胚胎干细胞来源造血细胞的细胞表型和功能分析

【目的】分析经卵黄囊(YS)、胎肝(FL)和骨髓来源(BM)的基质细胞条件培养液(SCCM)诱导产生的胚胎干细胞(ES)来源造血细胞的细胞表型与功能差异。【方法】制备YS-SCCM、FL-SCCM及BM-SCCM,将3种基质细胞条件培养液分别加入ESE14.1细胞分化培养体系培养7d,通过对分化ESE14.1细胞造血发育表面标志FLK-1、Integrin-α4(整联蛋白-α4)、Sca-1(干细胞抗原-1)、CD34的检测、体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)分析及体内脾集落形成单位(CFU-S)检测,评价3种基质细胞条件培养液对ESE14.1细胞体外造血发育的调控作用。【结果】经FL-SCCM诱导的EB细胞Flk-1+、Integrinα4+和Sca-1+细胞均高于YS-SCCM和BMSC-CM诱导组,分别为3.03%、2.9%和13.74%;经BMSC-CM诱导产生的CD34+细胞比例最高,为1.07%。经FLSC-CM或BMSC-CM诱导产生的造血细胞其HPP-CFC产率明显高于对照组,分别为7.4个/105细胞(P<0.01)和5.8个/105细胞(P<0.05);经FLSC-CM或BMSC-CM诱导产生的造血细胞其CFU-S产率亦明显高于对照组,分别为8.5个/5×105细胞和6.75个/5×105细胞(P<0.001)。【结论】YS-SCCM、FL-SCCM及BM-SCCM均可诱导ESE14.1向造血细胞分化,FL-SCCM和BM-SCCM造血定向诱导效率较高,所产生的细胞具备造血细胞的正常功能,FL-SCCM诱导产生的造血细胞原始程度高于BM-SCCM诱导产生的造血细胞。

咽鼓管鼓室粘膜辐射损伤的组织病理学观察

目的 :观察豚鼠咽鼓管鼓室粘膜受γ射线照射后损伤的显微形态学改变 ,对其放射损伤的病理学基础作初步研究。方法 :选择正常成年豚鼠 16只 ,耳颞部接受 6 0Gyγ射线照射。照射结束后 2、4、8及 12周分别处死动物各四只 ,用显微镜观察照射侧的中耳腔、咽鼓管、鼓室粘膜 ;对照组动物 4只不作照射 ,取鼓室粘膜和咽鼓管作正常对照。结果 :实验组全部照射鼓室腔均出现大量脓细胞 ,随后局部出现肉芽组织及纤维组织 ;鼓室粘膜上皮完全脱落 ;粘膜下组织水肿 ,血管壁增厚 ,管腔变窄 ;咽鼓管粘膜上皮细胞胞浆淡染 ,粘膜下少量炎症细胞浸润 ,咽鼓管软骨镜下未见病理改变。结论 :豚鼠耳颞部受 6 0Gyγ射线照射后 ,中耳腔内发生化脓性炎症 ,随后局部出现肉芽组织及纤维组织 ,对中耳传音功能造成难以恢复的损伤 ;照射后鼓室粘膜比咽鼓管粘膜的损伤更严重 ;咽鼓管、鼓室粘膜下组织微循环减少 。