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基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
1
作者
胡嘉淼
肖静
+6 位作者
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
李继东
周天鸿
冉艳红
李弘剑
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期97-101,共5页
利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带...
利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带有Flag标签标记UL23基因和单一FRT位点的突变BAC。重组后的BAC分子同质粒pcDNA3.1(+)-pUL82共转染HFF细胞后重建重组HCMV。Western blotting检测证实所构建重组病毒能够表达含Flag标签标记的pUL23蛋白。此含有Flag标签标记UL23基因的重组HCMV的成功构建为了进一步研究人巨细胞病毒UL23基因及其产物的功能提供依据。
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关键词
UL23人巨细胞病毒
RED同源重组
pKD46
pCP20
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职称材料
利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白
被引量:
3
2
作者
肖静
胡嘉淼
+7 位作者
肖小平
员月明
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
周天鸿
冉艳红
李弘剑
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期377-383,共7页
人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表...
人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白pUL24.GST-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.
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关键词
人巨细胞病毒
UL23基因
BAC
基因组文库
蛋白质相互作用
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职称材料
黎族竹制乐
3
作者
曾宝娟
《今日海南》
2002年第3期52-52,共1页
在黎乡村寨,到处都可以看到青葱可爱的竹林,家家都有用竹子制作的乐器:口弓、鼻箫、管箫、竹笛、唎咧等等。口弓,黎语叫"改",由薄竹片和薄铜片制成,中间留着一条活动舌簧,吹奏时边送气边用手弹动簧片,音质清晰动听,青年男女...
在黎乡村寨,到处都可以看到青葱可爱的竹林,家家都有用竹子制作的乐器:口弓、鼻箫、管箫、竹笛、唎咧等等。口弓,黎语叫"改",由薄竹片和薄铜片制成,中间留着一条活动舌簧,吹奏时边送气边用手弹动簧片,音质清晰动听,青年男女谈情说爱时,男子常弹打口弓向女方表示自己的爱慕之情;鼻箫,黎语叫"巡"。
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关键词
黎族
竹子
乐器
竹林
黎语
薄铜片
动簧片
吹奏
竹片
男子
原文传递
题名
基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
1
作者
胡嘉淼
肖静
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
李继东
周天鸿
冉艳红
李弘剑
机构
暨南大学生命科学技术学院生物工程学系
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期97-101,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30770106)
国家自然科学基金重大研究计划面上项目(90608024)
+1 种基金
广东省自然科学基金项目(06025162)
暨南大学科研培育与创新基金青年基金项目(11611711)
文摘
利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带有Flag标签标记UL23基因和单一FRT位点的突变BAC。重组后的BAC分子同质粒pcDNA3.1(+)-pUL82共转染HFF细胞后重建重组HCMV。Western blotting检测证实所构建重组病毒能够表达含Flag标签标记的pUL23蛋白。此含有Flag标签标记UL23基因的重组HCMV的成功构建为了进一步研究人巨细胞病毒UL23基因及其产物的功能提供依据。
关键词
UL23人巨细胞病毒
RED同源重组
pKD46
pCP20
Keywords
UL23 HCMV Red-mediated recombination pKD46 pCP20
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白
被引量:
3
2
作者
肖静
胡嘉淼
肖小平
员月明
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
周天鸿
冉艳红
李弘剑
机构
暨南大学生命科学技术学院生物工程学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期377-383,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.30770106)
国家自然科学基金重大研究计划面上项目(No.90608024)
广东省自然科学基金项目(No.06025162)~~
文摘
人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白pUL24.GST-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.
关键词
人巨细胞病毒
UL23基因
BAC
基因组文库
蛋白质相互作用
Keywords
human cytomegalovirus(HCMV)
UL23
BAC
genomic library
protein interaction
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
黎族竹制乐
3
作者
曾宝娟
出处
《今日海南》
2002年第3期52-52,共1页
文摘
在黎乡村寨,到处都可以看到青葱可爱的竹林,家家都有用竹子制作的乐器:口弓、鼻箫、管箫、竹笛、唎咧等等。口弓,黎语叫"改",由薄竹片和薄铜片制成,中间留着一条活动舌簧,吹奏时边送气边用手弹动簧片,音质清晰动听,青年男女谈情说爱时,男子常弹打口弓向女方表示自己的爱慕之情;鼻箫,黎语叫"巡"。
关键词
黎族
竹子
乐器
竹林
黎语
薄铜片
动簧片
吹奏
竹片
男子
分类号
J632.19 [艺术—音乐]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
胡嘉淼
肖静
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
李继东
周天鸿
冉艳红
李弘剑
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
下载PDF
职称材料
2
利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白
肖静
胡嘉淼
肖小平
员月明
刘明亮
曾宝娟
李婧惠
周天鸿
冉艳红
李弘剑
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
下载PDF
职称材料
3
黎族竹制乐
曾宝娟
《今日海南》
2002
0
原文传递
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