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海枣曲霉β-葡萄糖苷酶的提纯与性质 被引量:11
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作者 曾宇成 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期195-199,共5页
通过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双相分离,Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadcx A-50及SE-Sephadex C-50离子交换柱层析等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspergillus_phoenicis)麦麸培养物抽提液中提纯到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最... 通过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双相分离,Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadcx A-50及SE-Sephadex C-50离子交换柱层析等提纯步骤,从海枣曲霉(Aspergillus_phoenicis)麦麸培养物抽提液中提纯到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最适pH5.0,最适温度60%,在pH 4.0—7.5之间及55℃以下稳定。Ag^+及Hg^(2+)对该酶有强烈的抑制作用。用SDS-凝胶电泳法及梯度凝胶电泳法测得该酶的分子量分别为118000及195000薄层凝胶等电聚焦法测得其等电点为pH 3.95。 展开更多
关键词 海枣曲霉 葡萄糖苷酶 提纯 性质
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海枣曲霉β-D-岩藻糖苷酶的研究 被引量:3
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作者 曾宇成 李玉德 +1 位作者 顾雅君 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期105-114,共10页
虽然β-D-岩藻糖苷酶(EC3.2.1.38)已从多种动植物中分离纯化,但因它们的专一性均不高而难以确证。我们从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)培养物中提取,经过 PEG6000-磷酸缓冲液双水相分离,相继用 DEAE-sephadex A-50、羟基磷灰石、Seph... 虽然β-D-岩藻糖苷酶(EC3.2.1.38)已从多种动植物中分离纯化,但因它们的专一性均不高而难以确证。我们从海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)培养物中提取,经过 PEG6000-磷酸缓冲液双水相分离,相继用 DEAE-sephadex A-50、羟基磷灰石、Sephadex G-100等柱层析分离,获得了凝胶电泳均一的β-D-岩藻糖苷酶,比活力提高500倍。酶反应的最适条件为40℃和 pH 6.0,在35℃以下和 pH5.5—6.5稳定。凝胶过滤法测分子量为50000—60000,用 SDS-PAGE 测出分子量为57000。酶的 K_m 值为2.4mmol/L,V_(max)为12.8μmol·min^(-1)·mg^(-1)。金属离子 Ag^+、Hg^(2+)对酶有强抑制作用,巯基乙醇和牛血清清蛋白以及甘油和多种糖能提高酶活力。化学修饰结果表明,-SH、—COOH 基团和组氨酸、色氨酸残基为酶活力所必需。该酶只能水解 pNP-β-D-岩藻糖苷,有严格的底物专一性,并能专一地受 D-岩藻糖和 D-岩藻糖酸-γ-内酯所抑制,为迄今为止最专一的β-D-岩藻糖苷酶,堪称该酶的典型代表。 展开更多
关键词 岩藻糖苷酶 海枣曲霉
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海枣曲霉β-木糖苷酶的提纯和性质 被引量:5
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作者 曾宇成 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第6期427-433,共7页
从海枣曲霉麦麸培养物抽提液中,通过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双水相分离,相继用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、羟基磷石吸附层析、DEAE-Sephadex ... 从海枣曲霉麦麸培养物抽提液中,通过聚乙二醇6000-磷酸钾缓冲液双水相分离,相继用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、羟基磷石吸附层析、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析、SE-Sephadex C-50离子交换层析以及最适温度为65℃,在pH3.5-6.5之间稳定,酶保温30分钟时的半失活温度(t1/2)为68℃。 展开更多
关键词 海枣曲霉 Β-木糖苷酶 提纯
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海枣曲霉β-葡萄糖苷酶的催化性质 被引量:2
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作者 曾宇成 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期182-186,共5页
本文研究了海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)β-葡萄糖苷酶的底物特异性以及不同化学试剂对酶活力的影响。该酶水解对-硝基酚基-β-葡萄糖苷、纤维二糖和水杨素的相对活力分别为100、180和67.3。水解对-硝基酚基β-葡萄糖苷和纤维二糖的... 本文研究了海枣曲霉(Aspergillus phoenicis)β-葡萄糖苷酶的底物特异性以及不同化学试剂对酶活力的影响。该酶水解对-硝基酚基-β-葡萄糖苷、纤维二糖和水杨素的相对活力分别为100、180和67.3。水解对-硝基酚基β-葡萄糖苷和纤维二糖的 K_m 值分别为0.97mmol/L和1.8mmol/L,V_(max)分别为576μmol·min^(-1)·mg^(-1)和595μmol·min^(-1)·mg^(-1)。Ag^+、D^-葡萄糖和纤维二糖对酶活力有强烈的抑制作用。Lineweaver-Burk 作图法及 Dixon 作图法表明D-葡萄糖对该酶显示竞争性抑制作用,其 K_i 值分别为3.0mmol/L 和3.4mmol/L。 展开更多
关键词 海枣曲霉 Β-葡萄糖苷酶
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海枣曲霉糖苷酶类的化学组成 被引量:1
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作者 曾宇成 张树政 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第6期432-438,共7页
本文测定的海枣曲霉糖苷酶均为糖蛋白,含糖量分别为:地衣多糖酶7.7%,木聚糖酶X-Ⅱ 5.8%,木聚糖酶X-Ⅲ 3.3%,β-半乳糖苷酶14.3%,β-葡萄糖苷酶16.1%,β-木糖苷酶15.5%。这几个酶的氨基酸组成有较大差异,但也有共同特点,即都含有较多酸... 本文测定的海枣曲霉糖苷酶均为糖蛋白,含糖量分别为:地衣多糖酶7.7%,木聚糖酶X-Ⅱ 5.8%,木聚糖酶X-Ⅲ 3.3%,β-半乳糖苷酶14.3%,β-葡萄糖苷酶16.1%,β-木糖苷酶15.5%。这几个酶的氨基酸组成有较大差异,但也有共同特点,即都含有较多酸性与羟基氨基酸,含His,Met较少。将这些酶的氨基酸组成作成星状图,结果这些酶的星状图互不相同,只有β-葡萄糖苷酶和β-木糖苷酶的星状图之间有一定的相似性。比较海枣曲霉糖苷酶和其他来源的糖苷酶的氨基酸组成的星状图。发现不同来源的同一种酶都有不同程度的相似性,且相似程度与产生菌之间的亲缘关系有很大的相关性。 展开更多
关键词 海枣曲霉 糖苷酶 化学组成
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海枣曲霉β-D-岩藻糖苷酶的专一性
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作者 曾宇成 李玉德 +1 位作者 李梅 张树政 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1992年第5期445-447,共3页
虽然β-D-岩藻糖苷酶(Fuc-ase)(β-D-Fucoside fucohydrolase EC 3·2·1·38)已经从多种动植物中分离出来,但专一性都不高,“酶学命名”所列的该酶均具有相当高的β-D-半乳糖苷酶(Gal-ase)和/或β-D-葡萄糖苷酶(Glc-ase)... 虽然β-D-岩藻糖苷酶(Fuc-ase)(β-D-Fucoside fucohydrolase EC 3·2·1·38)已经从多种动植物中分离出来,但专一性都不高,“酶学命名”所列的该酶均具有相当高的β-D-半乳糖苷酶(Gal-ase)和/或β-D-葡萄糖苷酶(Glc-ase)活力。 展开更多
关键词 2-D-岩藻 苷酶 海枣曲霉 专一性
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STRICTLY SPECIFIC β-D-FUCOSIDASE FROM Aspergillus phoenicis
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作者 曾宇成 李玉德 +1 位作者 李梅 张树政 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1992年第17期1466-1469,共4页
Ⅰ. INTRODUCTIONAlthough β-D-fucosidase (β-D-fucoside fucohydrolase, EC 3.2.1.38 ) has been isolated from various sources, the identity of this enzyme is still not settled. The β-D-fucosidases (Fuc-ase) activity li... Ⅰ. INTRODUCTIONAlthough β-D-fucosidase (β-D-fucoside fucohydrolase, EC 3.2.1.38 ) has been isolated from various sources, the identity of this enzyme is still not settled. The β-D-fucosidases (Fuc-ase) activity listed in the latest Enzyme Nomenclature were all associated with 展开更多
关键词 SPECIFIC β-D-fucosidase ASPERGILLUS phoenicis glycosidase.
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