术后7 d拔除导尿管后排尿困难明显改善。3例出现暂时性尿失禁,经口服托特罗定和提肛锻炼等治疗后痊愈。术后3个月复查,国际前列腺症状评分(IPSS)和生活质量评分(QOL)均明显下降(P均<0.01),最大尿流率(Qmax)显著升高(P<0.01)。结论 TURP联合钬激光Ⅰ期腔内治疗BPH伴膀胱结石是安全有效的方法。

双镜联合对输尿管结石术后输尿管狭窄的治疗效果

探讨双镜联合对输尿管结石术后输尿管狭窄的治疗效果。方法:选择输尿管结石术后输尿管狭窄患者67例,腹腔镜单镜治疗34例患者作对照组;腹腔镜+输尿管镜双镜联合治疗33例患者作观察组,比较两组治疗效果和观察指标。结果:对照组有效率88.24%低于观察组100.00%,有差异(P<0.05)。对照组下床活动时间、首次排气时间和住院时间高于观察组,有差异(P<0.05)。结论:双镜联合对输尿管结石术后输尿管狭窄是安全可行的,促进早期恢复。

不同术式治疗膀胱结石的临床疗效及术后发热的影响因素分析

目的对三种不同的手术方式治疗膀胱结石的临床效果及手术过程中所有可能引发术后发热的因素进行分析,以期为临床医师具体手术方式的选择及膀胱结石术后发热的预防提供参考。方法对2014年1月至2017年1月收治的膀胱结石120例患者的临床资料进行回顾性分析。以采用电切镜联合输尿管镜下气压弹道碎石术治疗者为I组、肾镜下气压弹道碎石术治疗者为Ⅱ组,肾镜下EMS五代超声碎石清石系统手术治疗者为Ⅲ组,每组各40例。记录每例手术碎石时间、术中出血量、手术并发症和住院时间、术后发热情况等并进行统计分析。结果在碎石时间、术中出血量、住院时间三个方面,Ⅲ组优于Ⅰ组和Ⅱ组(P均<0.05);但Ⅱ组与Ⅰ比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。Ⅲ组术后感染、血尿、尿潴留及发热等并发症发生率略低于Ⅰ组和Ⅱ组,但三组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。将三组120例患者按有无术后发热分为有术后发热组21例,无术后发热组99例;对术后发热的影响因素进行分析,结果显示,有术后发热组术中出血量显著高于无术后发热组[(22.5±3.2)ml vs(18.4±3.1)ml,P<0.05];碎石时间和术后感染、血尿、尿潴留发生率在术后有无发热者中的差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论肾镜下EMS五代超声碎石清石系统手术的疗效更好,碎石时间短,术中出血量少且住院时间短。初步分析发现术后发热与术中出血量可能有相关性。