O^6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶基因表达与胃癌发生的关系

目的研究人胃癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因的表达特点及其与胃癌发生的关系。方法应用加强型原位杂交方法及寡核苷酸探针高效标记技术对76例胃癌组织、73例癌旁组织、20例正常胃组织进行MGMT基因标记检测,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果胃癌组织MGMT基因阳性表达率为40.8%(31/76),低于正常胃组织的60.0%(12/20),MGMT表达强阳性率为32.3%(10/31),也明显低于正常组织的83.3%(10/12),差异均有显著性意义(P<0.01或P<0.05);癌旁组织MGMT基因阳性表达率为46.6%(34/73),MG-MT表达强阳性率为41.1%(14/34),与胃癌组织差异无显著性意义。定量分析示,胃癌组织MGMT阳性表达的积分吸光度、阳性单位值明显低于正常组织(P<0.05)。胃癌组织与癌旁组织、早期胃癌与进展期胃癌组织、癌旁不同程度不典型增生之间MGMT表达无明显差异。结论人体胃组织存在高度表达的MGMT基因,胃癌发生与MGMT基因表达水平降低有关,MGMT基因异常表达是胃癌形态学改变出现之前的早期行为。

Livin基因特异性siRNA对肝癌细胞增殖、转移的影响

目的应用RNA干扰技术抑制人肝癌细胞株SMMC-7721中凋亡抑制因子livin表达,研究livin基因对肝癌细胞生物学行为的影响。方法构建针对livinβ基因的siRNA真核表达载体pU-livinβ-siRNA,将其表达载体经脂质体LipofectamineTM2000转染至肝癌细胞株SMMC-7721细胞,采用RT-PCR、Westernblot方法检测转染后的SMMC-7721细胞中livinβ基因的mRNA和蛋白质表达,了解转染效率。通过流式细胞仪分析细胞周期的分布,并应用Transwell侵袭小室模型观察转染后SMMC-7721细胞恶性生物学行为的变化。结果在pU-livinβ-siRNA转染后的SMMC-7721细胞中,livinβ基因的mRNA和蛋白质表达显著下降(P<0.05),细胞周期被阻滞在G1期,细胞生长缓慢,体外侵袭能力下降。结论通过RNAi技术阻断livin的表达,可抑制SMMC-7721细胞的生长、增殖、迁徙,提示Livin基因在肝癌的发生、发展过程中起重要作用。

纤维支气管镜联合取材对肺癌诊断的临床价值

目的评价纤维支气管镜检查对肺癌的诊断价值,探讨纤维支气管镜下联合采用多种取材方法对肺癌诊断的临床意义。方法回顾性分析109例肺癌患者,经纤支镜检查采用钳夹、刷检、灌洗联合取材方法,获取标本,经病理学检查或细胞学检查确诊为肺癌,比较三种不同取材方法及联合取材方法获取肺癌诊断阳性率。结果钳夹、刷检、灌洗对肺癌诊断的阳性率分别是82.02%、69.44%、55.96%,三种方法联合后总阳性率为98.86%,联合取材与单一方法取材比较差异有显著性(P<0.05)。结论纤支镜检查是确诊肺癌的重要手段之一,联合取材可以提高肺癌诊断的阳性率。

胃癌组织中MDR和MGMT基因表达及其相关意义

目的:检测胃癌组织多药耐药(multidrugresistance,MDR)基因和O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanin-e-DNA-meyhyltransferase,MGMT)基因的表达,探讨MDR、MGMT基因表达的相关性及其在胃癌组织中的临床病理学意义。方法:应用加强型原位杂交技术通过核酸探针对76例胃癌组织进行MDR、MGMT基因检测,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果:76例胃癌组织中MDR基因阳性表达率为68·4%,积分吸光度为351·5±121·4,分别高于正常组织(40·0%,168·4±68·8);MGMT阳性表达率为40·8%,积分吸光度为161·4±78·84,分别低于正常组织(60·4%,332·9±118·2)。生存时间5年以下组MDR和MGMT基因表达分别高于5年以上组,rs分别为0·250和0·287,P值分别为0·010和0·008;白细胞计数>3×109L-1组MGMT基因表达高于<3×109L-1组,rs=0·354,P=0·001;有淋巴结转移组MDR基因表达高于无淋巴结转移组,rs=0·280,P=0·004;术前化疗组MDR表达明显高于未化疗组,rs=0·300,P=0·002。结论:胃癌组织存在原发性和获得性MDR基因耐药的双重性,而MGMT基因主要是原发性,两种基因表达可能是2个相互独立的事件,在胃癌预后和骨髓抑制的判断上有一定意义。

胃癌MGMT基因表达的临床病理意义

目的检测胃癌组织O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因的表达,探讨MGMT基因表达与胃癌组织学类型、疗效、预后、骨髓抑制的关系。方法应用加强型原位杂交三相寡核苷酸探针高效标记技术检测76例胃癌组织MGMT的表达,同时应用自动图像分析系统进行定量分析。结果76例胃癌MGMT基因阳性表达率为40.8%(31/76)。治疗后生存5年以上者胃癌组织MGMT阳性表达率为35.3%(4/17),明显低于生存5年以下组,后者MGMT阳性表达率为65.9%(22/41)(P<0.05)。白细胞计数≥3×109/L组MGMT阳性率为54.8%(23/42),明显高于白细胞计数<3×109/L组[23.5%(8/34)](P<0.01)。早期胃癌与进展期胃癌间MGMT表达差异无显著性意义(P>0.05)。不同组织学类型及淋巴结转移状况组间MGMT基因表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论胃癌MGMT基因阳性表达水平与患者生存时间、骨髓抑制有关,提示检测胃癌组织MGMT基因表达水平对抗癌治疗、提高骨髓耐受性和预测预后有重要意义。

HMGA2在原发性肝细胞癌中表达的临床意义

目的探讨HMGA2在原发性肝癌中的表达及其与原发性肝癌患者临床资料间的关系。方法通过RT-PCR检测HMGA2 mRNA在肝癌组织及正常肝组织中的表达,蛋白质印迹分析、免疫组化分别检测HMGA2蛋白在肝癌组织及正常肝组织中的表达水平,分析HMGA2蛋白的表达与肝癌患者临床资料之间的相关性。结果HMGA2 mRNA在肝癌组织中的阳性表达率为43.69%,高于在正常肝组织中23.30%的阳性表达率,其在肝癌组织中的相对表达值为0.71±0.03,高于其在正常肝组织中0.28±0.04的相对表达值(P<0.05)。HMGA2蛋白在肝癌组织中的相对表达值为0.56±0.04,高于其在正常肝组织中0.19±0.03的相对表达值(P<0.05)。免疫组化结果显示HMGA2蛋白在正常肝组织中阳性表达率为20.39%,明显低于其在肝癌组织中37.86%的阳性表达率(P<0.05),HMGA2蛋白的表达与肝癌患者性别和肿瘤大小无关(P>0.05),但与淋巴结转移数量、肝内转移以及临床分期相关(P<0.05或P<0.01)。结论HMGA2在肝癌组织中高表达,且其高表达与肝癌的淋巴结转移数量、肝内转移及临床分期紧密相关,可作为肝癌转移和恶化的肿瘤标志物。

BMI-1在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:通过检测人宫颈癌组织中BMI-1的表达,探讨其与宫颈癌临床病理特征的关系。方法:分别采用RT-PCR和Western blot方法检测BMI-1基因在宫颈癌细胞株CasKi中mRNA水平及蛋白质水平的表达,进一步采用免疫组化SP法检测57例宫颈癌组织中BMI-1蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性。结果:BMI-1在宫颈癌细胞CasKi中,在mRNA水平和蛋白质水平均有表达,免疫组织化学检测的57例宫颈癌标本中BMI-1蛋白强阳性表达23例(80.70%),且BMI-1的强阳性表达与宫颈癌的淋巴结转移及临床分期密切相关(P<0.05),而与肿瘤大小、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)等临床病理特征无显著性相关(P>0.05)。结论:BMI-1蛋白在宫颈癌组织中的高表达与肿瘤进展和淋巴结转移相关,提示高表达BMI-1的宫颈癌具有高度转移潜能,同时预示BMI-1可能成为预测宫颈癌高度转移的新的分子标志物。

FAT10基因表达与结直肠癌患者临床病理因素及预后的关系

目的:探讨结直肠癌(CCT)组织中FAT10(Diubiquitin,双泛素)的基因表达与其病理因素及预后的关系。方法:收集我院2000～2003年73例有5年以上完整随访资料的结直肠癌术后患者,采用RT-PCR方法检测FAT10 mRNA在CCT、癌旁组织(TCT)和正常结直肠组织(NCT)中的表达情况,并分析临床病理因素对FAT10阳性表达率和相对表达量的影响,以及FAT10表达与预后的关系。结果:FAT10 mRNA在CCT阳性表达率为52.24%(35/67),且在CCT的相对表达量(0.735±0.034)明显高于TCT(0.561±0.044)和NCT(0.397±0.028)(P<0.05);FAT10 mRNA的阳性表达率及相对表达量受临床进展、淋巴结转移和TNM分级的影响较明显(P<0.05),而患者年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度等对其无明显影响(P>0.05);Log-Rank检验显示CCT患者中,FAT10表达阳性者生存率明显低于FAT10表达阴性者(P<0.01)。结论:FAT10在CCT的表达状况与CCT转移及预后关系密切,可以作为反映生物学行为和判断预后的有效指标。

趋化因子受体P2Y与鼻咽癌转移相关性初步研究

目的探讨P2Y受体在鼻咽癌细胞中的表达及其与鼻咽癌转移之间的关系。方法采用RT-PCR检测P2Y受体在鼻咽癌细胞系中的表达,趋化试验分析P2Y受体与鼻咽转移的关系。结果P2Y受体在7株鼻咽癌细胞中的表达有明显的差异,其中P2Y12在所有鼻咽癌细胞株中均无表达,而P2Y1和P2Y6仅弱表达于HNE2细胞中,在其他细胞株中不表达。HNE2细胞株几乎表达所有检测的P2Y受体,而HNE3细胞株仅表达P2Y11受体。趋化试验表明,鼻咽癌细胞能在ATP作用下发生明显移动,以ATP浓度为1.0×10-6mol/L时趋化作用最明显,其趋化指数(CI)为4.3±0.6,这种趋化作用是一种定向迁移,而非随机运动。结论P2Y受体在鼻咽癌的转移中可能发挥着重要的作用。

胃癌的雌激素受体表达与功能的初步研究

胃癌是常见的恶性肿瘤之一,其发病机制尚不清楚。雌激素受体在乳腺癌、子宫内膜癌等靶器官的肿瘤治疗及预后的判断都起到重要作用。新型雌激素受体亚型进一步拓宽雌激素受体在肿瘤发生、发展中的作用机制的研究空间。非雌激素靶器官的肿瘤如胃肠道肿瘤中存在雌激素受体表达,并且与胃癌的生物学行为及治疗有关。

血管球瘤的免疫组化研究

本实验用免疫组化的方法,选择7种抗体标记物研究了20例血管球瘤的分布表达。结果,18例显示vimentin强阳性反应,16例显示actin阳性反应,15例显示myosin阳性反应,9例显示desmin弱阳性反应,1例显示keratin弱阳性反应;所有病例在A-FⅧ、A-BgA标记中均为阴性反应。本结果提示,血管球瘤细胞具有平滑肌细胞特征,Vimentin标记具有一定特异性。可为血管球瘤的组织发生及鉴别诊断提供依据。

正常、增生过长子宫内膜及内膜癌ER、PR检测探讨

本实验用亲和组化法检测增生期、分泌期、增生过长子宫内膜及内膜癌的雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(Progesterone receptor,PR)。各组强阳性率结果:增生期内膜ER为56.5%,PR为43.5%;分泌期内膜ER仅为6.5%,PR为3.5%;增生过长内膜ER为25%;子宫内膜癌ER为13%,且与分化程度呈正比。统计学处理,增生期子宮内膜与分泌期、增生过长内膜及內膜癌的受体水平均差异有显著性,P<0.01、P<0.05。增生过长子宫内膜与内膜癌受体水平及分布特点差异无显著性,P>0.05。癌周残留内膜间质细胞及肌层组织均显示相当水平的ER、PR。本文就ER、PR在子宫内膜癌的发生、临床、病理的关系及检测方法进行了讨论。

20例血管球瘤临床病理分析

血管球瘤是一种少见的肿瘤,国内文献少有报道。本文收集20例血管球瘤,结合文献复习总结如下。

大肠癌核仁组织区与雌激素受体表达的相关性研究

用核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNOR)技术及亲和组化法研究大肠癌AgNOR变化的雌激素受体(ER)表达的相关性。结果,AgNOR颗粒均数2.96±1.65,直径均值1.606±0.423,异形颗粒均数为28.512±1.203,粉尘状颗粒核均数17.625±0.813。大肠癌ER阳性率37.7％。经相关性分析,AgWOR计数与ER阳性率无相关意义,而银染颗粒直径、异形率、粉尘状颗粒核计数与ER阳性率呈正相关性关系。r分别为0.903、0.943、0.96,P均<0.01。本研究认为,ER不仅与大肠癌的发生有关,而且在反应大肠癌的异型性上与AgNOR各参数变化有相似之处。

家族性腺瘤性息肉病P_(21)、P_(53)、CEA表达意义的探讨

为研究癌相关基因与家族性腺瘤性息肉病（ＦＡＰ）发生、发展、癌变的关系，应用ＳＡＢＣ免疫方法，选用了Ｐ２１、Ｐ５３、ＣＥＡ单克隆抗体对ＦＡＰ各病变阶段进行免疫组化标记。结果显示ＦＡＰ各病变阶段ＣＥＡ阳性率高达７４～９４．７％，Ｐ２１表达阳性率为５～２５％，Ｐ５３表达１０～３６．８％。以上结果提示ＣＥＡ高表达率是先于形态学表现的恶性征象，Ｐ２１、Ｐ５３是参与ＦＡＰ发生、发展、癌变的癌相关基因谱成员之一。

碳酸氢钠静脉推注引起左上肢瘀血性水肿一例

杨某,23岁,住院号7005,孕37W于1992年5月12日入院要求终止妊娠,经检查心、肺、肝肾功能正常。5月13日3pm行羊膜腔内利凡诺100mg引产术,42h后无宫缩,静脉点滴催产素诱发宫缩。产程进入后,宫口扩张缓慢,活跃期延长15h30min,遵医嘱静脉推注5％SB250ml（未测CO2CP）,注射部位在左手手背血管。

为儿童写作童话创设情境

在指导学生认真阅读童话的基础上,我积极引导学生写童话;并在指导观察的基础上,发展学生的创造思维。小学生的想象具有直观性和具体性的特点,他们的想象内容以某种具体的东西作直观依据。因此,在引导儿童编写童话中,我注意为学生选择提供画图、灯片、标本、实物等形象化的材料,有时把儿童带出校门,观察大自然,为他们创设写作情境。有一次,我带领学生到双清公园观察猴子,同学们站在猴笼外边,一边观察猴子的活动,一边丢食物逗猴子玩。猴子一会儿翻筋头,一会儿荡秋千,一会儿把手伸出笼外讨东西吃……忽然。

亲和组化法检测子宫内膜癌ER、PR的初步探讨

本实验用亲和组化法检测15例子宫内膜癌的雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)．并对正常和增生过长的子宫内膜进行了检测对照．结果．四组PR均低于相应组ER．统计学处理：子官内膜癌ER，PR与增生期内膜有显著差异，与分泌期和增生过长的内膜ER无明显差异，而PR差异显著．此外．癌周间质及肌层均显示相当水平的ER，PR．本文就ER和PR在子宫内膜癌的发生，临床病理的关系及检测方法进行讨论。

一个问題的思维导向

我在教《捞月亮》一课时,运用电化教学,一边讲述故事一边演示灯片,把儿童引入情境。然后,我指着灯片上的萤火虫、月亮,青蛙等景物,启发孩子们自己观察、思考,一下子激起了儿童许多生动的想象。有的说“萤火虫打着灯笼,正在水面上帮着猴子找月亮呢。”有的说:“月亮公公正在天上哈哈大笑,笑这一群猴子不动脑筋。”有的说:“瞧,青蛙站在井沿上,正在给猴子鼓劲,大声说:‘快!快!快!……’”有一个孩子这样提问:“老师,这群猴子为什么不看看天上,再去捞月亮呢?”