流式细胞仪检测人白细胞抗原-B_(27)的影响因素

目的获得外周血淋巴细胞人白细胞抗原(HLA)-B27检测准确可靠的结果。方法用双抗体双色免疫荧光标记,流式细胞仪分析,对标本放置不同时间、溶血后洗涤前后的结果进行比较。结果标本放置不同时间可影响检测结果,洗涤可显著增加HLA-B27阳性细胞百分比和细胞表面平均荧光强度。结论制备好的标本应在6 h内检测,溶血后标本宜洗涤后测定,以提高检测的准确性。

1型糖尿病模型大鼠股骨骨代谢紊乱及唑来膦酸的影响

背景:糖尿病引起的骨质疏松作为常见的继发性骨质疏松,近年来越来越受到重视;唑来膦酸作为新型治疗骨质疏松的药物,其对体内成骨细胞的作用尚未完全清楚。目的:观察1型糖尿病大鼠股骨干骺端骨形态发生蛋白2与Noggin的表达变化,以及唑来膦酸的干预作用。方法:随机取130只Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立1型糖尿病模型,3 d后连续3次血糖>16.7 mmol/L鼠为造模成功鼠,共120只,随机等分为模型组、预防组和治疗组。后2组大鼠分别在造模后当天和2周后一次性静脉给予唑来膦酸(0.1 mg/kg)。另取40只大鼠注射柠檬酸缓冲液作为对照组。结果与结论:与对照组相比,模型组大鼠股骨骨密度、血清碱性磷酸酶水平、股骨骨形态发生蛋白2 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),Noggin mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,预防组和治疗组大鼠骨密度和骨形态发生蛋白2 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Noggin mRNA表达水平显著降低(P<0.05),血清骨碱性磷酸酶水平也逐渐恢复。提示1型糖尿病大鼠骨代谢紊乱在病程早期即出现,而应用唑来膦酸可以促进骨形成,增加骨密度,改善骨代谢。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表达水平初探

目的建立检测人增殖诱导配体(APRIL)mRNA的实时荧光定量PCR方法,探讨外周血单个核细胞APRILmRNA表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法采用实时荧光定量PCR法检测30例正常人和40例PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)APRIL基因的相对表达量,以Ct值比较法计算APRIL基因相对表达水平。结果PBC患者外周血单个核细胞APRILmRNA的△Ct值为9.3±2.0,与正常对照组比较,差异显著(P<0.05)。采用2-△△Ct法进行数据分析后,PBC组APRILmRNA相对表达量比正常对照组高3.5倍。PBC患者中抗核抗体(ANA)阳性占80%,其中荧光模式为核膜型19例,其他型13例(着丝点型10例,混合型3例),其APRIL基因相对表达量比正常对照组高6.5和1.7倍。结论PBC患者外周血单个核细胞APRILmRNA表达水平显著升高,且与ANA荧光模式相关。

自身免疫性肝病患者外周血细胞亚群表型分析

目的 分析自身免疫性肝病患者外周血细胞亚群表型变化情况。方法 用流式细胞仪检测 35例原发性胆汁性肝硬化(primarybiliarycirrhosis,PBC)、19例自身免疫性肝炎 (autoimmunehepatitis,AIH)、2 1例乙型肝炎患者以及 30例正常人外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)中的NK、CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD2 8+ 、CD8+ /CD2 8+ 、Fas、FasL的水平并加以分析比较。结果 PBC组患者的CD4 + 亚群较正常组升高 ,而CD8+ /CD2 8+ 细胞亚群较正常组、乙肝组和AIH组减低。AIH组患者的CD4 + 和CD8+ /CD2 8+ 细胞均较正常组升高。PBC组和AIH组患者的Fas和FasL的表达均高于正常组。结论 自身免疫性肝病患者存在T细胞亚群异常 ,细胞凋亡活跃 ,提示T细胞介导的免疫紊乱在自身免疫性肝病的免疫损伤机制中起重要作用。

人B细胞活化因子基因启动子活性研究

为探索与自身免疫病发病密切相关的B细胞活化因子(BAFF)基因高水平转录的启动序列及IFN-γ等炎性细胞因子对其活性的影响,以人BAFF基因转录起始点上游-1 349 bp至-329 bp的片段为靶序列,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成5个重组体,脂质体转染法转染上述重组体至人骨髓白血病细胞株:HL-60,CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性;同时加入细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、重组人BAFF蛋白(rBAFF),以测定其对BAFF启动序列的影响。结果表明,-1 349^-329 bp、-1 349^-743 bp序列具有强启动调控活性,而-1 349^-1 099 bp片段启动活性最低。细胞因子IFN-γ、IL-10和rBAFF均能在一定程度上调人BAFF基因的启动活性,IL-4则一定程度地抑制BAFF基因的启动活性。研究提示,人BAFF基因-1349^-743 bp片段是进一步研究BAFF基因转录相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列。细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、rBAFF可以一定程度的在转录水平影响BAFF合成和分泌。

IDDM患者T细胞受体介导的信号通路受损

目的 :进一步研究IDDM患者T细胞应答改变的机制。方法 :用抗TCR抗体激活患者外周血T细胞 ,分析TCR介导的信号通路的水平。结果 :与正常对照组相比较 ,抗TCR抗体诱导的增殖性应答较弱 (P <0 .0 5) ;rIL 2能部分恢复对抗TCR抗体应答的缺乏 ;抗CD2 8抗体刺激不能恢复TCR介导的增殖性应答 (P =0 .0 3 )。结论 :IDDM患者的T细胞对抗TCR抗体应答的缺乏与TCR介导的信号通路受损有关 ,但协同刺激信号通路正常。

生姜液对血小板保护作用的临床研究及途径

目的探讨生姜液对保护血小板而使血小板聚集率降低的作用及途径。方法应用比浊法,在生姜液的作用下,测定由二磷酸腺苷(ADP)、瑞斯特霉素(RIST)诱导血小板聚集率的变化。结果在生姜液的保护作用下,对照组和患病组(服用华法林者)的血小板聚集率明显降低,对照组下降9.63%±5.83%(P<0.01),患病组下降15.84%±9.06%(P<0.01)。同时,患病组的血小板聚集率下降明显,与对照组的下降率比较差异具有统计学意义(P<0.001)。生姜液的浓度、保存时间是影响保护血小板作用大小的因素。生姜液的浓度越高、保存时间越短,其对血小板的保护作用越强。结论生姜液具有明显保护血小板、降低血小板聚集的作用。服用华法林的患病组血小板聚集率下降更加明显。

浅谈军队医院实行成本核算的问题及对策

实行全成本核算管理,贯彻落实新的会计核算管理制度,促进了军队医院优质、高效、低耗运行,提高了市场经济条件下竞争能力。但同时实施全成本核算是一项极其复杂的过程,还有一些问题需要进行研究解决。

电泳法检测肝和血清中醇脱氢酶同工酶

目的:建立琼脂糖凝胶电泳法检测人血清醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase isoenzymes ADH EC 1.1.1.1)同工酶。方法:采用自制琼脂糖凝胶板,摸索实验条件,在pH8.6,74mmol/L巴比妥电泳缓冲系统中进行20mA、20min电泳,可清晰地分离出ADH同工酶三条区带。结果:检测了67例患者血清ADH总活性0.013-0.021Kat/L,同工酶ADHⅠ占ADH总活性0.0l-0.30,ADHⅡ占ADH总活性0.12-0.31,ADHⅢ占ADH总活性0.39-0.80。检测了10例人健康肝组织匀浆的ADH总活性为0.136-0.196Kat/L,同工酶ADHⅠ占总活性的0.07-0.25,同工酶ADHⅡ占总活性的0.19-0.27和同工酶ADHⅢ占总活性0.56-0.73。结论:正常人血清中ADH酶活性很低,为0-1.8×10^(-3)Kat/L,其同工酶不易被检测出。而肝脏组织中含有大量ADH酶活性,当肝脏受到严重损伤时,ADH即从肝细胞内逸出,进入血液,使血清中ADH酶活性明显升高,同时通过琼脂糖电泳对其同工酶的检测可测出三条区带,帮助临床进一步了解肝细胞损伤程度,对患者预后和病程的监测具有一定的临床意义。

c-FLIPmRNA在大肠癌细胞中的表达及其与Fas抗原表达的相关性

目的 :探讨 c FL IP(细胞型 Fas相关死亡区域蛋白样白介素 - 1β转换酶抑制蛋白 ) m RNA在大肠癌细胞中的表达及其与 Fas抗原 (CD95 )表达的相关性。方法 :应用 RT- PCR方法检测 3株人大肠癌细胞株中 c- FL IP m RNA的表达 ,采用间接免疫荧光标记流式细胞术检测大肠癌细胞 Fas抗原表达。结果 :SW1116及 SW6 2 0细胞株 c- FL IP m RNA表达阳性并相对高水平表达 Fas抗原 ,而 L o Vo细胞株 c- FL IP m RNA表达阴性并低水平表达 Fas抗原。结论 :在大肠癌细胞中 ,c- FL IP m RNA的表达趋势与 Fas抗原一致 ,提示 c- FL IP可能在抑制 Fas抗原诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。

如何做好抗震救灾财务保障

抗震救灾通常具有时间紧、任务重、保障条件复杂等特点,比平时财务保障工作难度更大。如何在抗震救灾中做好财务保障工作成为军队新时期财务工作的重要内容。

CT引导三叉神经半月节高电压与标准电压脉冲射频对眼支带状疱疹后神经痛的临床疗效

目的:比较CT引导三叉神经半月节高电压与标准电压脉冲射频对眼支受累带状疱疹后神经痛(postherpetic neuralgia, PHN)的临床疗效。方法:选取眼支PHN病人60例,按随机数字表法平均分为高电压组(H组)和标准电压组(B组);记录两组病人治疗前、治疗后3天、1周、4周、8周、12周视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)评分;补救治疗次数≥2次例数;8周、12周时疗效评定及不良反应发生情况。结果:两组治疗后各时间点VAS评分均较术前降低。治疗后3天、1周、4周时VAS评分无显著性差异,8周、12周VAS评分明显降低。H组补救治疗例数较B组减少;H组治疗后8周、12周疗效评定优于B组。结论:CT引导下三叉神经半月节高电压脉冲射频对眼支PHN安全有效,可应用于临床。

《运动解剖学》翻转课堂的教学设计与实践

本研究在《运动解剖学》教学中,对翻转课堂教学模式与传统教学模式进行实验对比研究,分析在不同教学模式下教学效果的差异,为进一步拓展翻转课堂在《运动解剖学》教学中的应用提供理论依据和实践参考。本研究将聊城大学体育学院大一4个班的学生分为实验组和对照组,实验组采用8周翻转课堂教学模式,对照组采用8周传统教学模式。

关于农田水利工程施工中渗水原因及防渗技术

农田水利工程一直是我国最为重要的基础工程,它具有施工难度高、施工周期长等特点,而正是因为这些特点使得农田水利工程在施工的过程中很容易产生质量方面的问题,例如工程出现渗水等。如果能够将防渗技术进行良好的运用,不仅可以提升水利工程的安全性,还能够将其使用寿命大大增长。下文将对农田水利工程施工的渗水原因及防渗技术进行分析。

1型糖尿病大鼠Runx2、Osterix表达变化及唑来膦酸的干预作用

目的观察1型糖尿病大鼠血清胰岛素和骨钙素水平,骨组织Runx2和Osterix(OSX)基因转录水平及唑来膦酸的干预作用。方法 Wistar雌性大鼠170只,随机分为正常对照组(n=40)和糖尿病模型组(n=130)。糖尿病模型组一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制作1型糖尿病模型,随机选取120只分为模型组、预防组和治疗组,每组40只。预防组和治疗组分别在造模成功和造模成功2周后静脉给予唑来膦酸(0.1 mg/kg)。ELISA法检测血清胰岛素和骨钙素水平;RT-PCR法检测右侧股骨Runx2和OSX mRNA表达水平。结果模型组、预防组和治疗组与正常对照组相比,血清胰岛素水平显著下降(P<0.05)。骨钙素水平模型组显著低于正常对照组(P<0.05),预防组高于正常对照组和模型组(P<0.05),治疗组在12周高于预防组(P<0.05)。模型组骨组织Runx2和OSX mRNA表达水平与正常对照组相比显著降低(P<0.05),预防组和治疗组表达均明显高于正常对照组和模型组(P<0.05),预防组表达上调程度高于治疗组。结论在1型糖尿病大鼠模型中,骨组织Runx2和OSX mRNA表达水平显著下降;预防性应用唑来膦酸可逆转Runx2和OSX mRNA表达的下降,促进骨形成。

白介素17F促进大鼠成骨细胞增殖、矿化和Runx2、Osterix的表达

目的探讨白介素17F对大鼠成骨细胞增殖、矿化和Runx2、Osterix表达水平的影响。方法分离提取新生24 h内w istar大鼠颅盖骨原代成骨细胞,用含10%胎牛血清的低糖DM EM培养基培养,培养基每3天更换1次。当细胞相互融合生长面积达80%左右时,进行细胞传代。向培养基中加入白介素17F,根据浓度将第4代成骨细胞分为0 ng/m L组(对照组)、1 ng/m L组、10 ng/m L组、20 ng/m L组、50 ng/m L组、100 ng/m L组。分组后继续培养3 d,采用CCK-8试剂盒检测各组成骨细胞增殖率,采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法分别检测成骨细胞中Runx2、Osterix的m RNA转录水平和蛋白表达水平。在分组培养第10天,对照组和100 ng/m L组进行矿化结节染色。结果 20 ng/m L组、50 ng/m L组和100 ng/m L组成骨细胞增殖率较对照组增高(P<0.05),呈浓度依赖性。50 ng/m L组和100 ng/m L组成骨细胞中Runx2、Osterix的m RNA转录水平和蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。100 ng/m L组成骨细胞矿化结节的染色阳性区域多于对照组。结论白介素17F可促进体外培养的大鼠成骨细胞的成骨作用。