树立品牌意识 强化高校实验室文化建设

实验室文化是实验室个性化的根本体现,是实验室发展的灵魂。强化实验室文化建设,树立品牌意识对于促进实验室发展和提升其在国内外的学术地位、社会影响具有重要的意义。文章结合工作实践,从以下四个方面进行探索:秉承科学严谨、实事求是的科研精神是树立品牌意识的根本;发扬实验室"传帮带"的传统是树立品牌意识的途径;完善实验室管理制度是树立品牌意识的保障;营造以人为本、自主发展的环境是树立品牌意识的关键。

微小RNA-488靶向6-磷酸果糖激酶-2／果糖双磷酸酶-2同工酶3基因对前列腺癌细胞增殖与糖酵解的影响

目的 探讨微小RNA（miRNA，miR）-488对前列腺癌细胞株增殖及糖酵解能力的影响及其机制。 方法 实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测miR-488在前列腺癌细胞株的表达。生物信息学、双荧光素酶实验验证miR-488的靶点，转染miR-488模拟物24 h后，以25 μg蛋白行Western blot、Real-time PCR检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3（PFKFB3）的表达。转染miR-488模拟物或同时转染过表达PFKFB3质粒24 h后，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测PC-3、DU145细胞增殖，通过糖摄取及乳酸分泌实验检测糖酵解能力。结果 与正常前列腺上皮细胞RWPE-1比较，miR-488在PC-3、DU145细胞中的表达水平分别为0.26±0.03（P＝0.031）、0.19±0.04（P＝0.021），而在22RV1、LNCaP细胞中的表达差异无统计学意义。上调miR-488表达后，PC-3、DU145细胞的糖摄取率分别为对照组的0.54±0.03（P＝0.042）、0.52±0.01（P＝0.032），乳酸分泌率分别为对照组的0.55±0.02（P＝0.037）、0.61±0.17（P＝0.048），提示糖酵解能力明显下降，细胞增殖能力明显降低。生物信息学及双荧光素酶实验均表明PFKFB3是miR-488的靶点，上调miR-488表达后，PFKFB3 mRNA及蛋白表达均明显降低。同时上调miR-488与PFKFB3表达后，细胞的糖摄取分别为0.79±0.12、0.82±0.11，乳酸分泌分别为对照组的0.77±0.07（P＝0.015）、0.83±0.04（P＝0.026），提示糖酵解能力升高。此外，细胞增殖能力也明显升高。结论 miR-488可通过下调靶蛋白PFKFB3的表达，从而调控前列腺癌细胞的增殖与糖酵解。

microRNA调控网络与肿瘤

microRNA(miRNA)是一类长度约为22nt的小分子非编码RNA,对基因表达进行转录后调控。基因调控网络由各种回路,如前馈和反馈回路组成。它通过将外界刺激整合成合适的输出信号,控制细胞从增殖到死亡几乎所有的生命活动。已知基因调控网络的失调与肿瘤的发生发展密切相关。新近的实验证据表明,miRNA广泛参与基因调控网络中的反馈和前馈回路。该文主要介绍miRNA在基因表达调控网络中的作用及其与肿瘤发生发展的关系。

6-磷酸果糖激酶-2／果糖双磷酸酶-2同工酶3基因对前列腺癌细胞增殖的影响

目的观察6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3（PFKFB3）在前列腺癌组织中的表达及其对PC3和DU145前列腺癌细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色（抗体浓度1∶50）方法，观察PFKFB3基因在前列腺癌组织及癌旁组织中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR，40个循环，188 bp）、Western blot法[30 μl，10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）]检测PFKFB3 mRNA和蛋白在前列腺癌细胞及前列腺上皮细胞中的表达。采用平板克隆形成实验（40 μmol/L H2O2）与细胞生长实验[20 μl噻唑蓝（MTT）]对比观察敲除PFKFB3基因前后前列腺癌细胞的生长。结果PFKFB3基因在前列腺癌组织中的表达（2.42±0.16）明显高于癌旁组织（1.38±0.10），差异有统计学意义（P＝0.031）；前列腺癌细胞中PFKFB3 mRNA和蛋白表达水平均高于前列腺上皮细胞，分别为2.0～2.6倍和2.5～4.5倍（P＝0.015）；敲除PFKFB3基因后，平板克隆形成实验结果显示细胞克隆形成率为敲除前的22%～35%（P＝0.018），细胞生长实验结果显示前列腺癌细胞的增殖在第4天受抑制，为对照组的28%～30%（P＝0.026）。结论PFKFB3基因在前列腺癌细胞和组织中高表达，PFKFB3基因对前列腺癌细胞的增殖有一定的促进作用。

PAK6在前列腺癌中的表达及临床意义

目的:比较P21活化激酶6(PAK6)在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达和探讨PAK6表达在前列腺癌临床分期的意义。方法:采用免疫组织化学染色方法,检测42例前列腺癌及46例前列腺增生石蜡包埋组织中PAK6的表达。结果:PAK6在前列腺增生组织和前列腺癌组织中均有阳性表达,前列腺癌组织中PAK6阳性表达及表达强度均明显高于前列腺增生组织,有显著性差异。42例前列腺癌中临床分期Ⅲ-Ⅳ期的患者共20例,Ⅰ-Ⅱ期的患者22例,两者的PAK6蛋白表达率无明显差异,但临床分期Ⅲ-Ⅳ期的PAK6表达强度明显高于临床Ⅰ-Ⅱ期患者,有显著性差异。结论:PAK6蛋白在前列腺癌中有明显的表达,与前列腺癌的局部侵袭和远处转移相关,对肿瘤的临床分期与预后有一定的预测作用。