龙牙百合褐斑病病原的鉴定、生物学特性及室内药剂筛选

为明确龙牙百合褐斑病病原,采集龙牙百合褐斑病典型症状的叶片,进行病原物分离、纯化和致病性测定,结合病原菌形态学观察及其rDNA-ITS、gapdh、tef1、RPB2和Alt a1等基因的序列分析,确定引起龙牙百合褐斑病的病原菌为枝状链格孢Alternaria arborescens。采用菌丝生长速率法,测定了光照、温度、pH值、碳源、氮源和不同培养基等处理对该病原菌生长的影响,并测定了病原菌对7种杀菌剂的敏感性。结果表明,最适合菌丝生长的条件为温度25℃,pH值5.0,碳源为蔗糖,氮源为牛肉浸膏,培养基为马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基;菌落致死温度为50℃。在7种参试药剂中,木霉菌抑制作用最强,其半数效应浓度(EC_(50))和90%效应浓度(EC_(90))值最低,分别是8.758×10^(-5)和0.198 mg·L^(-1);噁唑菌酮代森锰锌的毒力最低,EC_(50)和EC_(90)值分别为13.713和816.937 mg·L^(-1)。本研究结果为龙牙百合褐斑病菌的精准防控提供了理论依据。

龙牙百合褐斑病菌梨黑斑链格孢生物学特性及室内药剂筛选

目的:明确龙牙百合褐斑病菌梨黑斑链格孢的生物学特性及其对不同杀菌剂的敏感性,为防治该病害提供理论依据。方法:采用菌丝生长速率法,探究龙牙百合褐斑病病原菌梨黑斑链格孢在不同培养环境及不同营养条件下的生物学特性;同时,选用8种常用的杀菌剂,测定对梨黑斑链格孢的抑制活性。结果:梨黑斑链格孢菌丝生长的合适条件为:温度25℃(菌株的致死温度为50℃),pH值为7,自然光光照,PDA培养基,碳源为可溶性淀粉,氮源为胰蛋白胨。供试的8种杀菌剂中,木霉菌对该病原菌的抑菌效果最好,EC_(50)为4.125×10^(-7)mg/L,12.5%烯唑醇的抑菌效果较差,EC_(50)为24.853 mg/L。结论:梨黑斑链格孢在较低温度下能生长,pH适应范围较广,不利于其生长的碳源和氮源分别为乳糖、硝酸钾;木霉菌、异菌脲等对该病原菌的毒力较高,可为龙牙百合褐斑病的田间防治试验提供参考。

双特异性抗体在复发难治多发性骨髓瘤中的治疗进展

近年来,针对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞上特异性表面抗原的单克隆抗体越来越多应用于治疗复发难治多发性骨髓瘤(relapsed/refractory multiple myeloma,R/RMM)。双特异性抗体(bispecific antibodies,BsAb)与肿瘤细胞抗原和T细胞上的CD3结合,激活T细胞并靶向杀伤肿瘤细胞,有针对B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)靶点和非BCMA靶点如GPRC5D和FcRH5的多种BsAb,显示各自的药代动力特点以及相关疗效和不良反应,多项临床试验研究已证实其在R/RMM患者中具有可喜的临床有效性和安全性。

6-姜酚诱导白血病细胞凋亡中细胞内活性氧及线粒体跨膜电位的改变

目的:研究细胞内活性氧(ROS)及线粒体跨膜电位(ΔΨm)在6-姜酚诱导慢性粒细胞白血病K562细胞、人急性T淋巴细胞白血病MOLT4细胞凋亡中的变化,探讨线粒体途径在白血病信号转导中的作用。方法:用不同浓度6-姜酚作用K562细胞和MOLT4细胞,以2,7-二氯荧光素(2,7-d ichloro fluoresce inc iactate,DCFH-DA)为细胞内活性氧探针,罗丹明-123为反映线粒体膜电位荧光探针,流式细胞仪检测ROS水平和线粒体膜电位的变化。结果:不同浓度6-姜酚作用K562细胞后,ROS水平显著高于对照组(P<0.01),ΔΨm显著低于对照组(P<0.01)。姜酚作用MOLT4细胞后,ROS显著高于对照组(P<0.05)。结论:6-姜酚能诱导白血病细胞株K562及MOLT4细胞ROS水平升高,降低细胞ΔΨm,通过线粒体途径介导白血病细胞凋亡。

尼古丁对人脐带间充质干细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨尼古丁对人脐带间充质干细胞(MSCs)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)、线粒体膜电位及细胞因子生成的影响。方法:尼古丁作用MSCs后,硝酸还原酶法测NO的释放情况;分光光度计法测NOS和iNOS活性;流式细胞技术测ROS及线粒体膜电位的变化;ELISA法测培养上清液中细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的变化。结果:在24 h和36 h,NO水平随尼古丁浓度上升而增加(P<0.05),但在48 h,0.8 g/L与1.0 g/L组,NO水平低于对照组;NOS和iNOS活性随尼古丁浓度上升而逐渐增加;尼古丁可增加MSCs的ROS水平,并降低线粒体膜电位;在尼古丁作用下,MSCs分泌SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF水平下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达均上升。结论:尼古丁通过增加NO、NOS、iNOS和ROS水平,降低线粒体膜电位,使SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF分泌下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达上升,可能影响MSCs的增殖、黏附、迁移等特性。

6-姜酚诱导K562细胞凋亡的差异蛋白表达

目的:建立白血病细胞的蛋白质二维凝胶电泳图谱,结合质谱技术鉴定,分析6-姜酚诱导K562细胞凋亡的差异表达蛋白。方法:6-姜酚作用K562细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,2D-DIGE提取细胞总蛋白,SDS凝胶扫描成像,用ImagineMaster2DPlatinum6.0软件分析差异蛋白质点,利用基质辅助激光解析即串联飞行时间质谱对候选表达差异蛋白作质谱鉴定和功能分类。结果:6-姜酚能显著抑制K562细胞增殖,其作用呈时间及剂量依赖性,24、48、72h的IC50值分别为22.86、15.75、11.18μg/mL。鉴定42个差异表达蛋白,发现35个非重复性差异,其中19个高表达,16个低表达。结论:用蛋白质组学方法筛查出与姜酚抗白血病相关的多种蛋白质,涉及氧化应激反应、细胞周期调节、细胞凋亡信号转导、蛋白质生物合成及糖代谢等。

血液恶性肿瘤患者生存质量研究

目的 通过分析 12 8例血液恶性肿瘤患者生存质量 (QOL) ,探讨QOL的影响因素。方法 自诊断存活 2年以上的 12 8例血液恶性肿瘤患者 ,其中 16例接受骨髓移植或外周血干细胞移植。采用填表或信函问询。结果 随存活时间延长 ,Karnofsky计分逐步上升 ,依次为淋巴瘤 >CML >AL >MM ,骨髓或外周血干细胞移植后 1年者>化疗后缓解期超过 2 .5年者 >移植后 1年以内者 >缓解期少于 2 .5年者。对中药或气功的总的肯定率达5 7 4%。结论 骨髓或外周血干细胞移植后 1年及化疗达缓解超过 2 .5年者生理机能明显改善 ,但普遍存在心理、社会问题 ;MM患者QOL较差 ;医疗费是主要的忧虑根源 ;有关干细胞移植的疑虑值得引起关注 ;

Rhodamine123介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响

目的 探讨Rhodamine12 3(Rh12 3)介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响。方法 以C5 7B/ 6小鼠为供鼠 ,BALB/c小鼠为受鼠 ,脾脏淋巴细胞混合培养 ,比较单纯Rh12 3、单纯激光照射、光动力学疗法对小鼠混合淋巴细胞增殖 (MTT法 )及骨髓粒单核巨噬细胞集落形成 (CFU -GM)的影响 (甲基纤维素培养基法 ) ;流式细胞仪检测混合淋巴细胞中CD3+ CD6 9+ 阳性率。结果 Rh12 3组及单纯激光组对细胞增殖无显著影响 ,光动力学组 2 0mW/cm2 以下剂量激光对细胞增殖无明显影响 ,30mW/cm2 以上明显抑制细胞增殖 ;30mW/cm2 以下剂量对CFU -GM集落无明显影响。光动力学疗法后细胞培养 2 4h ,CD3+ CD6 9+ 表达明显下降。结论 光动力学疗法在 30mW/cm2 激光照射时可抑制淋巴细胞增殖 ,降低早期活化T细胞表达 ,但不影响骨髓CFU

荧光原位杂交技术检测性染色体在异基因干细胞移植中的应用

目的 探讨性染色体双色间期荧光原位杂交 (FISH )技术在异性间异基因造血干细胞移植后植活标志、微小残留病灶 (MRD)监测的价值。方法 用间期FISH检测 10例白血病、2例地中海贫血患者异性间移植后不同时期性染色体荧光杂交信号 ,确定供体源的植入克隆或患者的残存克隆。结果 12例患者在移植后 2 2～ 3 5天 ,细胞遗传学及双色间期FISH分析均获植入证据。在移植后不同时间 ,当染色体分析 10 0 %XX或 10 0 %XY结果 ,同步的bcr/ablmRNA基因持续阴性时 ,FISH可显示不同比例的供者源性染色体。结论 双色FISH应用于异性间异基因造血干细胞移植后植活标志、MRD监测 ,操作简易快速 ,是细胞遗传学及分子学检查很好的补充。

导师指导下医学生科技创新能力的培养

介绍了导师指导下的医学生科技创新能力培养新方法，探讨了对医学本科生以技能训练为基础、以研究性实验为核心、以科技创新能力培养为目标的教学新模式？

急性早幼粒细胞白血病早期死亡21例临床分析

急性早幼粒细胞白血病早期死亡２１例临床分析曾慧兰陶瑞芳沈益民陈子兴李建勇陆廷伟薛永权夏学鸣８０年代中期以前，急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）因出血和弥漫性播散性血管内凝血（ＤＩＣ）所致的早期病死率高达３０％～４０％以上，自全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）用于诱...

白细胞介素-8及其受体与白血病关系研究进展

IL-8及IL-8R可在白血病细胞上结构性表达;其不同的表达情况反应白血病细胞的不同活化状态及白血病的不同病理过程;检测其水平可对临床疾病转归提供辅助依据;rh IL-8有可能成为新的理想的干细胞动员剂。

直接免疫荧光法分析白血病及骨髓增生异常综合征患者免疫表型

目的 :检测急性白血病 (AL)及骨髓增生异常综合征 (MDS)免疫表型及其临床意义。方法 :用流式细胞仪CD4 5设门直接免疫三标记法 ,检测 4 9例AL及MDS患者免疫表型。结果 :ALL双克隆型 9例 ,其中髓系伴T -ALL 3例 ,髓系伴B -ALL 4例 ,1例为髓系伴T、B标记 (CD13 +CD7+CD19+ ) ,1例同时CD7+CD19+ ;ALL同时表达CD3 4 及HLA -DR最高 (6 0 .0 1%) ,明显高于AML、MDS(P <0 .0 0 5 )。AML双克隆型 2 0例 ,7例为髓系伴CD7+ ,2例髓系伴CD19+ ,11例为同时表达CD3 4 +HLA -DR +。MDS患者骨髓细胞表达髓系成熟抗原CD13 +及CD3 3 +增高 ,未发现淋系抗原的表达。MDS -RAEB、RAEBT及转为白血病病例均高表达CD3 4 及HLA -DR抗原。结论 :用三标记法简便易行 ,提高诊断准确性 ;单抗组合应兼顾髓、淋系同时表达 ;应加胞浆抗原检测。

CD40配体-受体载体介导的CpG ODN靶向脐血B淋巴细胞的特异传递及其免疫效应(英文)

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值,但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍。目的:拟验证CpG寡核苷酸通过CD40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异靶向传递及其免疫效应的增强作用。设计、时间及地点:观察对比实验,于2004-04/2007-10在广州暨南大学附属第一医院血液科、儿科完成。材料:取健康新生儿的肝素抗凝新鲜脐血,事先征得父母知情同意并获医院伦理委员会审核批准。方法:制备CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸交联复合物,与脐血单个核细胞共培养。分别于24,48,72,96h应用流式细胞仪检测单个核细胞对FAM标记CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度;培养96h后用直接免疫荧光标记法标记CD19,CD20,CD22单抗,以流式细胞仪检测阳性表达率;细胞悬液加入96孔板,3组分别加入CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸、单纯CpG寡核苷酸及ddH2O,培养92h,以四甲基偶氮唑盐比色法测细胞增殖能力;以酶联免疫吸附法测以上3组细胞培养上清IgG水平。主要观察指标:单个核细胞对CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度,淋巴细胞亚群的表达,细胞增殖能力,培养上清IgG水平。结果:与单纯CpG寡核苷酸未交联组相比,单个核细胞对交联复合物摄取率更高(>98%),达摄取峰值时间更早。共培养后CD19+,CD22+,CD20+细胞表达升高,细胞增殖量及上清IgG水平均高于对照组(P<0.05)。结论:CD40配体-受体载体系统有助于CpG寡核苷酸特异高效的B细胞靶向投递,并增强其免疫效应。

罗丹明123介导的光动力学疗法预防急性移植物抗宿主病的实验研究

目的探讨Rh123介导的光动力学疗法(PDT)预防异基因造血干细胞移植急性移植物抗宿主病(aGVHD)的可行性及安全性。方法以C57B/6小鼠为供鼠,BALB/c小鼠为受鼠,建立小鼠异基因骨髓移植的aGVHD模型;混合脾脏淋巴细胞培养(MLC)加Rh123孵育,接受氩离子激光30mW/cm2照射3min,再与供者骨髓混合移植给受鼠,观察受鼠移植后造血重建、aGVHD发生情况及病理改变、生存率;流式细胞仪检测MLC细胞CD3+CD69+阳性率。结果光动力学治疗组的aGVHD发生减少,肝、皮肤、肠道病理程度减轻,生存率显著高于未经光动力学治疗组;光动力学处理后的混合淋巴细胞培养24h后,CD34+CD69+表达明显下降。结论Rh123介导的光动力学疗法可有效预防小鼠异基因骨髓移植的aGVHD。

18种观赏植物F3′5′H基因生物信息学分析

采用生物信息学方法对18种观赏植物类黄酮-3′5′-羟化酶基因(flavonoid-3′5′-hydroxylase,F3′5′H)的mRNA和氨基酸序列的理化性质、跨膜结构域、保守结构域、亚细胞定位、二级结构、三级结构和同源性进行预测与分析。结果表明,绝大多数观赏植物的F3′5′H为亲水性稳定蛋白质,以α螺旋为主、无信号肽的跨膜蛋白质;大多数定位于内质网膜上;其三级结构模型为5ylw.1.A铁锈醇合成酶,为单链蛋白,属于细胞色素P450基因家族;同源保守氨基酸序列为“LPPGP”“AGTDTS”和“PFGAGRRICAG”。

维甲酸诱导治疗急性早幼粒细胞白血病中细胞因子表达及其意义研究进展

介绍细胞因子在急性早幼粒细胞白血病的基础表达，全反式维甲酸对细胞因子分泌的调节，某些细胞因子的表达与高白细胞血症及维甲酸综合征发病机制中的关系以及细胞因子检测的临床意义。