交联壳聚糖渗透蒸发膜分离乙醇—水

对壳聚糖/聚丙烯腈复合膜分别用戊二醛、硫酸、硫酸镍溶液进行了交联改性。交联后,分离选择性(α)大为提高。对戊二醛交联膜进行了乙醇水溶液的分离性能研究,结果表明,50℃、料液中合水率小于45%时,α大于670,渗透通量为100～700g/m^2·h。

红外光照壳聚糖渗透蒸发膜

本文以壳聚糖为膜材,采用红外光照法,研制了壳聚糖/聚丙烯腈复合膜(CS/PAN)和壳聚糖醋酸盐/聚丙烯腈复合膜(CSA/PAN),并用于乙醇水混合物的分离。结果表明,两膜均为优先透水,分离性能良好。在60℃料液含水率小于50%时,对CS/PAN膜,分离选择性(α)大于50;而对CSA/PAN膜,α大于200,两者的渗透通量(J)在100～600g/m^2·hr间。

甲壳质和甲壳胺寡聚糖的制备

本文详述了甲壳质和甲壳胺寡聚糖的3种制备方法(酸水解法、酶解法和酶糖转移法),以及寡聚糖的分析法、纯化法和酶活力测定法。

新型天然膜材料——甲壳质及其衍生物

甲壳质资源丰富,易化学修饰和成膜,是一种制备耐酸碱、耐热性能良好和具有极好生物相溶性膜的新型膜材料。本文详述了它在超滤、反渗透、渗透蒸发、透析膜、气体分离膜、离子交换膜、固定化酶膜及医学用膜的制备及应用。

酶膜反应器在生物工程中的应用

利用膜作为固定化酶载体的酶膜反应器,能有效地将酶固定,可实现产物的原位分离,消除位阻效应和抑制效应,且可连续操作,便于放大,已广泛应用于蛋白质、纤维素、淀粉等的酶解、污水处理等。本文介绍酶膜反应器的原理、三种常用的酶膜反应器类型(连续搅拌釜、中空纤维、含辅酶的)及其在生物工程中的应用。

膜固定化细胞反应器及其应用

膜固定化细胞反应器是一种新型的高效生物反应器,它能把很高密度的细胞进行均相固定化,使细胞免受剪切力损伤;同时能进行产物的原位分离,消除了抑制效应;固定化方法简便温和、易于放大;便于连续操作,反应器生产率很高,广泛用于微生物发酵、动植物细胞培养。本文介绍细胞的膜固定化法、膜固定化细胞反应器的类型及应用。

亲和超滤新技术及其在生物工程中的应用

一、引言基因工程和细胞工程技术的最新进展,促进了生物制品(如酶、抗体、抗原、受体)的迅速发展。这些制品通常是从发酵液中或天然产品中提取,并经纯化而得到的产品。提取液常含有悬浮物、高或低分子杂质,并且这些产品纯度很低,对温度、pH值、有机溶剂、蛋白酶以及其它生物污染物很敏感,易于降解。因此,很有必要开发高效的下游工程,进行产品的分离和纯化。生物工程中的下游工程,通常用过滤、离心法分离不溶物,用盐析等沉淀法进行浓缩,用离子交换,电泳和亲和层析技术对产品进行纯化。其中,亲和层析技术是选择性最高的纯化技术(一步可把纯度提高1000倍)。

生化制药中的膜分离技术

一、引言生物技术的进步,推动了生化药物生产的飞速发展。基因工程、细胞工程技术的应用为干扰素、胰岛素、尿激酶、生长激素等生化药物的生产开辟了广阔的前景。然而,生物技术所得产物浓度很低,并且通常存于多相体系中,只有通过一系列的分离、浓缩、纯化等下游工程才能得到。这些下游工程费用占整个产品成本的巨大部分,因此,生物技术的发展,无疑依赖于下游工程的研究开发。本文旨在综述膜过程的原理、特征及其在生化药物中的应用。

交联壳聚糖渗透蒸发膜分离乙醇—水

对壳聚糖/聚丙烯腈复合膜分别用戊二醛、硫酸、硫酸镍溶液进行了交联改性。交联后,分离选择性(α)大为提高。对戊二醛交联膜进行了乙醇水溶液的分离性能研究,结果表明,50°C、料液中合水率小于45％时,α大于670,渗透通量为100～700g/m^2·h。

新型天然膜材料——甲壳质及其衍生物

甲壳质资源丰富,易化学修饰和成膜,是一种制备耐酸碱、耐热性能良好和具有极好生物相溶性膜的新型膜材料。本文详述了它在超滤、反渗透、渗透蒸发、透析膜、气体分离膜、离子交换膜、固定化酶膜及医学用膜的制备及应用。

毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略

针对毕赤酵母(Pichia pastoris)在发酵过程中发生的染菌现象,按照质量控制要素及工艺流程进行全面分析。通过对工作种子库、一级种子、二级种子、滤芯、发酵罐及发酵菌体进行系统排查发现,染菌是由赛多利斯取样阀密封圈磨损及试验人员的不规范操作造成的。因而在试验操作、设备维护、车间管理、文件修订、人员培训等方面实施一系列纠正预防措施,随后进行多批次的发酵生产。结果表明,试验结果与历史数据具有高度的一致性,从而避免了染菌现象的再次发生。

THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法的建立

目的建立THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法。方法将HPV治疗性疫苗原液参考品及样品用含佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)的RPMI1640培养基稀释后,加入THP-1细胞,设PMA对照(只加PMA),37℃,5%CO2培养箱孵育,取上清,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量,测定样品体外相对效力。按上述方法对细胞密度(2.0×105、5.0×105、10.0×105个/ml)、PMA终浓度(2.8、8.3、25、75、225 ng/ml)和培养时间(2、3、4 d)进行优化,确定最佳检测条件。用HPV预防性疫苗原液及ELISPOT法验证该方法的有效性。结果优化的最佳检测条件为:细胞密度5.0×105个/ml,PMA终浓度25 ng/ml,培养时间3 d。验证结果表明该方法有效可行。结论建立了THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法,为检测治疗性疫苗的细胞免疫提供了一个体外检测平台。

表达HPV18晚期蛋白L1重组毕赤酵母在30L Sartorious生物反应器(C_(30)-3)中的培养与诱导工艺摸索及优化

采用改良后的低盐培养基在30 L Sartorious生物反应器(C30-3)对表达18型人乳头瘤病毒(Human papillom avirus,HPV)晚期蛋白L1重组毕赤酵母进行培养,探讨了在重组毕赤酵母细胞积累阶段和HPV18晚期蛋白L1诱导表达阶段不同的培养基配方、p H值、温度、搅拌转速、溶氧(DO)、重组毕赤酵母细胞积累阶段甘油的补加方式、去除阻碍物甘油的去阻碍时间、重组毕赤酵母表达HPV18晚期蛋白L1阶段诱导剂甲醇的补加方式等工艺参数对表达HPV18晚期蛋白L1重组毕赤酵母的影响。优化后的低盐培养基更适合重组毕赤酵母细胞的生长;重组毕赤酵母细胞积累阶段的培养过程中维持培养液p H值5.0,温度31℃,DO 20%~25%,搅拌转速500 r/min,培养到第20 h开始以恒速补加3 000 m L 40%甘油溶液,培养至重组毕赤酵母细胞湿重≥190 g/L,停止甘油补加,继续培养重组毕赤酵母4 h,消耗阻碍HPV18晚期蛋白L1表达的甘油;之后进入重组毕赤酵母表达HPV18晚期蛋白L1诱导阶段,维持培养液p H值5.2,温度29℃,DO含量45%,搅拌转速600 r/min,控制培养液中甲醇浓度为4%在线补加甲醇,诱导60 h,HPV18晚期蛋白L1的表达量达到了311.43 mg/L。利用30 L Sartorious生物反应器(C30-3)对表达HPV18L1重组毕赤酵母进行培养,经过多次试验建立起了稳定的重组毕赤酵母表达HPV18晚期蛋白L1工艺。