脯氨酸对山羊精液低温保存的影响

为提高精液对精子的抗氧化保护能力,延长精子在体外的存活时间,在低温保存(4℃)条件下,向山羊精液基础稀释液中添加浓度为0、0.5、1、2、4 mM的脯氨酸,经保存24 h、48 h后,检测各处理组的精子活力、顶体完整率、质膜完整率,及48 h各组线粒体活性、活性氧水平、丙二醛、脂质过氧化物含量、抗氧化酶活性等精子质量评定指标。结果表明,在精液中添加一定浓度的脯氨酸可提高精子抗氧化能力,且添加最适浓度为1 mM。在1 mM处理组中,精子48 h总活力71.3%,比对照组显著提高18.57%(P<0.01),顶体完整率提高12%,质膜完整率提高10.5%,线粒体活性提高23.15%,抗氧化酶活性均显著提高(P<0.05),活性氧水平、丙二醛、脂质过氧化物含量均显著降低(P<0.05),并且脯氨酸脱氢酶活性显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白(Caspase-3、Caspas-9、P53和BCL-2)表达量显著降低(P<0.05)。因此,在4℃液态保存的山羊精液中,添加脯氨酸能够提高保存后的精液品质。这为脯氨酸作为一种可以有效提高山羊精液品质的抗氧化剂提供了新的思路。

蛋白质琥珀酰化修饰的研究进展

蛋白质琥珀酰化修饰是通过酰化反应将琥珀酰基添加到蛋白质赖氨酸残基上。琥珀酰化修饰会影响蛋白质的结构和功能,进而调节信号传导和细胞代谢等生命活动。文章综述了蛋白质琥珀酰化修饰的位点分布、供体来源、琥珀酰基转移酶以及去琥珀酰化酶多个基本特征,并讨论了琥珀酰化修饰在能量代谢、细胞增殖、雄性生殖和自噬等生命活动中的重要作用,目的在于为进一步发现更多琥珀酰化修饰相关的酶与底物、了解其与琥珀酰化修饰相关的生物学功能提供参考。

梅山二元杂种母猪繁殖性能的研究

梅山二元杂种母猪长梅和汉梅具有高繁殖特性，杂种优势明显。发情持续期为2-8天，性欲维持1-4天。第1至5胎发情配种，情期受胎率分别为91．2％、97．1％。100％、96．2％和95．5％。经产猪、窝平产仔数和产活仔数分别为15．6头和14．6头，初生窝重和40日龄断奶窝重分别为15．16kg和101．23kg，断奶育成仔猪12．8头，育成率87．7％。长梅和汉梅母猪乳头数分别为16．6和16．4个。妊娠期平均为112．9天。

二元杂种母猪繁殖性能的研究

本文研究１９头长梅杂种母猪（长白猪×梅山猪）和１８头汉梅杂种母猪（汉普夏猪 ×梅山猪）的繁殖性能。结果表明：长梅和汉梅母猪的发情征兆不及地方猪种 明显．长梅和汉梅母猪发情持续期为４天左右，性欲维持２天左右；初配和第二 胎发情配种，情期受胎率分别为９３．２％和９７．ｌ％；头胎和第二胎，窝平产仔数 分别为１１．９头和１４．３头，活产仔数分别为７．６头和１３．４头； ４０日龄断奶窝重分 别为５８．００ｋｇ和１０３．０２ｋｇ。梅山二元杂种母猪保持了梅山猪的高繁殖力特点．

成都麻羊发情排卵规律的研究

成都麻羊一年四季均可发情，但相对集中在８～１０月３个月。发情持续期平均为４２．４±２１．６小时。发情周期为２０．６±１４．２天，其中短周期、中周期和长周期分别占２８．６％、４８．９％和２２．５％。于发情开始后３５～４０小时开始排卵，排卵数平均为２．０个。

非编码RNA对哺乳动物精子发生过程的调控

精子发生始于精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs),SSCs一部分自我更新,另一部分首先分裂形成Asingle(As)型精原细胞,进而形成Aparied(Apr)型精原细胞和Aaligned(Aal)型精原细胞;随后,Aal型精原细胞再发育为A1-A4型精原细胞、中间型精原细胞以及B型精原细胞;B型精原细胞有丝分裂可形成初级精母细胞,经历前细线期、细线期、偶线期、粗线期,再经减数分裂形成次级精母细胞;当圆形精子细胞形成之后,则经细胞核浓缩等过程形成晚期的细长型成熟精子,随之最终变形成为精子。这一复杂的生理过程需要相关基因的适时表达,并受到转录和转录后水平的调控。研究表明,多种类型的非编码RNA(nc RNAs)在精子发生过程中发挥着重要作用。nc RNAs包括微小RNAs(mi RNAs)、与Piwi蛋白相互作用的RNAs(pi RNAs)、长链非编码RNAs(lnc RNAs)、环状RNAs(circ RNAs)以及内源性小干扰RNAs(endo-si RNAs)等。这些nc RNAs的表达具有细胞组织特异性和发育阶段特异性,可从时间和空间上精确调控精子发生的整个过程。mi RNAs是一类长约21—25 nt的内源性非编码单链RNA分子,广泛存在于各种生物中,其形成至少需要Drosha和Dicer等两种RNA酶的参与,可降解靶m RNA或抑制靶m RNA翻译,对SSCs干性的维持、自我更新和分化的调控以及生殖细胞减数分裂和精子发生过程具有重要的调控作用。此外,精子发生过程中,在生殖细胞不同阶段所表达的基因也可调控mi RNAs的生成加工过程。pi RNAs是2006年发现的一种新的小RNA,长度约24—32nt,其作用与Dicer酶无关,能够与生殖细胞特异性蛋白Piwi蛋白家族成员结合,进而行使生物学功能,其主要表现为:在表观遗传水平和转录后水平沉默转座子、反转座子等基因组移动遗传元件,维持生殖细胞自身基因组稳定性和完整性,调控生殖细胞增殖、减数分裂及精子发生过程。Lnc RNAs是一类长度大于200 nt的nc RNAs,其生成加工过程与m RNA类似,并且与m RNA有着相似的结构。不同来源的lnc RNAs可通过转录前与转录后多种机制进而调控SSCs的干性及分化,并且调控生殖细胞凋亡。有些lnc RNAs还可调控mi RNAs的表达,进而调控精子发生过程。circ RNAs是区别于传统线性RNA的一类新型RNA,在不同物种中具有保守性,在组织及不同发育阶段呈特异性表达。其生成加工方式与其序列相关,同一基因位点可通过选择性环化产生多种circ RNAs进而发挥功能。研究表明,circ RNAs可结合mi RNAs从而调控生精过程。相对于其他nc RNAs,endo-si RNAs的生成加工方式更为简单,并有着与mi RNAs相同的作用方式,在精子发生和雄性生殖中扮演着重要角色。文中结合最新的研究进展,综述了几种nc RNAs的生成及其在精子发生过程中的调控作用,旨在为精子发生过程中nc RNAs的进一步研究提供参考。

猪精液保存及精子代谢与表观遗传调控研究进展

猪精液保存在科学理论研究和经济生产实际中都具有重要的意义。文章就国内外有关猪精液保存、精子代谢、精子冷冻过程中的表观遗传调控等研究进展进行了综述,并对猪精液保存的前沿发展与研究方向进行了展望,以期为进一步提高猪精液保存的品质,发挥良种优势提供理论依据。

《细胞生物学》实验教学的改革与实践

本科生细胞生物学实验课存在教学内容陈旧、学时少、学生对实验准备参与度低、考核方法简单的不足,从调整实验教学内容和学时数、改进实验教学方法和优化考核方案等方面着手,对《细胞生物学》实验课进行改革。改革后的细胞生物学实验课程能更好地调动学生学习的积极性,提高学生的实践动手能力和创新力,满足新时代高等教育人才培养及“双一流”学科建设的需要。

环境温度与公猪繁殖力

温度是影响种公猪繁殖性能的重要因素。温度过高和过低都会导致种公猪精液品质下降、性欲下降,配种母猪妊娠率、产仔率和仔猪成活率下降等。因而为种公猪提供适宜的环境温度,避免热应激或冷应激是保证种公猪身体健康和繁殖力的重要举措。文章结合温度影响种公猪繁殖力的机理,阐述了环境温度与种公猪繁殖力的关系以及在种公猪饲养管理过程中为保持适宜的温度应该采取的措施。为种公猪站建设过程中选择合适的温度参数以及种公猪饲养管理提供参考。

黑熊染色体组型分析

用微量全血培养方法研究了黑熊染色体的形态和数目，并对其染色体组型进行了初步分析。研究结果表明，正常黑熊核型为：♂［♀］２ｎ＝７４１０（Ｍ）＋８（ＳＭ）＋５４（Ｔ）ＸＹ（ＴＴ）［ＸＸ（ＴＴ）］。Ｘ染色体较大，间于２０号与２１号染色体之间，Ｙ染色体较小。

农林高校《细胞生物学》课程教学改革与探索

为落实立德树人的根本任务,实现全员、全程、全方位"三全育人"的要求,着力提升农林高校生命科学领域学生的专业背景及人文素养,文章根据《细胞生物学》课程当前的教学特点、存在问题与发展的前沿性,在《细胞生物学》课程教学上增加预习导读讲义与小组式反馈、在讲解过程中融入人文思想教育与创新思维,同时配备实验配套指导,取得了较好的教学效果。本文总结了在教学中的改革探索经验,以期为生命科学领域学科的教学发展提供借鉴。

高校创新培养新模式探索——文献阅读模式改革

随着我国高校学生培养水平的整体提高及对学生学习、掌握理论与技能要求的进一步提高,对其培养模式的新探索也随之展开。本文针对高校本科生与研究生在文献阅读中普遍存在的“不会找,不会读,读不懂”三大难题,借助例会等形式进行文献阅读改革的探索,对所阅读文献的内容,质量,侧重点等进行具体规划,并辅以凝练总结加以强化。团队多年来在教学模式中的探索与实践表明,通过5个部分对文献讲读因材施教,学生理论水平提升效果明显,对科研思维的培养也有较高的指导意义,为其学习专业领域知识及科研领域探索奠定更稳固的基础。本文结合团队多年来教学培养新模式中的探索经验,提出几点措施与建议,供大家参考。

猪Utx慢病毒过表达/干扰载体的构建和病毒包装

UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。

精子发生中miRNAs调控功能研究进展

源源不断的精子发生过程是雄性繁殖机能的基础。精原干细胞（SSCs）持续不断地自我更新和分化又是精子发生的基础。精子发生起始于精原干细胞的分化，历经漫长的减数分裂后形成单倍体圆形精细胞。后者经过变态发育过程，最终形成精子并释放到曲细精管管腔中。研究表明，成千上万的基因参与了精子发生过程，然而如何实现对这些基因精确有效的调控还有待研究。

畜牧专业细胞生物学教学改革的探索与实践

细胞生物学是支撑现代畜牧学科发展的基础课程之一,但是目前农林院校畜牧专业的细胞生物学教学仍停留在简单模仿综合院校"三生"专业或医学专业的层面上,很难满足培养优秀畜牧人才的需要。为探索适合畜牧专业的细胞生物学教学方法,该文针对教学内容、教学方法和考核方式等方面的改革进行了一些探索和尝试。

长链非编码RNA AK005183干扰载体构建及慢病毒包装

为研究长链非编码RNA AK005183在精子发生中的功能,设计、合成了干扰AK005183表达的shRNA序列,并构建其干扰表达重组慢病毒载体CD513B-U6-AK005183,将干扰表达质粒及对照质粒分别转染NIH3T3细胞系,实时定量PCR检测CD513B-U6-AK005183质粒对AK005183的表达具有较好的干扰效果。利用第三代慢病毒包装系统,将CD513B-U6-AK005183、pGag-Pol、pRsv-rev、pVSV-G质粒共转染293T细胞系,包装得到滴度为5×106 TU/mL的干扰表达重组慢病毒。用CD513B-U6-AK005183慢病毒转导GC-1spg细胞系,检测到AK005183的表达下调64%。表明本研究成功构建并包装得到高效干扰长链非编码RNA AK005183表达的重组慢病毒,将为深入研究长链非编码RNA在精子发生过程中的功能奠定了基础。

家畜精子能量代谢研究进展

家畜精子的运动、获能和受精均需要大量能量,精子可利用内源性或外源底物,如葡萄糖、果糖、丙酮酸、乳酸等,借助糖酵解和氧化磷酸化途径产生能量。不同种类家畜精子能量代谢的主要途径存在差异,精子能够依据其微环境重编程代谢途径。同时,精子能量代谢受到多种因素的精密调控。糖酵解中间产物2-氧醛(如乙二醛和甲基乙二醛)和氧化磷酸化途径产生的活性氧(ROS)都可能影响精子功能。本文主要围绕精子的能量代谢途径、代谢特征及调控进行阐述,以期为优化精子稀释液配方和体外受精技术提供理论依据。

光照条件对种公猪繁殖性能的影响

种公猪繁殖性能对于猪场母猪受胎率、产仔率及仔猪成活率等都有非常关键的影响。研究发现,光照是影响种公猪繁殖性能的重要因素之一,实际养猪生产中,合适的光照时间及光照强度对公猪繁殖性能的发挥有相当大的影响。该文就光照影响公猪繁殖性能的影响及作用机理进行综合论述,为规模化养殖场种公猪养殖制定最适的光照制度和福利化猪舍光照设计提供依据。

二元杂种母猪发情排卵规律的研究

选留二元杂种母猪,生产三元杂种商品肉猪是目前我国广大农村提高肉猪质量再上新台阶的必由之路。中国地方猪种的最大特点之一是产仔数多。发情表现明显,容易掌握配种适期。经与瘦肉型种公猪杂交产生的二元杂种母猪,其发情规律和外观征状均发生了较大变化。'二元杂种母猪配种难'成了农户大量选留二元杂种母猪的一大障碍。本试验旨在研究二元杂种母猪的发情排卵规律和配种适期,为二元杂种母猪的选留和提高其繁殖率提供科学依据。

猪精液常温保存抗氧化剂研究进展

猪的人工授精技术被广泛用于我国生猪养殖业。用于人工授精的公猪精液质量直接关系到人工授精后母猪的受胎率和产仔数。猪精子质膜中胆固醇/磷脂比值低致使其对冷应激十分敏感,这决定了常温保存(16~18℃)成为目前最常用的猪精液保存方法。猪精液常温保存过程会累积活性氧自由基,而猪精子质膜中多不饱和脂肪酸比例高,使精子极易受到氧化应激伤害。稀释液中添加抗氧化剂有助于维持精子质量的各项指标。抗氧化剂主要包括超氧化物歧化酶等酶类抗氧化剂和还原型谷胱甘肽等非酶类抗氧化剂。本文综述了猪精子的生物学特征和常温保存过程中猪精液累积活性氧的原因,并总结了猪精液常温保存中抗氧化剂的研究进展,旨在为猪精液的保存及人工授精提供参考。