探究影响水果电池电动势和内阻的因素

一、提出问题 初中时，我们曾制作过一种非常简单的电池——水果电池。制作水果电池需要两种不同的金属做电极以及电解汁，也就是水果的汁液。将两种不同的金属丝或金属片插入一个水果中，就制成了一个水果电池。

siRNA干扰TWSG1基因表达对胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨扭转原肠胚形成同系物1基因(twisted gastrulation protein homolog 1,TWSG1)对胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响。方法:设计3条TWSG1基因相关的siRNA,将对数生长期MGC-803细胞分为空白对照组、阴性对照组、siRNA1干扰组、siRNA2干扰组和siRNA3干扰组,待细胞汇合率达70%～80%时分别转染空载体、连接siRNA1、siRNA2和siRNA3的载体。采用q PCR和Western blotting检测各组细胞TWSG1 m RNA和TWSG1蛋白的表达水平,筛选干扰效率最高的稳定细胞株。用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果:各转染组细胞中siRNA1干扰效率最高。与空白对照组和阴性对照组相比,siRNA干扰组细胞TWSG1表达下调(P<0.05),其细胞增殖显著增加(P<0.05),凋亡显著减少(P<0.05)。结论:siRNA干扰MGC-803细胞中TWSG1基因的表达后,可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡。

扭转原肠胚形成同系物1基因过表达对人胃腺癌细胞株BGC-823增殖的影响

目的构建扭转原肠胚形成同系物1(TWSG1)真核表达质粒,并观察其对人胃腺癌细胞株BGC-823增殖的影响。方法构建TWSG1基因真核表达质粒,取对数生长期BGC-823细胞分为观察组和对照组,待细胞汇合率达70%~80%时观察组和对照组分别转染TWSG1真核表达质粒、空白质粒载体。采用Real-Time PCR法检测两组细胞TWSG1基因,采用Western blotting检测TWSG1蛋白。采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况。结果与对照组比较,观察组TWSG1基因及蛋白相对表达量均升高(P均<0.05)。与对照组比较,培养24、48、72 h时观察组细胞OD值均降低(P均<0.05)。结论 TWSG1基因过表达可抑制BGC-823细胞的增殖。

水稻金属硫蛋白OsMT-1-2a的原核表达及活性分析

本研究旨在研究水稻金属硫蛋白Os MT-1-2a基因原核表达情况及清除活性氧的能力。从水稻中克隆获得的Os MT-1-2a基因亚克隆至p ET32a原核表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了带有6x His标签的Os MT-1-2a全长重组蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在,分子量大小为32 k D,与预期大小一致。随后,通过镍柱法纯化目的蛋白,利用WST法表明纯化蛋白在体外具有一定的清除超氧化物的能力。

水稻PAL基因的全基因组分析及胁迫表达研究

苯丙氨酸酶（phenylalanine enzyme,PAL）是催化苯丙烷次级代谢过程中的重要限速酶,对植物生长发育意义重大。为进一步探讨水稻OsPAL基因的功能,利用生物信息学的方法,在水稻全基因组水平上对OsPAL基因家族进行了进化树、基因结构、染色体定位等方面的分析。数据表明,水稻基因组中共存在9个PAL基因,命名为OsPAL1-Os PAL9,编码681-719个氨基酸,都含有一个保守性很高的Lyase aromatic结构域,集中分布于第2、4、5、11和12号染色体上。进化树的分析表明,9个Os PAL基因可分为三类亚家族：Ⅰ类（Os PAL2-4,OsPAL6-7）,Ⅱ类（OsPAL8-9）和Ⅲ类（OsPAL1,OsPAL5）,3类比较明显的区别是蛋白N端的前30个氨基酸。荧光定量q RT-PCR分析表明,除Os PAL8外,其它8个基因的表达至少受干旱、低温、Na Cl和ABA等4种胁迫中的一种响应。

CRISPR/Cas9介导靶向敲除水稻过氧化氢酶基因OsCAT

过氧化氢酶(catalase,CAT)作为重要的抗氧化酶,可催化细胞内过氧化氢的分解。为了研究水稻过氧化氢酶基因OsCAT3的功能,选择目的基因第二外显子上的"CTCGTTCAACGGCCCGCTGTGG"作为目标靶序列,构建了OsCAT3的CRISPR/CAS9载体,将目的载体转化水稻粳稻‘9522’后获得在PAM附近发生编辑的独立转基因株系,编辑方式主要表现为缺失和错配。与野生型相比,转基因植株呈现生长矮小、不分蘖、叶片呈明显的病叶状表型,这为深入研究水稻OsCAT3基因的作用机制提供了帮助。

水稻SOD基因家族的全基因组分析及逆境胁迫下表达研究

超氧化物歧化酶(SOD)是植物体内活性氧清除系统中的关键酶。为进一步研究水稻SOD基因家族的特点,利用生物信息学的方法,在水稻全基因组水平上对SOD基因家族进行了基因结构、染色体定位及进化树等方面的分析。结果表明,水稻基因组中共有9个OsSOD基因,包括6个Cu/Zn-SOD、2个Fe-SOD和1个Mn-SOD,可分为2个亚家族。9个OsSOD基因含有5~9个内含子不等,分布在6条染色体上。荧光定量qRTPCR分析表明,在NaCl、干旱、ABA和低温等4种逆境条件下,8个OsSOD基因的表达量会受其中三种胁迫而发生变化。

利用CRISPR/Cas9技术定向编辑水稻过氧化氢酶基因OsCAT

过氧化氢酶(catalase,CAT)作为重要的抗氧化酶,可催化细胞内过氧化氢的分解,为了研究水稻过氧化氢酶基因OsCAT2的功能,首先根据在线软件http://crispr.mit.edu/搜寻向导sg RNA序列,选择OsCAT2基因第三外显子上的"GTGGAGAACCGAACAATAACTGG"作为目标靶序列,然后构建了OsCAT2的CRISPR/Cas9载体BGK03-OsCAT2,将目的载体转化水稻粳稻9522后共获得了7个独立的转基因株系,其中包括在PAM附近发生编辑的独立转基因株系2个,编辑方式主要表现为缺失和错配。与野生型相比,转基因植株较矮、分蘖数增加、叶片呈明显的病叶状、成熟时期育性明显降低,这为深入研究水稻OsCAT2基因的作用机制提供了帮助。

回收式自体血回输的临床应用、体会及意义

目的:介绍回收式自体血回输的临床应用及方法.方法:对肝、脾、宫外孕破裂、肠系膜血管破裂、网膜血管破裂导致腹腔内出血术中进行回收式自体血回输,用106 mmol/L浓度的枸橼酸钠液作抗凝剂,舀出的血液经8层～10层纱布过滤后回输给患者.结果:本组62例,共回收血液10万毫升左右,无一例出现输血反应及并发症.结论:回收式自体血回输的应用,节省了大量异体血,减少了病人的医疗费用,减少了不必要的输血反应及术后并发症,将产生很大的社会效益及经济效益.

siRNA干扰TWSG1表达对SGC-7901细胞增殖的影响

目的构建siRNA干扰扭转原肠胚形成同系物1(TWSG1)表达质粒,观察TWSG1基因对人胃癌细胞株SGC-7901增殖与凋亡的影响。方法设计TWSG1基因的siRNA转染细胞SGC-7901,构建稳定细胞株,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测稳定细胞株,使用蛋白印迹法检测稳定细胞株,CCK8检测细胞增殖,进行细胞周期检测。结果成功构建真核表达质粒。成功转染SGC-7901细胞株后,使用siRNA干扰TWSG1表达,siRNA干扰TWSG1表达的SGC-7901细胞灰度值显著低于内参。于24、48、72h时CCK8检测其OD值:siRNA干扰的SGC-7901细胞在48、72h时分别增殖339%、850%;空白组SGC-7901分别增殖173%、644%。细胞周期检测siRNA干扰组中S期细胞比例增高。结论siRNA干扰SGC-7901细胞中TWSG1基因的表达后,能有效促进SGC-7901细胞的增殖。