PCR-DGGE法结合传统技术研究4℃冷链贮运条件下三文鱼菌相变化

为研究三文鱼在冷链贮运4℃条件下的细菌腐败机制,运用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术、传统鉴定技术以及PCR技术分析了4℃冷链贮运条件下的三文鱼中腐败菌菌相变化规律,并通过产量因子测得各优势菌株致腐能力,从而确定特定腐败菌。DGGE指纹图谱显示,贮藏期间微生物多样性降低,假单胞菌属和希瓦氏菌属条带亮度却逐渐提高。这表明这两个属的微生物在三文鱼冷藏期间逐渐成为优势菌。通过分离和鉴定贮藏末期腐败三文鱼的优势腐败菌,本实验得到5株优势腐败菌,分别为麦芽糖肉食杆菌(Carnobacterium maltaromaticum LMA28)、丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.syringae B728a)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens SBW25)、肉食杆菌(Carnobacterium sp.WN1359)和波罗的海希瓦氏菌(Shewanella baltica OS678)。将这5株纯培养的腐败菌分别接种到无菌三文鱼中并冷藏一定时间后,各腐败菌的挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)产量因子分别为1.26×10^(-7)、1.25×10^(-7)、1.36×10^(-7)、1.08×10^(-7)mg TVB-N/CFU和1.03×10^(-7)mg TVB-N/CFU。这5株腐败菌对三文鱼致腐败能力的顺序依次为荧光假单胞菌SBW25>麦芽糖肉食杆菌LMA28>丁香假单胞菌B728a>肉食杆菌WN1359>波罗的海希瓦氏菌OS678。

外加磁场对SPIO-shRNA分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞的影响

目的探讨外加磁场对SPIO-shRNA分子探针转染人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法设定质量浓度为45 mg/L的SPIO-shRNA分子探针转染人卵巢癌SKOV3细胞,并将SKOV3细胞分为3组:未转染的细胞组(空白对照组),SPIO-shRNA分子探针转染的细胞组(阴性对照组),培养皿底部外加磁场的SPIO-shRNA分子探针转染的细胞组(实验组)。采用流式细胞术检测细胞转染率,CCK-8法检测细胞增殖及活性,Western blot法检测细胞表皮生长因子受体(EGFR)蛋白水平,荧光定量PCR检测EGFR mRNA水平,磁共振(MR)扫描检测细胞内信号强度变化。结果与阴性对照组比较,实验组的细胞转染率[(79.20±3.31)%]显著增加(P=0.001);实验组的细胞活性(P=0.011)、EGFR蛋白及mRNA表达量均明显降低(P均<0.05);实验组的MR图像信号强度明显降低(P=0.0004)。结论外加磁场可以诱导SPIO-shRNA分子探针进入卵巢癌SKOV3细胞,从而提高细胞的转染率。

从转染细胞活性Meta分析SPIO用于分子影像学研究的最佳浓度区间

目的:通过检测转染细胞的活性,Meta分析超顺磁性氧化铁纳米(superparamagnetic iron oxide,SPIO)在分子影像学实验中用于转染细胞的最佳浓度区间。方法:系统检索国外(Pub Med、Embase、Cochrane Library)及国内主要数据库(万方、维普、中国知网及中国生物医学数据库)建库至2016年3月间关于SPIO转染细胞的最佳浓度区间的相关文献,结合Cochrane协作网的推荐,制定纳入研究文献的标准,对纳入文献进行质量评估并提取研究数据。采用STATA 12.0进行统计学分析:偏倚性检验(Begg’s检验)、异质性检验(I2、P值、Q值检验法),在异质性较大时行亚组分析,讨论各组异质性(I2、P值、Q值检验法),计算各组死细胞比率均差值在各浓度上的合并效应量及95%可信区间,并画出SPIO浓度对细胞活性影响的剂量反应曲线,获取最佳浓度区间。结果:共14篇国内外研究论著符合纳入标准,文献异质性检验I2=60.61%;P=2.675×10-9;Q=139.62,提示数据组间存在显著的异质性,故进一步行亚组分析,按SPIO修饰或标记材料不同分为4组[A组:SPIO-聚乙烯酰胺(PEI)组;B组:SPIO-多聚赖氨酸(PLL)组;C组:SPIO-葡聚糖组;D组:SPIO-探针组],各组数据无明显异质性;拟合各组各浓度节点死细胞比率均差值及95%可信区间,画出剂量反应曲线(三次样条插值拟合曲线),分别得到A至D组较适宜的浓度区间值:4~6、10~50、10~50、5~25μg/m L。Deeks漏斗图呈较对称漏斗形,P=0.23>0.1,表明数据无明显发表偏倚。结论:在分子影像学研究中,当SPIO由聚乙烯酰胺(PEI)、葡聚糖、葡聚糖-多聚赖氨酸(PLL)包裹或制备为探针时,以SPIO对细胞的毒性影响为主要衡量指标,标记细胞的适宜浓度区间分别为:4~6、10~50、10~50、5~25μg/m L。

卵巢甲状腺肿的CT及MRI影像学特点分析

目的:分析卵巢甲状腺肿的CT与MRI特点。方法:对经手术病理证实的8例卵巢甲状腺肿患者影像学特点进行回顾性分析。结果:8例卵巢甲状腺肿中,发生在左侧附件2例,右侧附件6例。其中5例行全腹部CT平扫及增强检查,均表现为囊实性肿块,2例可见钙化;增强扫描囊壁、分隔及实性部分明显强化,囊性部分无强化;行全腹部MRI平扫及增强扫描3例,均为囊实性肿块,实性部分在T1WI、T2WI均呈等信号,不同的囊腔信号不同,2例可见T2WI极低信号,在T1WI上呈等高信号。增强扫描囊壁、分隔及实质部分强化明显,囊液未见明显强化。结论:CT上出现"高密度囊"和MRI出现T2WI极低信号,是卵巢甲状腺肿的特征性表现。

2012-2015年厦门市HIV感染者/AIDS病例传播途径分析

目的了解2012-2015年厦门市HIV感染者/AIDS病人传播途径及其变化,为制定防治策略提供依据。方法对厦门市2012-2015年艾滋病疫情数据进行统计,使用描述流行病学、卡方检验等方法对数据进行分析。结果 2012-2015年厦门市共报告艾滋837例;性传播成为主要传播途径,占98.3%,其中同性性传播占55.6%,﹤40岁年龄组人群以同性性传播为主,﹥40岁年龄组以异性性传播为主。结论厦门市HIV感染者/AIDS病例以性传播为主,其中同性性传播途径增长较快,应根据每个年龄段传播途径的不同及传播途径的变化特点制定有针对性的防控措施。

2013年厦门市男男性行为人群艾滋病哨点监测结果分析

目的了解2013年厦门市男男性行为(MSM)人群HIV感染状况、艾滋病防治知识知晓率、艾滋病相关行为情况。方法按照《全国艾滋病哨点监测实施方案》,对辖区男男性行为人群进行问卷调查,采静脉血进行HIV、丙肝、梅毒抗体检测。结果 2013年HIV、梅毒、丙肝感染率分别为:9.0%、4.7%、0.0%。艾滋病知识综合知晓率为92.1%。近6个月有发生过同性肛交性行为的人中使用安全套的比例为93.2%。近6个月有过商业同性性行为的人群中安全套使用率为100%。近6个月与异性发生性行为的比例为18.1%。结论根据监测所得出的艾滋病知识知晓的薄弱环节和不同情况下安全套使用率的不同,应对当地MSM人群进行有针对性的宣教与干预,进一步提高艾滋病干预服务的覆盖率,加强MSM人群健康意识,提高其安全套使用率和性病治疗率,从而减缓艾滋病在该人群的蔓延。

2010-2015年厦门市女性性传播疾病流行特征分析

目的了解2010-2015年厦门市女性性病疫情流行趋势和流行特征,为制定相应防控策略提供科学参考。方法运用描述性流行病学方法对厦门市2010-2015年报告的女性性病病例进行分析。结果 2010-2015年,厦门市共报告11 454例女性性病病例,年均发病率为114.07/10万;发病率由141.08/10万逐年下降到104.26/10万（P〈0.01）;病种构成以梅毒为主,占67.90%;各年龄组均有病例报告,主要集中在20~49岁年龄段,以20~组为发病高峰（38.44%）;职业以家政、家务和待业人群为主,占42.66%。结论加强对女性,特别是外来女青年的性健康教育是防控女性性病的重要措施。

原发性食管恶性黑色素瘤的CT表现及临床病理分析

目的:探讨原发性食管恶性黑色素瘤(primary malignant melanoma of the esophagus,PMME)的计算机断层扫描(computer tomography,CT)表现及临床病理特点。方法:回顾分析经手术病理证实的5例PMME患者CT表现和临床病理特征,并复习文献。结果:5例患者的PMME均位于食管中下段,CT显示病变呈不规则结节或肿块状突向管腔内,其上下径大于横径,病变区食管壁不均匀增厚,而病变对侧食管壁正常,肿块有中至重度不均匀或均匀强化。病理检查结果显示,5例均为蕈伞型,表面粗糙,3例呈暗褐色,4例表面可见糜烂;光镜下见瘤细胞形态多样,以梭形或圆形多见,细胞质丰富,核仁较大,核分裂象多见,4例见黑色素颗粒;免疫组织化学染色结果显示,肿瘤细胞S-100、HMB-45和Melan-A阳性表达。结论:PMME罕见,临床表现无特异性,CT表现虽有一些特征,但确诊需依靠病理检查。

改良式俯卧位与传统俯卧位护理在ARDS患者中的应用效果对比

目的探讨改良式俯卧位与传统俯卧位护理在ARDS患者中的应用效果对比。方法将本院重症医学科2018年1月—2020年10月收治的60例重症急性呼吸窘迫综合征患者作为研究对象,其中将2018年1月—2019年1月收治的30例患者作为对照组,实施传统俯卧位护理;将2019年2月—2020年10月收治的30例患者作为观察组,采用改良式俯卧位护理。对比两组患者护理前后氧合指标情况、不同时间段的血流动力学指标、不良事件发生情况、患者及其家属的护理满意度。结果两组俯卧位前和俯卧位后的二氧化碳分压(PaCO2)、血氧饱和度(SpO2)、动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)指标情况对比差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者俯卧位通气前的中心静脉压(CVP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)指标对比差异无统计学意义(P>0.05);俯卧位通气后1 h、2 h,两组患者的CVP、MAP、HR指标比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者不良事件发生率为6.67%,低于对照组的36.67%(P<0.05);观察组患者总护理满意度为96.67%,高于对照组的76.67%(P<0.05)。结论与传统式俯卧位护理相比,应用改良式俯卧位护理能不改变患者的氧合指数,能够稳定患者的血流动力学指标,减少不良事件的发生,提升患者护理满意度,值得在临床应用推广。

社会排斥视角下跨国婚姻家庭儿童基础教育缺失问题研究

文章运用社会排斥理论就云南省陇川县跨国婚姻家庭儿童的基础教育问题进行探究,对跨国婚姻家庭儿童的教育缺失原因进行分析;同时,运用SPSS统计出该群体教育状况的实际数据,具体分析了该群体遭到社会排斥的原因以及与之而来的基础教育问题,在此基础上提出了相关政策建议。帮助跨国婚姻家庭儿童更好地适应复杂的学习成长环境,从而对我国边境地区的和谐稳健发展起到了一定的借鉴意义。

SPIO-shRNA分子探针注射不同时间点荷瘤裸鼠肿瘤区域组织信号变化及MRI最佳扫描时间

目的:探讨注射SPIO-shRNA分子探针不同时间点的荷瘤裸鼠肿瘤区域组织信号强度变化情况,阐明分子探针活体磁共振成像(MRI)机制和最佳扫描时间。方法:探针注射剂量为18 mg·kg^(-1);将30只BALB/c荷瘤裸鼠随机分为6组,每组5只,分别于探针注射前和注射后12、24、27、30和36h等6个时间点行MRI检查,并测量裸鼠肿瘤组织及对侧肌肉组织在各时间点的信号强度变化;每次检查完成后立即处死裸鼠,取出肿瘤组织及肌肉组织行HE及普鲁士蓝染色,并在光学显微镜下观察裸鼠肿瘤组织的形态表现。结果:与注射前比较,探针注射后12、24和27h裸鼠肿瘤组织T1WI信号强度均升高(P<0.05),12、24、27、30和36h肿瘤组织T2WI和T2*GRE信号强度均降低(P<0.05或P<0.01);探针注射后27h肿瘤组织T1WI信号强度最高;探针注射后27h肿瘤组织T2WI和T2*GRE信号强度低于注射后12、24、30和36h(P<0.01)。与注射前比较,注射后24h时裸鼠对侧肌肉组织信号强度降低(P<0.05)。HE染色,裸鼠肿瘤组织结构紊乱,细胞核异型性较多;普鲁士蓝染色,在注射后各时间点上均存在蓝染的Fe颗粒,注射后27h时蓝染Fe颗粒最多。结论:SPIO-shRNA分子探针能成功靶向裸鼠肿瘤组织,且MRI最佳的扫描时间为探针注射后27h。

外加磁场对SPIO-shRNA分子探针用于活体荷瘤裸鼠卵巢癌肿瘤MR成像的影响

目的:探讨外加磁场对SPIO-sh RNA分子探针用于活体荷瘤裸鼠卵巢癌肿瘤MR成像的影响。方法:设定探针注射浓度为含铁18 mg/kg,扫描时间为探针注射后27 h;将30只BALB/c荷瘤裸鼠随机分为3组,即磁转染组(实验组),探针转染组(阴性对照组),荷瘤裸鼠组(空白对照组),每组样本量分别为10只荷瘤裸鼠,并在扫描前对磁转染组行外加磁场处理。采用磁共振MR扫描检测裸鼠体内肿瘤组织及邻近肌肉组织信号强度变化;每次检查完成后立即处死裸鼠,取出肿瘤组织及肌肉组织行HE、普鲁士蓝染色,并在光学显微镜下观察。结果:T1WI序列各组间肿瘤组织信号强度差异不具有统计学意义(F=2.623,P=0.091),各组间肌肉组织信号强度差异不具有统计学意义(F=0.434,P=0.652);T2WI及T2*序列磁转染组及探针转染组肿瘤组织信号强度较荷瘤裸鼠组减低,差异具有统计学意义(P=0.000),且磁转染组较探针转染组差异更显著,差异具有统计学意义(P=0.000);而T2*序列磁转染组肌肉组织信号强度较其余组信号减低,差异具有统计学意义(P=0.000);HE染色显示各组肿瘤组织结构紊乱,细胞核异型性增多;普鲁士蓝染色表明在磁转染组和探针转染组中均存在蓝染铁颗粒,且磁转染组蓝染颗粒更为丰富。结论:外加磁场能够诱导SPIO-sh RNA分子探针靶向作用于卵巢癌肿瘤组织并提高肿瘤组织摄取的有效浓度。

SPIO-shRNA分子探针用于荷瘤裸鼠MR检查的最佳扫描浓度探讨

目的:探讨SPIO-shRNA分子探针在活体荷瘤裸鼠肿瘤区域组织信号的变化情况,阐明分子探针用于荷瘤裸鼠的最佳扫描浓度。方法:将30只BALB/c荷瘤裸鼠随机分为5组,每组6只,在既定扫描时间(探针注射前及注射后27 h)分别以含铁量为6、12、18、24、30 mg·kg^(-1)尾静脉注射并同步行MR检查,测量肿瘤组织及对侧对应区域肌肉组织在各浓度组的信号强度变化。每次检查完成后立即处死裸鼠,取肿瘤组织及肌肉组织行HE及普鲁士蓝染色,并在光镜下观察。结果:6、12、18 mg·kg^(-1)组裸鼠探针注射后均存活,24、30 mg·kg^(-1)组探针注射后及扫描过程中出现部分裸鼠死亡;各浓度组间肿瘤组织体积差异无统计学意义(P>0.05);MR各扫描序列以T_2WI及T_2*序列的信号改变最明显;各浓度组比较,肿瘤组织信号强度在18、24、30 mg·kg^(-1)组较其余组差异明显(P<0.05),而18、24、30 mg·kg^(-1)组间差异无统计学意义(P>0.05);HE染色显示肿瘤组织结构紊乱,细胞核异型性较多;普鲁士蓝染色表明不同浓度组肿瘤组织中均存在蓝染的铁颗粒,其中18、24、30 mg·kg^(-1)组蓝染颗粒分布密集。结论:SPIO-shRNA分子探针能成功靶向于肿瘤组织,且最佳扫描浓度(含铁量)为18 mg·kg^(-1)。

“家访”记

刚刚担任班主任工作的时候，充满了幻想与设计。其中一项“伟大”的计划是：在“任期”内，访遍所有的学生家庭。开学伊始，当我宣布这一重大决定后，学生反应各不相同：有的雀跃，有的沮丧，有的惶恐……对此，我并未在意，还在心中暗自得意。

老师,请到我家“家访”吧

初当班主任的我,满脑子的幻想与设计。其中一项"宏伟"的计划是:在"任期"内,访遍全班学生的家。换策换出积极向上的孩子我的第一个家访对象是小宇,一个做事拖拉、习惯和成绩都不好的学生。当我宣布去他家的时候,他像"霜打的茄子"。放学后,小宇紧跟在我后面,一个劲地说:"老师,我以后一定表现好,您今天就别去我家,好吗?"我不高兴地说:"我决定了的事,不能改!"

让“空中课堂”软着陆

网络教学改变了我们的教学形式,让我们完成了从传统教学向网络教学形式的转换,助推了信息化时代教学模式的变革。我们要善于把从传统教学中摸索总结出来的小学英语教学理念与网络教学深度融合,充分利用丰富的云资源、强大的云平台来服务我们的课堂教学;用好云评价,让学生在虚拟空间也能汲取成长的营养和动力;要将网络教学的效果最大化,让"空中课堂"软着陆。

SPIO-shRNA双功能分子探针药动学及活体MR成像研究

本研究探讨SPIO-sh RNA双功能分子探针在活体内的药代动力学特征及磁共振(magnetic resonance,MR)成像无创评估其主要脏器分布。将18只新西兰大白兔随机分为3组,分别注射不同剂量的分子探针,于注射前30 min及注射后不同时间点采血,测量铁含量以分析探针药代动力学。24只昆明(KM)小鼠随机分为4组,以每只小鼠尾静脉注射200μL生理盐水为对照组,另3组分别注射不同剂量的分子探针,于注射后24 h行MRI扫描,扫描结束后立即取肝、脾、肾、脑及肌肉,制作切片行普鲁士蓝染色,观察探针在体内主要脏器组织的分布情况。结果显示,本探针的药代动力学符合二室模型,半衰期超过3 h;MRI显示探针在正常小鼠体内主要分布于肝脏与脾脏,肝脾MRI信号随着探针剂量的增加而降低(均P<0.05),组织切片普鲁士蓝染色证实了MRI检查结果,同时显示探针绝大部分能够逃避单核吞噬细胞系统的吞噬。本研究明确了SPIO-sh RNA分子探针在动物体内的药代动力学及主要脏器分布,为进一步的肿瘤活体成像时间及剂量的选择提供了重要参考价值。

2004—2013年厦门市淋病流行特征分析

目的了解厦门市淋病疫情流行趋势和流行特征,为制定相应的防治策略提供科学依据。方法对厦门市2004—2013年厦门市淋病疫情资料进行描述流行病学分析。结果 2004—2013年厦门市累计报告淋病病例11 527例,年均发病率为42.05/10万,发病率呈现下降趋势（χ^2趋势=468.37,P〈0.01）;淋病病例主要集中在厦门市湖里区和思明区;病例男女性别比为5.87∶1,男性发病率明显高于女性,男女发病率差异存在统计学意义（χ^2=70.44,P〈0.01）;发病病例年龄主要集中于20-39岁年龄组,共报告8 714例（75.60%）,各年龄组发病差异有统计学意义（χ^2=107.48,P〈0.01）;工人,其他职业、不详职业和商务人员的发病病例数居前4位,不同职业人群发病率差异有统计学意义（χ^2=1 091.24,P〈0.01）。结论厦门市淋病疫情总体上呈现下降趋势,今后需继续扩大性病筛查范围,加大监测力度等防控策略工作。

MR成像活体示踪SPIO-shRNA分子探针的生物分布

目的探讨磁共振成像(MR成像)能否示踪超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)-shRNA分子探针在活体动物主要脏器的生物分布。方法 6只新西兰大白兔,注射SPIO-shRNA分子探针(含铁量为9.6mg/kg),原子吸收光谱法(atomic absorption spectrometry,AAS)测量注射前30 min及注射后1 min、3min、5min、10min、15min、30min、1h、2h、3h、6h、12h、24h的血浆铁质量浓度以分析其药代动力学。6只昆明(KM)小鼠于尾静脉注射含铁量为4.8mg/kg的SPIO-shRNA分子探针,MR成像活体示踪探针在小鼠体内主要脏器的生物分布。96只KM小鼠于未给药及给药后1d、3d、5d、7d、9d、11d、14d,取肝、脾、肾、脑及肌肉组织,AAS测定各脏器组织探针铁含量,同时行普鲁士蓝染色并与MR结果对照分析。结果本探针的药代动力学符合二室模型,半衰期为(3.692±0.196)h。MR显示探针在正常小鼠体内主要分布于肝脏与脾脏,代谢缓慢,于2周左右完全从肝、脾代谢清除;AAS对脏器探针铁含量的测定与普鲁士蓝染色证实了MR成像结果。结论本研究明确了MR成像可用于活体示踪SPIO-shRNA分子探针在动物体内主要脏器的生物分布,为进一步利用MR无创监测探针在动物体内的治疗作用提供了依据。

厦门市2012年HIV/AIDS疫情分析

目的了解厦门市2012年HIV感染者／艾滋病（HIV／AIDS）流行情况和近年发展趋势，为制定防治策略提供依据。方法对厦门市2012年艾滋病疫情数据进行统计分析。结果2012年共发现并报告193例，现住址为厦门124例；HIV／AIDS例数逐年上升，自2010年起增幅较大；2012年报告现住址和户籍为厦门各占56．4％和32．7％；病例多聚集在思明区（36．3％）和湖里区（27．4％）；男女性别比5．9：1；以20～45岁青壮年为主（80．7％）；2008-2012年未婚的构成比从37．9％升高到50．8％；病例来源居前3位：检测咨询32．3％、其他就诊者检测16．9％和术前检测15．3％，专题调查、性病门诊就诊者、婚前检查等共占35．5％；均为性传播，其中异性62．0％，同性38．0％。同性传播占比逐年上升，2008-2012年同性性传播呈逐年升高趋势，集中在20～40岁未婚人群，以自愿咨询检测为主（35．2％）。结论近年来厦门市艾滋病发病数呈明显上升趋势，有明显地区差异，男女差别较大，高峰年龄提前。同性性传播比例增加明显，应重点关注同性人群。