大麦芽碱盐酸盐通过诱导凋亡抑制Hela细胞的恶性行为

目的研究大麦芽碱盐酸盐对Hela细胞的抑制作用及作用机制。方法使用MTT法、平板克隆来检测Hela细胞的增殖能力,用划痕实验、transwell实验来检测Hela细胞的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒来检测大麦芽碱盐酸盐能否诱导Hela细胞出现凋亡,使用蛋白免疫印迹法来检测Hela细胞中Bax、Bcl-2和Caspase3蛋白水平的表达。结果大麦芽碱盐酸盐可呈剂量依赖性抑制Hela细胞的增殖和迁移,诱导Hela细胞凋亡;经大麦芽碱盐酸盐处理后Hela细胞中Bcl-2呈下调趋势,Bax和Caspase3呈上调趋势,且有剂量依赖性。结论大麦芽碱盐酸盐可抑制Hela细胞的增殖和迁移,且通过上调Bax、Caspase3和下调Bcl-2的表达来诱导该细胞凋亡。

阿苯达唑对人食管鳞癌细胞KYSE-150的抑制作用

目的研究阿苯达唑对食管鳞癌KYSE-150细胞的抑制效果及作用机制。方法通过MTT法和克隆形成实验评估KYSE-150细胞的增殖能力,利用划痕和Transwell小室实验证明细胞的迁移和侵袭能力。同时,采用凋亡与坏死检测试剂盒检测阿苯达唑是否能够诱导KYSE-150细胞凋亡,并利用Western blot实验探讨凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2、P53的表达水平。结果阿苯达唑能够以剂量依赖性的方式抑制KYSE-150细胞的活力、增殖、迁移和侵袭能力。YO-PRO-1/PI双染检测结果表明,阿苯达唑能够诱导细胞凋亡,同时使Bcl-2蛋白表达下调,而BAX、P53蛋白表达上调。结论阿苯达唑对食管鳞癌KYSE-150细胞的增殖与迁移具有显著抑制作用,其机制可能与对凋亡相关蛋白的调控有关。

大叶茜草素诱导黑色素瘤B16F10凋亡

目的研究大叶茜草素对黑色素瘤B16F10细胞的作用机制。方法使用MTT法(其中大叶茜草素浓度为0、40、80、160和320μmol/L)、平板克隆(其中大叶茜草素浓度为0、10、20和40μmol/L)来检测B16F10的增殖能力,用划痕实验(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测大叶茜草素是否诱导B16F10凋亡,使用蛋白免疫印迹法(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10细胞中MTA1基因蛋白水平的表达。结果大叶茜草素可剂量依赖性抑制B16F10细胞的增殖和迁移,诱导B16F10凋亡;经大叶茜草素处理后B16F10细胞中MTA1具有下调趋势,且呈剂量依赖性。结论大叶茜草素可以通过下调MTA1来抑制B16F10细胞的增殖、迁移并诱导凋亡。

马钱子碱抑制骨肉瘤的作用机制

目的探究马钱子碱对骨肉瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法在HOS和143B细胞中分别加入不同浓度的马钱子碱处理细胞,使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法,通过EDU实验和细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞的增殖活性;利用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测骨肉瘤细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况,引入生物信息预测技术预测马钱子碱对骨肉瘤发挥作用的机制,最后采用Western blot实验验证蛋白的表达量。结果马钱子碱呈时间和剂量依赖性抑制HOS和143B细胞的增殖,也能够抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭;马钱子碱通过抑制PI3K-AKT信号通路促进骨肉瘤HOS和143B细胞的凋亡,下调了HOS和143B细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP9、CyclinD1、C-caspase9蛋白含量。结论马钱子碱可呈剂量依赖性的抑制HOS和143B细胞的增殖和侵袭迁移,有望作为潜在的抗骨肉瘤药物。

药物涂层预防种植体周围炎的研究与进展

背景:种植体/基台表面药物涂层可实现局部抗菌、促骨结合和促软组织封闭形成,预防种植体周围炎的发生,从而提高种植成功率。目的:归纳总结不同药物涂层预防种植体周围炎发生的研究现状和进展。方法:应用计算机检索中国知网、万方数据、PubMed及维普数据库,以“种植体周围炎、载药材料、涂层、抗菌、骨结合、软组织封闭”为中文检索词,以“peri-implantitis,drug loading materials,coating,antibacterial,osseointegration,soft-tissue integration/soft tissue sealing”为英文检索词,按照纳入和排除标准对文献进行筛选,最终纳入79篇文献进行综述分析。结果与结论:①目前的药物载体具有良好的机械、热化学和生物性能,能够通过加载和释放药物来改善种植体/基台表面抗菌、促骨结合及软组织封闭形成等功能,实现种植体周围炎的直接和/或间接预防,为种植体周围炎的预防提供了新的研究方向;例如基台表面载抗菌肽涂层既可抑制细菌的聚集和黏附,又可促进种植体软组织封闭的形成,阻止细菌侵犯下方的牙槽骨、避免骨组织的炎性吸收,从而预防种植体周围炎。②单一药物涂层可能存在药物突释、功能简单、难以持续给药和药物补充的问题,未来研究者们可通过复合不同的载体及药物、改善载药方式及改进涂层技术,开发既能“智能”控释药物,又具备多功能及“再生性”的药物涂层。③尽管目前大多数体外研究都证明了药物涂层具有预防种植体周围炎的潜力,但相关动物体内研究及临床研究较少,未来需进行更多的相关研究以进一步探究种植窝内其他细胞或物质是否影响药物的释放,探索种植体负载状态下药物涂层的作用效果,从而促进药物涂层的临床推广。

β-榄香铜酸对人食管癌细胞Eca-109的抑制作用

目的探究β-榄香铜酸对人食管癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法使用不同浓度的β-榄香铜酸(0、20、40、60μmol/L)处理Eca-109细胞,首先进行MTT、平板克隆、细胞划痕、transwell迁移、transwell侵袭实验检测β-榄香铜酸对Eca-109的细胞增殖、迁移、侵袭的影响;之后在60μmol/L浓度组使用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)干预探索其作用机制。使用试剂盒检测Eca-109细胞中Fe^(2+)、ROS、lipid ROS、GSH、MDA含量,使用Western blot实验检测Eca-109细胞中GPX4、PTGS2和4-HNE的蛋白表达。结果β-榄香铜酸可呈剂量依赖性抑制Eca-109的细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭,激活Eca-109中铁死亡通路蛋白PTGS2和4-HNE,导致GPX4失活,出现铁依赖性的脂质过氧化。Ferrostatin-1可抑制整个进程,从而减少Eca-109细胞的铁死亡。结论β-榄香铜酸可通过铁死亡通路抑制人食管癌细胞Eca-109,有望成为潜在抗食管癌的药物。

盐酸药根碱对宫颈癌细胞的抑制作用

目的探讨盐酸药根碱(Jatrorrhizine hydrochloride,JH)在细胞水平上对宫颈癌细胞增殖能力、平板克隆、细胞伤口愈合、侵袭、迁移、细胞凋亡和坏死的影响及作用机制研究。方法通过MTT、平板克隆实验研究不同浓度的盐酸药根碱48h后对宫颈癌Hela细胞培养过程中的增殖及克隆形成的影响。为获得更准确的结果,通过细胞伤口愈合实验和Transwell细胞迁移实验来检测盐酸药根碱对Hela细胞横向和纵向迁移能力的影响,并采用Transwell细胞侵袭实验来检测其对Hela细胞侵袭能力的影响。使用YO-PRO-1/PI检测试剂盒进行荧光染色,用来检测细胞凋亡与坏死情况。通过Western blot检测不同浓度的盐酸药根碱对Hela细胞中坏死与凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果MTT、平板克隆实验结果显示盐酸药根碱抑制宫颈癌Hela细胞增殖,呈现时间和剂量依赖;细胞伤口愈合实验和迁移、侵袭实验显示盐酸药根碱能够以剂量依赖性的方式抑制Hela细胞的横向及纵向迁移以及侵袭能力。结论体外细胞实验表明,盐酸药根碱可抑制Hela细胞增殖、侵袭、迁移能力,有望作为抗癌潜在药物在临床上进一步研究。

构建科教结合平台——促进医学研究生教育质量提升和内涵发展

研究生教育处于国民教育体系的顶端,承担着人才升级和创新升级的双重使命,在国家创新体系建设中具有举足轻重、不可替代的重要作用。但通过近几年的发展,医学高水平的人才教育依然达不到我省医疗水平全面发展的多样化需求,高层次人才的质量和数量与国内外及周边省份比较还有很大差距。提高质量成为新一轮研究生教育改革和发展最紧迫最核心的任务,我省医学高校以实际出发,发挥"研究平台"优势,构建"科教结合"平台作为创新人才的培养模式,是促进医学研究生教育质量提升和内涵发展的有效措施之一。

牙龈卟啉单胞菌血凝集素黏附结构域ha2基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化

目的在原核表达质粒pET21a-ha2成功构建的基础上,诱导目的基因在大肠杆菌中表达,进行表达产物的纯化及鉴定。方法原核表达质粒pET21a-ha2经PCR鉴定后,转入大肠杆菌Rosetta感受态细胞诱导筛选,经SDS-PAGE电泳检测,IPTG诱导表达。通过包涵体的变复性、Millipore超滤系统的滤浓缩、Ni-TA层析分离纯化HA2蛋白。结果原核表达质粒pET21a-ha2转化大肠杆菌经IPTG诱导后,成功表达HA2蛋白,大小约15 kD,与预计目的蛋白大小相同。HA2纯化蛋白浓度为0.449 mg/mL,经测序与NCBI蛋白数据库比对无突变。结论pET21a-ha2可在大肠杆菌中成功表达,并成功得到纯化的HA2蛋白。

一种SD大鼠实验性牙周炎模型的建立方法

目的通过优化方法建立大鼠牙周炎动物模型,观察牙周炎动物模型牙槽骨吸收程度。方法丝线结扎牙周炎组大鼠上颌第二磨牙。建模期间观察实验大鼠牙周情况,影像学检测大鼠牙槽骨吸收情况,体视显微镜测量牙槽骨吸收量。RT-qPCR法检测牙龈组织中TNF-α、MMP-8 mRNA的相对表达水平。结果牙周病组大鼠上颌第二磨牙牙周组织炎症逐渐加重,牙槽骨吸收量增大,松动度逐渐加大,牙周病组TNF-α、MMP-8 mRNA相对表达量与对照组比较增高。结论通过优化造模方法,成功建立SD大鼠牙周炎动物模型。

贵州省医学院校创新型人才培养模式探索

近年来,贵州省医学院校的高层次人才培养取得了很大的进步,为医疗卫生行业输送了很多医学专业人才,为贵州省医疗卫生事业的全面发展提供了人才储备。但与全国、周边和发达省份相比严重滞后,除医学研究生教育规模小,还存在总体质量不高的问题,这说明医学院校的培养方式与贵州省医疗水平全面发展的多样化需求还不适应,高层次人才的综合能力和创新精神还需提高。本文探索适合贵州省医学院校研究生科教结合、协同创新的培养模式,具有重要的理论价值和现实意义。

基于编码-解码器架构的光场深度估计方法

针对现有光场深度估计方法存在的计算时间长和精度低的问题,提出了一种融合光场结构特征的基于编码-解码器架构的光场深度估计方法。该方法基于卷积神经网络,采用端到端的方式进行计算,一次输入光场图像就可获得场景视差信息,计算量远低于传统方法,大大缩短了计算时间。为提高计算精确度,网络模型以光场图像的多方向极平面图堆叠体(Epipolar Plane Image Volume,EPI-volume)为输入,先利用多路编码模块对输入的光场图像进行特征提取,再使用带跳跃连接的编码-解码器架构进行特征聚合,使网络在逐像素视差估计时能够融合目标像素点邻域的上下文信息。此外,模型采取不同深度的卷积块从中心视角图中提取场景的结构特征,并将该结构特征引入对应的跳跃连接中,为视差图预测提供了额外的边缘特征参考,进一步提高了计算精确度。对HCI-4D光场基准测试集的实验结果表明,所提方法的坏像素率(BadPix)指标比对比方法降低了31.2%,均方误差(MSE)指标比对比方法降低了54.6%。对于基准测试集中的光场图像,深度估计的平均计算时间为1.2 s,计算速度远超对比方法。

SD大鼠经鼻黏膜免疫牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)后Tfh细胞的变化

目的:观察SD大鼠经鼻黏膜免疫牙周炎基因疫苗后Tfh细胞的变化,探讨Tfh细胞在黏膜免疫应答产生特异性sIgA抗体中的作用。方法:采用鼻滴方式免疫SD大鼠,A组为生理盐水组,B组为空载体(pVAX1)组,C组为牙周炎疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)组,ELISA法检测大鼠唾液中特异性sIgA抗体的水平;流式细胞技术检测鼻黏膜Tfh细胞及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞的表达。结果:第3~7周C组大鼠唾液中特异性sIgA抗体表达水平高于A组和B组(P<0.05);C组FITC(CD4)和Aleax flour 594(CXCR5)融合后呈黄色荧光,A组和B组的免疫荧光双染结果中未见双阳性荧光信号;C组大鼠鼻黏膜细胞中CD4+CXCR5+Tfh及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞的表达均高于A组和B组(P<0.05);且发现大鼠唾液中特异性sIgA与大鼠鼻黏膜CD4+CXCR5+Tfh及CD4+CXCR5+ICOS+Tfh细胞均呈正相关关系。结论:牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA-(IL-15)经鼻黏膜免疫大鼠后可激活Tfh细胞在鼻黏膜的表达,表达水平与特异性sIgA抗体水平呈正相关关系,说明Tfh细胞可能在促进机体产生特异性sIgA抗体的过程中起到重要作用。

牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2、pVAX1-HA2/IL-15鼻腔黏膜免疫SD大鼠的实验研究

目的:观察牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2、pVAX1-HA2/IL-15经鼻黏膜免疫SD大鼠后的免疫原性及其目的蛋白在免疫部位的表达。方法:32只SD大鼠分别经pVAX1-HA2、pVAX1-HA2/IL-15、pVAX1(空载体对照)和生理盐水(阴性对照)经鼻腔黏膜免疫(n=8)。ELISA法测定唾液SIgA抗体水平、免疫组织化学检测目的蛋白的表达情况以及进行动物的一般安全性检测。结果:①牙周炎疫苗经鼻黏膜免疫后可以诱导机体产生唾液SIgA抗体,且抗体水平在实验组明显高于空载组和阴性对照组(P<0.05)。②目的蛋白在鼻腔黏膜表达。③pVAX1-HA2/IL-15免疫组较pVAX1-HA2组产生更高水平的抗体。④大鼠体重无明显差异,重要脏器未见明显的病理学改变。结论:①牙周炎基因疫苗能诱导大鼠共同黏膜免疫系统产生免疫应答,具有免疫原性且具有安全性。②IL-15可作为该疫苗的免疫佐剂。

试析小学数学教学中如何渗透数学史知识

在目前的小学教育体系中,数学属于其中极为关键的一门,学好数学对发展学生的学习能力、认知能力以及头脑灵活性的培养都有重要帮助。在新课程改革不断推进的教育背景下,小学数学的教学方式、目标均需不断提升,才能更好地满足学生的学习需求和发展需要。而在小学数学教学课堂上渗透进数学史知识,不仅可以让学生感悟到数学家的思维方式、理念,同时也可以加深学生对数学发展历史产生一个较为清晰的概念。本文简要分析小学数学教学中渗透数学史知识的教学策略。

初中英语听力教学难点与教学策略研究

随着新课标的改革,初中英语听力部分在英语教学中的地位日渐增高,英语教师应该将听力教学改革真正落实,总结现阶段英语听力教学过程之中存在的问题并采取针对性的整改方案,这样学生可以通过参与英语课堂学习而获得英语听力能力的进一步提升,并且对于初中英语听力教学的发展也起到了促进的作用。在初中英语课堂中,只有听、说、读、写能力获得了全面发展,学生的英语核心素养才会得到提高。本文通过对于现阶段初中英语听力的教学难点进行分析,并总结得出针对性的教学整改方案。

小学音乐教育创新策略

音乐教育是提高小学生的艺术修养的重要途径，在小学音乐教育过程中，应该要针对小学生的个性特征，加强教学过程中的情景教学法、课外实践教学模式等新型教育模式的应用，从而使得小学音乐教育可以不断创新。本文对小学音乐教学策略进行分析和探讨。

牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA、pVAX1-HA2-FimA/IL-15对大鼠实验性牙周炎保护作用研究

目的:观察牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA、pVAX1-HA2-FimA/IL-15对SD大鼠实验性牙周炎的保护作用。方法:54只雄性SD大鼠随机分为9组,对照组:生理盐水组(A组)、空载质粒pVAX1组(B组)、牙周病组(C组);实验组:50μg、100μg、150μg pVAX1-HA2-FimA组(D、E、F组)和50μg、100μg、150μg pVAX1-HA2-FimA/IL-15组(G、H、I组)。鼻滴免疫SD大鼠后建立实验性牙周炎模型,采用RT-qPCR法检测牙龈中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶8(matrix metalloproteinase-8,MMP-8)m RNA相对表达量;立体显微镜观察并测量牙槽骨吸收量。结果:①各实验组牙龈组织中TNF-α、MMP-8 mRNA低于牙周病组,且差异有统计学意义(P<0.05);②相同剂量的pVAX1-HA2-FimA/IL-15组较pVAX1-HA2-FimA组大鼠牙槽骨吸收量少,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周炎基因疫苗pVAX1-HA2-FimA和pVAX1-HA2-FimA/IL-15对SD大鼠实验性牙周炎具有保护作用。

基于时间、OD600值及平板计数法测定嗜酸乳杆菌数量的方法

目的:通过将平板计数法与紫外分光光度计测定的OD600值结合,寻找一种简易的测定嗜酸乳杆菌菌液浓度的方法。方法:①利用紫外分光光度计测定不同时间的嗜酸乳杆菌菌液的OD600值;②以10为梯度对原始菌液进行稀释,将稀释菌液取0.1mL培养于固体培养板上,采用平板菌落计数法计算菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量可计算出样品中的含菌量。结果:采用紫外分光光度计(OD600)与平板计数结合的方法进行菌液浓度的测定,在培养22h,OD600值达到1.0时,稀释107倍后菌落计数为3,可计算出原菌液浓度为3×108CFU/mL,再将菌液与培养基取等体积稀释后浓度为1.5×108CFU/mL,即相当于0.5号麦氏浊度标准管的细菌浓度,该浓度是进行纸片法、MIC的适宜细菌浓度。结论:该法简便、高效,准确性较单纯比浊法好,不需特殊仪器,为基础实验可提供帮助。

茶多酚对人牙槽骨成骨细胞相关基因表达的影响

目的观察茶多酚对成骨细胞特异性转录因子、组织非特异性碱性磷酸酶、骨钙素3种与成骨细胞相关基因表达产生的作用,探讨茶多酚调节人牙槽骨恢复和再生的可行性。方法不同浓度的茶多酚和人牙槽骨成骨细胞共培养24、48、72 h后提取细胞总RNA,逆转录,采用qRT-PCR法检测成骨细胞特异性转录因子、组织非特异性碱性磷酸酶、骨钙素基因的表达量。结果在72 h时1.0μg/mL茶多酚组的特异性转录因子和骨钙素基因相对表达量比24 h和48 h时的基因表达量有所增高(P<0.05)。结论茶多酚可以提高人成骨细胞中特异性转录因子和骨钙素基因表达促进牙槽骨成骨细胞增殖、分化,从而在一定程度上为茶多酚应用于种植体骨结合提供理论基础。