单宁酸对猪流行性腹泻病毒增殖的体外抑制作用

【目的】探究单宁酸(tannic acid)对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的影响,为临床治疗PEDV感染提供新的参考依据。【方法】通过检测不同浓度单宁酸对细胞活性的影响,评估单宁酸对Vero和LLC-PK1细胞的毒性;通过实时荧光定量PCR和间接免疫荧光试验检测单宁酸对PEDV YN13毒株复制的影响;将PEDV YN13毒株更换为PEDV DR13-GFP毒株、Vero细胞系换成LLC-PK1细胞系分别进行试验,检测单宁酸对PEDV复制的影响;在病毒感染的不同时间点添加单宁酸,通过实时荧光定量PCR、Western blotting和半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infection dose,TCID 50)法检测单宁酸对PEDV复制的影响;通过荧光共振能量转移试验检测单宁酸在细胞外对PEDV 3C样蛋白酶活性的影响。【结果】低浓度的单宁酸对细胞几乎无毒性;单宁酸能够有效抑制PEDV YN13毒株的复制,且单宁酸的浓度越高抑制效果越好;在更换毒株和细胞系后,各浓度单宁酸对PEDV的复制过程仍有较好的抑制作用;单宁酸可以通过抑制PEDV吸附或入侵过程及病毒的早期复制发挥抗病毒活性;单宁酸对PEDV 3C样蛋白酶活性具有抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性。【结论】单宁酸可以在体外通过影响病毒吸附或入侵过程抑制PEDV的感染,也可能通过抑制病毒的3C样蛋白酶的活性抑制病毒的复制过程。

槲皮素对PEDV感染幼龄仔猪的生长性能、血液生化指标和肠道吸收与屏障功能的影响

【目的】试验旨在探讨槲皮素在防治仔猪感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)中的作用。【方法】选取18头体重相近、健康的7日龄仔猪(杜×长×大),随机分为3组(对照组、PEDV组和PEDV+槲皮素组),每组6个重复,每个重复1头猪,试验期共11 d。经过3 d适应期后,于试验第4~10天给PEDV+槲皮素组仔猪口腔灌服10 mg/kg BW的槲皮素,其他组仔猪口腔灌服等体积的人工乳,于试验第8天给PEDV组与PEDV+槲皮素组仔猪口腔灌服1×10^(4.5)TCID_(50)的PEDV,对照组灌服等体积的PBS溶液。试验第11天早上空腹称重,全部仔猪灌服D-木糖(0.1 g/kg BW),1 h后经前腔静脉采血,检测血液生化指标、血浆二胺氧化酶(DAO)活性和D-木糖含量;将所有仔猪屠宰取空肠黏膜,检测肠道屏障相关基因,包括肠绒毛蛋白(villin),紧密连接蛋白-1(claudin-1),闭合蛋白(occludin)和肠型脂肪酸结合蛋白(iFABP)的相对表达量。【结果】与对照组相比,PEDV组仔猪平均日增重显著下降(P<0.05),粪便评分显著升高(P<0.05);血液中高密度脂蛋白含量显著降低(P<0.05),肌酐和尿素氮的含量显著提高(P<0.05);血浆中D-木糖含量显著降低(P<0.05);空肠claudin-1、iFABP基因的相对表达量显著下调(P<0.05)。与PEDV组相比,PEDV+槲皮素组仔猪平均日增重和血浆D-木糖含量显著升高(P<0.05);血液中肌酐和尿素氮的含量显著降低(P<0.05);空肠claudin-1、villin和iFABP基因的相对表达量显著上调(P<0.05)。【结论】10 mg/kg BW槲皮素可在一定程度上缓解PEDV感染导致的仔猪生长抑制和肾功能损伤,增强肠道吸收与屏障功能。

能干的姥姥

在我们家里姥姥年岁最大，可姥姥却是最能干的人。姥姥今年63岁了，已经退休好多年了，可是她从来不闲着，一天到晚都在忙碌着。

猪流行性腹泻病毒感染猪肾细胞的代谢组学研究

为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的致病机制,本研究以PEDV YN13毒株感染猪肾细胞(LLC-PK1),采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术检测了PEDV YN13毒株感染LLC-PK124 h时细胞内代谢物的变化。结果显示,在PEDV感染的细胞中共鉴定到了101种差异表达代谢物,其中9种上调,92种下调。KEGG通路分析发现,差异代谢物主要涉及氨基酸代谢、碳水化合物代谢、信号转导、膜转运等生物进程。代谢物分类分析发现PEDV感染主要重塑了宿主的氨基酸代谢,提示相关氨基酸代谢在PEDV感染过程中发挥重要作用。