表面偶极离子亲水磁珠固定化异柠檬酸裂解酶及其表征

比较两种亲水磁珠固定化结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶(Mycobacterium tuberculosis isocitrate lyase,Mt ICL)并优化,为天然产物中Mt ICL先导抑制剂的亲和富集筛选提供适用的固定化酶。构建6×His-pET28a-ICL,经E.coli BL21(DE3)重组表达、Ni^(2+)-NTA柱纯化和酶学性质表征获得Mt ICL(重组蛋白质)。用羧基功能化和Ni^(2+)-NTA功能化制备两种表面偶极离子亲水磁珠固定化Mt ICL,比较其固载量、酶活力、稳定性及对已知抑制剂的响应。羧基磁珠固定化酶表观保留比活显著高于Ni^(2+)-NTA固定化酶。当羧基磁珠与重组蛋白质加样质量比为60∶1时,固定化酶表观保留比活可达游离酶的85%,此时羧基磁珠对Mt ICL表观固载量为(7.2±0.2)mg/g(以磁珠质量计,n=3)。羧基磁珠固定化Mt ICL对衣康酸的亲和力与游离酶无显著差异(P>0.05),且稳定性更强。此羧基磁珠固定化Mt ICL可望作为磁分离、亲和富集筛选天然产物中Mt ICL抑制剂类抗结核先导化合物。

自贡市第四人民医院2016~2019年呼吸道感染患者常见病毒感染分析

目的分析自贡市第四人民医院2016~2019年呼吸道感染患者,了解病毒在人群中的感染情况及流行特点。方法对自贡市第四人民医院经临床确诊为呼吸道感染患者8299例,采集鼻咽生物标本,采用免疫荧光法,检测七项呼吸道病毒,统计分析病毒在不同情况下人群中的感染情况及流行特点。结果自贡市第四人民医院2016~2019年呼吸道感染患者检出病毒的总阳性率为28.39%,以流感病毒A型、合胞病毒、流感病毒B型为主;感染类型以单个病毒感染为主,两种或两种以上病毒感染仅为1.59%,混合感染以合胞病毒合并其他种类病毒为主;秋、冬季是呼吸道病毒感染的高发季节,0~6岁儿童为主要感染群体,病毒感染在性别方面没有明显差异。结论通过分析呼吸道病毒在不同年龄、年份、季节以及不同性别人员中流行病学特征,有利于知晓不同病毒在该区域的流行感染特点,便于制定预防措施,为诊断治疗提供有效帮助。