椰毒假单胞菌酵米面亚种灭活条件研究

目的:降低湿米粉中椰毒假单胞菌酵米面亚种污染风险,防止湿米粉米酵菌酸中毒事件发生。方法:采用加热和紫外的方法对椰毒假单胞菌酵米面亚种的灭活条件进行研究。结果:加热和紫外均可以杀灭椰毒假单胞菌酵米面亚种。结论:湿米粉企业可以使用加热或紫外的方法来防止产品被椰毒假单胞菌酵米面亚种污染。

基于LTQ-Orbitrap液相色谱-质谱联用技术的乳源乳清蛋白组分的差异性研究

利用LTQ Orbitrap XL组合型傅立叶变换高分辨质谱系统分析了乳源蛋白主要组分肽指纹图谱。对南方水牛乳与不同来源的乳清蛋白的氨基酸序列研究结果表明,乳清蛋白经酶解后主要为α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)组分,乳清蛋白肽质指纹谱的分析显示水牛乳与荷斯坦奶乳清蛋白α-La氨基酸发生变异的比率明显少于山羊奶乳清蛋白α-La,说明荷斯坦奶α-La和水牛乳α-La的差异更小,同源性更强;而水牛乳β-Lg与荷斯坦乳β-Lg氨基酸发生变异的部位比率要多于山羊奶,水牛乳β-Lg与山羊奶同源性更强;乳源酪蛋白酶解后的肽段主要组分为αs1-CN,β-CN,κ-N,通过对水牛乳酪蛋白的氨基酸序列的差异性分析,不同品种的乳源酪蛋白的氨基酸序列明显存在差异。与乳清蛋白相比,奶牛品种差异导致乳蛋白发生氨基酸差异现象更显著,酪蛋白的氨基酸序列对比表明,水牛奶酪蛋白与山羊奶酪蛋白比与乳牛酪蛋白的差异更大。

南方水牛奶酪蛋白及大豆蛋白肽指纹图谱的差异性

通过LTQ Orbitrap XL组合型傅里叶变换高分辨质谱与反相高效液相色谱技术联用建立了南方水牛奶酪蛋白和大豆蛋白主要组分肽质指纹图谱，并对其氨基酸组成与序列进行了比较．结果表明：酪蛋白经胰蛋白酶酶解后得到的28个肽段中没有检测到与酶解大豆分离蛋白181个肽段相匹配的肽段；酪蛋白（CN）的主要组分是仅αs1-CN、β-CN、κ-CN，大豆蛋白的主要组分为大豆球蛋白（包括大豆球蛋白Gl～G5亚基）和／3伴大豆球蛋白（α，α′，β 链）；水牛奶酪蛋白和大豆蛋白在亚基组分的氨基酸数量、组成比例和排列方式均呈现出明显的差异，大豆蛋白的各组分亚基的氨基酸全序列均大于酪蛋白各组分的氨基酸全序列，且大豆蛋白各组分的分子质量均显著高于酪蛋白各组分．LTQOr-bitrap XL质谱技术对乳源蛋白肽质指纹的分析，为今后鉴定分析牛奶蛋白中是否添加廉价蛋白提供了高精度和高准确度的检测方法，也为复杂混合物中的痕量组分检测提供了理论依据．

L-苹果酸对大鼠转运蛋白及抗氧化酶基因表达的影响

对12月龄SD大鼠给予L-苹果酸30d后,采用含有SYBR Green I的Real Time RT-PCR法,对肝脏和心脏线粒体苹果酸天冬氨酸穿梭中的两种转运蛋白(天冬氨酸谷氨酸转运蛋白(AGC)与α-酮戊二酸苹果酸转运蛋白(OMC))以及两种抗氧化酶(过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px))的基因表达进行检测,以研究L-苹果酸增强线粒体抗氧化作用的分子生物学机制。结果表明:苹果酸组中大鼠心肌细胞AGC、OMC、CAT、GSH-Px的mRNA表达量分别是空白对照组的1.25、1.39、1.12、1.01倍。苹果酸组中大鼠肝脏细胞AGC、OMC、CAT、GSH-Px的mRNA表达量分别是空白对照组的1.33、1.02、1.25、0.94倍。由此推测,L-苹果酸可能通过促进苹果酸天冬氨酸穿梭蛋白以及抗氧化酶的基因表达,实现提高线粒体的抗氧化作用。

81株铜绿假单胞菌16S rRNA基因序列测定及系统发育学分析

采用16SrRNA基因序列分析法对2015年7-9月广东省食品检验所桶装水专项抽检中筛查所得的81株铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）进行复核鉴定。菌株经纯化培养后提取总DNA,采用细菌16SrRNA通用引物进行16SrRNA基因序列扩增,PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳后,进行序列测定,序列经人工校对后用Clustal X进行比对分析,最后用MEGA5.1软件构建系统发育树。系统发育分析结果 表明：81株铜绿假单胞菌与原鉴定结果一致。其中,编号24-3-QY、100-5-JM、106-3-JM菌株形成一个分支,28-1-WD单独为一支,其余77株野生菌和铜绿假单胞菌标准菌株ATCC27853聚为一群。该研究是2015年5月24日中国开始实施GB 19298—2014《食品安全国家标准包装饮用水》以来,广东省首次对水源性铜绿假单胞菌进行的研究,为下一步菌种污染朔源等研究提供依据。

CE和HPLC测定水源水体中微囊藻毒素方法比较

利用毛细管电泳（capillary electrophoresis,CE）仪结合紫外-可见光二极管阵列检测器检测技术建立水体中痕量微囊藻毒素的检测新方法。通过与GB/T 20466—2006《水中微囊藻毒素的测定》高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）方法对比分析,进行2种检测技术的评价。CE检测条件为：毛细管柱（60 cm×75μm i.d.）,有效长度为44 cm,分离缓冲溶液为12 mmol/L硼酸盐（p H 9.0）,分离电压25 kV,检测波长238 nm,压力6 895 Pa流体动力学进样;优化后的HPLC检测条件为：C18色谱柱（250 mm×4.6 mm i.d.,5μm）,甲醇-磷酸盐缓冲溶液（60∶40,V/V）为流动相,检测波长238 nm,柱温度35℃,流速1 m L/min。结果表明：CE对3种微囊藻毒素MC-RR、MC-LR和MC-YR的检出限分别是0.16、0.20μg/m L和0.24μg/m L,HPLC对3种微囊藻毒素的检出限分别为0.020、0.079μg/m L和0.052μg/m L,这2个方法的灵敏度相差1个数量级;加标回收率分别92.5%-106.0%和99.6%-102.5%,CE对应的保留时间和峰面积的精密度相对标准偏差为0.53%-0.64%和2.67%-3.29%;HPLC法的保留时间和峰面积精密度相对标准偏差为0.16%-0.53%和0.80%-1.53%。检测同一水样中微囊藻毒素含量,CE检测结果和HPLC结果之间差异不显著（P〉0.05）。

2015年广东省桶装饮用水中铜绿假单胞菌的污染调查和药敏性分析

目的对广东省桶装饮用水中铜绿假单胞菌污染情况进行监测分析,构建广东省水源性铜绿假单胞菌种质资源库及药敏风险评估数据库。方法根据GB 19298-2014《食品安全国家标准包装饮用水》,对广东省20个城市进行桶装水中铜绿假单胞菌的专项污染调查,并采用Kirby-Bauer纸片扩散法对81株分离株进行药敏实验。结果 758份样品中共81份样品检出铜绿假单胞菌,铜绿假单胞菌总检出率为10.7%,81份阳性样品中有51份样品铜绿假单胞菌的污染水平在1~100 CFU/250 m L;81株分离株对四环素(tetracycline,TE)、米诺环素(minocycline,MH)、磺胺甲基异恶唑/甲氧苄氨嘧啶(sulphamethoxazole with trimethoprim,SXT)的耐药率分别为18.5%、60.5%、91.4%,对另外13种抗生素的敏感性几乎100%。81株分离株中多重耐药菌株18株。结论本研究初步构建了广东地域性铜绿假单胞菌种质资源库及水源性铜绿假单胞菌药敏风险评估数据库,从中发现本次污染调查的水源性铜绿假单胞菌污染率为10.7%,且对四环素类和磺胺类抗生素具有较强抗性,建议相关监管部门进一步增强桶装饮用水食品安全监管。

GB 19298-2014在广东省2015年～2017年桶装饮用水专项监测中的应用研究

本文系统分析了GB 19298-2014中标签标识指标、理化指标、微生物指标在2015年～2017年广东省桶装饮用水专项监测的应用研究。2015年～2017年广东省桶装饮用水专项监测不合格率为17.8%,铜绿假单胞菌不合格项目数占总体不合格项目数的76.1%。铜绿假单胞菌是影响桶装饮用水食品安全最突出的问题。GB 19298-2014对桶装饮用水食品安全监管具有重要指导意义。

广州市售熟食、凉拌菜中沙门氏菌污染风险和耐药性、毒力性研究

研究旨在评估广州市售熟食和凉拌菜中沙门氏菌的污染风险及耐药和毒力情况。选取2020年5~7月广州市大型超市、农贸市场、小餐饮店、小摊贩共20处地点,采集熟食和凉拌菜共计272份,依据GB 4789.4-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行沙门氏菌检验,开展血清分型,采用微生物全自动化鉴定及耐药性分析仪VITEK检测耐药性,采用PCR检测毒力基因。结果显示,271份样品中沙门氏菌检出率为3.3%(9/271),其中熟食类检出率为4.0%(8/199),凉拌菜检出率为1.4%(1/72)。在各场所中,小餐饮店检出率为10.6%(7/66),农贸市场检出率为2.2%(2/89),大型超市检出率为0%(0/96),小摊贩检出率为0%(0/20)。9株沙门氏菌血清型鉴定结果为S.Derby德尔卑血清型(4株)、S.Nchanga恩昌家血清型(4株)、S.Rissen里森血清型(1株)。20种抗生素耐药性分析显示9株沙门氏菌耐药谱为二代头孢类和氨基糖苷类抗生素。12种毒力基因检测研究发现来自小餐饮店手撕鸡样品检出的沙门氏菌携带9种毒力因子。广州市售熟食和凉拌菜中沙门氏菌检出率处在范围内,但风险仍值得进一步关注,尤其是小餐饮店的食品安全情况,研究检出带有质粒毒力基因及存在多重耐药的沙门氏菌,熟食类沙门氏菌风险需要高度重视。

植物类过敏原多重核酸检测技术研究进展

本文针对植物类过敏食品安全问题,综述了麸质类、花生类、大豆类和坚果类等4类植物过敏原成分核酸检测技术研究情况,并介绍了多重PCR技术、基因芯片技术、宏基因测序技术的应用,以期为植物类食品过敏原检测技术开发及食品安全风险防控提供参考。

唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的研究进展

文章对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)命名历程、生物学特性、污染食品中毒作用机理、消毒和去毒及预防中毒措施等方面内容进行了综述,并展望了未来研究的方向。

2017年广州市餐饮食品中金黄色葡萄球菌的调查分析

目的了解餐饮食品中金黄色葡萄球菌的污染状况及分布,确定高危食品的种类,为预防金黄色葡萄球菌引起的食物中毒提供依据。方法按照GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》对广州市5类500批次餐饮食品进行检验,并经VITEK 2鉴定。结果 500批次餐饮食品中检出金黄色葡萄球菌9株,检出率为1.80%,其中熟肉制品和凉拌菜、寿司食品检出率分别为3.33%和3.00%。结论广州市餐饮食品整体情况良好,但存在着一定的风险安全隐患,需加强对易受金黄色葡萄球菌污染的熟肉制品和凉拌菜、寿司等重点品种的监管。

巧克力中沙门氏菌检测能力验证结果与分析

目的通过参加中国食品药品检定研究院组织的NIFDC-PT-135巧克力中沙门氏菌检验能力验证活动,提高实验室沙门氏菌的检测能力,增强实验室的竞争力。方法按照GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》进行沙门氏菌的分离与血清学鉴定,辅以VIDAS30全自动酶联免疫分析系统进行快速初筛,并以VITEK 2 Compact自动微生物快速检测分析系统对分离出的可疑菌落进行生化鉴定。结果样品编号为0148的检出鼠伤寒沙门氏菌, 0546的检出肠沙门菌双相亚利桑那亚种(沙门氏菌Ⅲb),0676未检出沙门氏菌。结论本次实验发现的肠沙门菌双相亚利桑那亚种在沙门氏菌属显色平板上出现蓝色菌落,与以往判定的紫红色菌落有差异,在检测中应当引起关注。

广东省植物源性饮料掺假情况摸底调查

目的对广东省植物源性饮料中掺假情况进行调查,为监管部门提供决策依据。方法利用食品补充检验方法"植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定(BJS 201707)",对广东省植物源性饮料掺假情况进行摸底调查。结果 20批次样品中,共发现7批次样品标识的植物源性成分未检出,未检出率为35%,并且都是标识的核桃源性成分未检出。结论植物源性饮料掺假情况较为突出,食品安全监管部门应加大监管力度。

实时荧光PCR法与环介导等温扩增法检测食品中动物源性成分的比较

目的比较实时荧光PCR(real-time PCR)法及环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测食品中动物源性成分,为食品安全监管部门动物源性成分鉴定提供准确、高效的检测方法。方法采用实时荧光PCR法及LAMP法分别对市售肉及其制品进行牛、猪和鸡源性成分鉴定,并与标签明示的肉源成分比对,以准确性和时效性2个指标对上述2个方法进行评价。结果 Real-time PCR法检出4份样品与标签明示肉源不符,LAMP法检出5份样品与标签明示肉源不符,而16份样品中仅有1份样品2种方法检测结果不同。Real-time PCR法检测用时1.5 h,提取检测用DNA用时1.5 h,总用时3 h;而LAMP法检测用时45 min,提取检测用DNA用时20 min,总用时65 min。结论 LAMP法与Real-time PCR均具有较好的特异性、准确性,但LAMP法耗时短、成本低、操作简单,便于现场快速监督抽检。

沙门氏菌检验及鉴定方法研究进展

沙门氏菌在一个多世纪以来被认为是引起人类和动物疾病的主要食源性病原体,因此也导致了高昂的医疗和经济成本。努力开发有效和可靠的沙门氏菌检测方法至关重要。本文主要对目前用于沙门氏菌检测的技术和方法进行了综述,根据检测原理的不同分为常规培养方法、基于免疫学测定的方法、基于核酸测定的方法和生物传感器。传统常规培养法虽然在沙门的鉴定方面的准确性和特异性有不可否认的优势,但是也具有一定的缺陷,比如耗时长等。新兴的分子生物学快速检测及鉴定等方法能够快速、准确的对沙门氏菌进行鉴定,但可能对设备、技术人员、环境要求较高。随着生物学、化学、物理等学科的快速发展,应寻求多学科结合、取长补短,使准确、快速、灵敏检测食品中沙门氏菌成为现实。

食品中大肠菌群计数实验室内部比对研究

目的监控实验室检测质量和校准结果,对发现的问题及时采取措施,以保证实验室的良好检测水平。方法通过采用GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》、SN/T 4547-2017《商品化试剂盒检测方法大肠菌群和大肠杆菌方法一》2种检测方法,对同一质控样品进行检测,对2名实验人员的实验结果进行分析和能力评定。结果 2名检验人员检验结果具有再现性, 2种方法的结果也具有一致性。结论组织比对活动,不断对实验中出现的问题进行改进和总结,积累经验,可以稳固和进一步提升个人与实验室的能力。2种检测方法均可对于检测大肠菌群的检测,在实验中体现了大肠菌群测试片法在操作上和时间上有较大优势。

三文鱼水产品掺假情况调查

目的调查广东省市售三文鱼水产品掺假情况。方法应用实时荧光PCR技术检测大西洋鲑鱼和虹鳟鱼的方法,对广东省内批发市场、超市、餐饮寿司店和网络平台等场所的三文鱼掺假情况进行调查。结果98批次样品中,有6批次未检出大西洋鲑鱼,未检出率为6.12%。通过PCR测序结果鉴定,这6批次未检出大西洋鲑鱼的样品中,4批次为虹鳟鱼,1批次为王鲑,1批次为银鲑。结论三文鱼水产品掺假情况较少,但掺假风险仍然存在,建议监管部门加强监管。

2016～2018年广东省膨化食品微生物污染状况分析

目的了解广东省膨化食品受卫生指标菌(菌落总数、大肠菌群)污染状况,为防控食源性疾病提供依据。方法按照GB 4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》、GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中的方法对广东省2016~2018年共1672批次膨化食品进行检验。结果 2016~2018年监督抽检中,膨化食品卫生指标菌不合格率分别为2.29%(2016年)、4.08%(2017年)、6.31%(2018年),其中不合格样品生产单位所在地市不合格率最高连续3年均为潮州市。结论 2016~2018年广东省膨化食品受微生物污染的程度有逐年加重的趋势,尤其潮州市的生产企业,监管部门应强化膨化食品安全监督力度,督促落实企业主体责任,确保食品卫生安全。

食品中沙门氏菌快速检测技术方法对比结果分析

目的比较VITEK2COMPACT、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrixassistedlaser desorption ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)、实时荧光PCR法(real-time PCR)、环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)4类方法,分析其对沙门氏菌的快速检测效果。方法挑取12株阳性野生菌株复苏,配以1株标准菌株作为对照,分别用VIKEK2COMPACT、MALDI-TOF-MS、Real-timePCR、LAMP四类方法对其进行检测,并比较4类方法的结果差异。结果 Real-time PCR与LAMP单对通用引物能鉴定到属水平,此外, LAMP测定沙门氏菌时会有假阴性的情况出现;VITEK2生化鉴定能将少数沙门菌株鉴定到种的水平;质谱方法能鉴定到亚种水平,同时会出现鉴定不准确的情况。结论基于沙门氏菌属水平上, 4类方法都能快速准确鉴定沙门氏菌,但在使用快速检测技术时均应考量该方法的优点对实际工作的帮助以及缺点对检验结果的影响,才能提高检测效率。