FSGS小鼠模型中YAP与足细胞凋亡的相关性及其激动剂的保护作用

目的探究YAP与局灶节段性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)中足细胞凋亡的相关性及其激动剂的作用。方法收取复旦大学基础医学院病理学系肾病研究组人FSGS肾穿标本,使用阿霉素刺激构建FSGS小鼠模型和体外足细胞损伤模型,并联合YAP激动剂1-油酰基溶血磷脂酸(1-Oleoyl lysophosphatidic acid,LPA)处理上述体内外模型,使用免疫组化、免疫荧光双染、Western blot及Hoechst 33258染色检测足细胞凋亡和足细胞中YAP表达的相关性;使用LPA处理转染YAP siRNA的足细胞系后,检测足细胞中YAP表达和凋亡的变化。结果在人FSGS、FSGS小鼠模型和体外阿霉素诱导足细胞损伤模型中足细胞凋亡越多,YAP出核越多;LPA处理可以改善FSGS小鼠模型的肾脏形态(t=17.68,P<0.0001)和肾功能(血尿素氮:t=4.576,P=0.0102;尿白蛋白/肌酐:t=2.51,P=0.0456),减少足细胞中p-YAP(S127)的表达,促进YAP入核,减少阿霉素诱导的足细胞凋亡(Cleaved Caspase-3的表达及Hoechst 33258染色结果均为P<0.001);敲减足细胞中YAP后,YAP的总蛋白和磷酸化水平均降低,足细胞凋亡增加,LPA处理减少了p-YAP(S127)的表达,促进YAP入核,减少YAP敲减所致的足细胞凋亡(Cleaved Caspase-3的表达及Hoechst 33258染色结果均为P<0.0001)。结论FSGS模型中活化YAP减少及YAP出核,足细胞凋亡增多;LPA能够通过抑制YAP在Ser127位点的磷酸化,促进足细胞中YAP的入核,减少细胞凋亡,延缓FSGS的疾病进程。