二子益肾苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:研究二子益肾苦荞茶的制备工艺并对其进行含量测定。方法:以干膏得率与鞣花酸转移率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对二子益肾苦荞茶中枸杞子、覆盆子提取工艺的影响,对苦荞吸附枸杞子、覆盆子药液比例进行考察,确定二子益肾苦荞茶的制备方法;并采用HPLC测定二子益肾苦荞茶中芦丁、鞣花酸的含量。结果:枸杞子和覆盆子的最佳提取工艺为8倍量水,提取3次,每次2 h,出膏率为47.53%,鞣花酸提取率为97.76%;苦荞与枸杞子、覆盆子提取液的吸附比例为1∶0.5时吸附效果最佳;芦丁和鞣花酸的线性关系良好(r>0.999),芦丁和鞣花酸的加样回收率均值分别为103.02%(RSD=1.37%)和102.16%(RSD=1.09%)。结论:该试验研究的最佳提取工艺简单经济;最佳的吸附比例合理,成型工艺可行;该研究建立的含量测定方法简单、准确、灵敏、重复性好,为二子益肾苦荞茶的进一步开发、品质评价和质量控制提供了科学依据。

基于网络药理学和分子对接探讨黄芪多糖治疗结直肠癌作用机制

目的 通过网络药理学预测黄芪多糖主要活性成分和作用靶点,探讨其多成分-多靶点-多通路的潜在作用机制,同时将筛选结果进行分子对接。方法 通过查阅文献筛选得到黄芪多糖活性化学成分,采用Swisstarget数据库筛选出黄芪多糖活性成分的作用靶点,利用TTD、Drugbank及Disgenet数据库筛选结直肠癌疾病作用相关靶点,明确黄芪多糖治疗结直肠癌的靶点。在STRING数据库的作用下,对靶点进行蛋白互作网络分析,基于Cytoscape建立相关的蛋白互作网络,并采取可视化分析,基于David数据库实现GO分析,展开一系列的KEGG信号通路富集分析,利用AutoDock Tolls软件进行分子对接。结果 利用Swisstarget数据库筛选出黄芪多糖的潜在靶点299个,通过上述基因相关数据库检索到结直肠癌相关的靶点1648个,将活性成分靶点与疾病靶点取交集共获得146个靶点,KEGG通路富集分析发现黄芪多糖治疗结直肠癌的作用机制可能与糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、脂质与动脉粥样硬化、癌症通路等157条信号通路存在密切的相关性。通过分子对接表明,黄芪多糖中12个活性成分中葡聚糖与TNF、IL-6有较好的结合活性。结论 黄芪多糖治疗结直肠癌具有多靶点、多通路作用的特点,为进一步研究黄芪多糖治疗结直肠癌作用机制的研究提供了新思路。

养心苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:优选养心苦荞茶的最佳制备工艺并建立其成品中芦丁的含量测定方法,为该保健茶的开发提供一定的基础依据。方法:以干膏得率与甘草酸铵的转移率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对养心苦荞茶中淡竹叶甘草提取工艺的影响,对苦荞吸附淡竹叶、甘草药液比例进行考察,确定养心苦荞茶的最佳制备工艺;并采用HPLC测定养心苦荞茶中芦丁的含量。结果:优选出的最佳提取工艺为加16倍量水,回流提取3次,每次提取1 h;干膏得率20.96%,甘草酸铵转移率68.43%;苦荞与淡竹叶甘草药液的吸附比例为1∶1,养心苦荞茶所含芦丁的平均含量为3.62 mg/g。结论:优化出的提取工艺稳定,简便可行,可为养心苦荞茶的制备与生产提供参考。

组分配伍四逆汤对被动型Heymann肾炎大鼠的治疗作用研究

目的:研究组分配伍四逆汤对被动型Heymann肾炎大鼠的治疗作用。方法:兔皮内多次免疫制备兔抗鼠Fx1A抗血清,然后大鼠尾静脉注射Fx1A抗血清,建立被动型Heymann肾炎(PHN)模型。将实验大鼠随机分为4组,为正常组、模型组、肾衰宁组和组分配伍四逆汤组。造模成功后,每天用相应的药物进行灌胃给药治疗,持续8周。第8周末收集各组大鼠尿液用于检测大鼠24 h尿蛋白。给药治疗结束后,收集各组大鼠的血清用于检测血清中的肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)等指标;取肾脏,进行HE染色,观察组分配伍四逆汤对PHN大鼠病理损伤的影响。结果:连续灌胃8周后,组分配伍四逆汤可以明显降低PHN大鼠24 h尿蛋白含量(P<0.01),显著降低PHN大鼠血清Scr(P<0.01)、BUN(P<0.05)、TC(P<0.01)以及TG(P<0.01)水平,并显著升高PHN模型大鼠血清Alb(P<0.01);HE染色结果表明,组分配伍四逆汤能减轻PHN模型大鼠肾组织的病理变化。结论:组分配伍四逆汤对被动型Heymann肾炎大鼠具有改善作用。

养肺苦荞茶制备工艺及其含量测定

目的:优选养肺苦荞茶的最佳水提取工艺并建立同时测定成品中柚皮苷与芦丁含量测定方法,为该保健茶的开发提供一定的基础依据。方法:以干膏得率与柚皮苷的提取率为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验考察加水量、提取时间、提取次数对养肺苦荞茶提取工艺的影响,综合评价优选出最佳工艺条件。并采用HPLC测定养肺苦荞茶中柚皮苷与芦丁的含量。Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.5%冰醋酸溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,A为10%～12%;10～15 min,A为12%～17%,15～25 min,A为17%;25～35 min,A为17%～20%;35～37 min,A为20%～24%;37～40 min,A为24%～10%;40～45 min,A为10%～10%;)流速1.0 m L·min^(-1),芦丁检测波长257 nm,柚皮苷检测波长283 nm,柱温30℃。结果:优选出的最佳提取工艺为加10倍量水,回流提取3次,每次提取1 h;干膏得率28.75%,柚皮苷转移率32.81%;养肺苦荞茶所含芦丁含量为0.64 mg/g;柚皮苷含量为17.28 mg/g。结论:建立的HPLC检测成品中柚皮苷与芦丁含量方法准确可靠,优化出的提取工艺稳定,简便可行,可为养肺苦荞茶的制备与生产提供参考。

四逆软膏剂基质处方优化与体外渗透性研究

目的采用L16(54)正交试验法对四逆软膏剂基质处方进行优化;并考察不同种类促渗剂对其体外透皮特性的影响,优选适宜最佳促渗剂。方法在前期预实验基础上,依据膏体的均匀性、软硬程度、37℃融化性、黏稠度为综合指标对四逆软膏剂基质处方进行优化;采用改良Franz扩散池法,以苯甲酰新乌头原碱、甘草苷、甘草酸铵、6-姜酚的单位累积渗透量为检测指标,考察1%、2%、3%、5%(氮酮、干姜挥发油)透皮促渗剂对四逆软膏有效成分体外经皮渗透性的影响。结果四逆软膏剂基质最佳组合为甘油∶凡士林∶羊毛脂∶液体石蜡(1.0∶0.4∶0.15∶0.2);3%氮酮对指标成分的促渗效果最好,苯甲酰新乌头原碱、甘草苷、甘草酸铵、6-姜酚的体外透皮速率依次是0.2486、0.0649、0.0266、1.5830μg/(cm^2·h)。结论制备的四逆软膏膏体细腻有光泽,软硬、黏性适中,手触之无膏体残留,融化性良好。具有较好的释药性能与透皮性,透皮性能符合零级动力学方程。

中华苦荬菜黄酮部位制备工艺及抗氧化活性研究

目的:优选中华苦荬菜黄酮部位的提取及大孔树脂的纯化工艺,考察中华苦荬菜黄酮部位抗氧化活性。方法:以木犀草苷提取率为评价指标,通过单因素试验及正交实验优选提取工艺。在此基础上,考察不同型号的大孔树脂,优选大孔树脂的纯化工艺。采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基试验对黄酮提取物进行抗氧化活性评价。结果:最佳提取工艺:12倍量的70%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。最佳纯化工艺:HPD100型大孔吸附树脂,上样浓度0.48 mg·mL^-1,最大上样量5 BV,上样速率2 BV·h^-1,洗脱剂70%的乙醇,洗脱速率2 BV·h^-1,洗脱剂用量5 BV。中华苦荬菜醇提物经大孔树脂纯化后的出膏率为3.79%,纯化物中木犀草苷含量为7.04%。中华苦荬菜黄酮部位对DPPH自由基有较好的清除作用。结论:该制备工艺操作简便易行,适用于大规模生产。中华苦荬菜总黄酮具有良好的抗氧化活性。

中华苦荬菜药材的HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立中华苦荬菜的HPLC指纹图谱。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.5%冰醋酸水溶液梯度洗脱,检测波长350 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃。结果:建立了中华苦荬菜药材的指纹图谱,确定了18个共有峰,各中华苦荬菜样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.90以上,符合规定。结论:该方法简单,准确、重复性好,为中华苦荬菜药材的质量控制提供了有效可靠的方法。

基于ABC外排蛋白介导的中药七情配伍的药动学机制研究进展

ABC外排蛋白是一类依赖ATP水解释放的化学能，介导机体多种内源性和外源性外排蛋白底物的跨膜转运。其广泛存在于人体的各种组织器官中，是人体内重要的功能性膜蛋白。药物改变转运蛋白的表达和（或）功能，将会影响该转运蛋白对应底物药物的体内处置过程，产生药动学方面的相互作用。外排蛋白主要由P．糖蛋白（P-glyeoprotein，P-gP）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance associated protein，MRP）、乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）组成，能够对药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程产生影响。药物对外排蛋白的诱导或抑制作用是中药配伍使用时产生相互作用的重要因素，这种作用可能是七情配伍理论的重要机制之一。该文就七情配伍对ABC外排蛋白的影响进行了简要综述，以揭示外排蛋白在药对配伍中的作用．为中药配伍机制和合理性提供新思路。

益母草治疗寒凝血瘀型痛经的网络药理学作用机制研究

目的构建益母草Leonurus japonicus化学成分-疾病靶点-代谢信号通路网络,探究益母草多成分-多靶点-多通路治疗寒凝血瘀型痛经的作用机制。方法利用TCMSP数据库与Swiss Target Prediction服务器获取益母草的化学成分与作用靶点,结合DrugBank、DisGeNET、TTD等数据库获取益母草治疗寒凝血瘀型痛经的作用靶点;通过DAVID网站对作用靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路分析,采用Cytoscape 3.6.0构建益母草活性成分-痛经作用靶点-代谢信号通路网络图,探讨益母草治疗寒凝血瘀型痛经的作用机制;并进一步采用Westernblotting实验验证益母草对寒凝血瘀型痛经模型大鼠子宫组织中花生四烯酸代谢通路环氧化酶1(PTGS1)、PTGS2蛋白表达的影响。结果获得益母草潜在活性成分共8个,与痛经相关疾病靶点22个,关键靶点涉及PTGS1、PTGS2、ALOX5、PLAG2A、AKR1C3等。GO功能富集分析共得到GO条目71个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目46个,细胞组成(CC)条目4个,分子功能(MF)条目21个。益母草治疗痛经可能作用靶标22个,KEGG通路富集筛选得到7条信号通路(P<0.05),涉及花生四烯酸代谢、亚油酸代谢、甾类激素生物合成等;益母草可显著提高模型大鼠子宫中PTGS1、PTGS2蛋白表达水平(P<0.05),验证了网络药理学的部分预测结果。结论益母草可能通过作用于花生四烯酸代谢通路起到治疗寒凝血瘀型痛经的作用。

组分配伍四逆汤抑制ERK/cPLA2信号通路改善大鼠膜性肾病

目的研究组分配伍四逆汤对大鼠膜性肾病的治疗作用及机制。方法将45只雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组和组分配伍四逆汤组,除对照组外,其余各组尾iv兔抗大鼠Fx1A抗血清制备大鼠膜性肾病模型。造模成功后,组分配伍四逆汤组大鼠ig 9.6 g/kg组分配伍四逆汤,模型组和对照组ig等量蒸馏水,连续给药12周。试剂盒法检测大鼠血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)以及白蛋白(Alb)含量;取肾脏检测肾指数,苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织的病理情况;ELISA法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)以及IV型胶原(Col-IV)含量;采用Western blotting法检测肾脏中ERK1/2和胞浆型磷脂酶(c PLA2)蛋白磷酸化水平。结果与对照组比较,模型组血清中Scr、BUN水平以及肾指数明显升高(P<0.05、0.01),血清Alb水平明显降低(P<0.01),肾组织中TGF-β1、FN和Col-IV含量以及ERK1/2、c PLA2磷酸化蛋白表达均显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,组分配伍四逆汤显著降低血清中Scr、BUN水平以及肾指数(P<0.05、0.01),升高血清中Alb水平(P<0.01),降低肾组织中TGF-β1、FN、Col-IV含量,减少肾组织中ERK1/2和c PLA2磷酸化蛋白表达(P<0.05、0.01);HE染色结果显示,组分配伍四逆汤可以改善膜性肾病大鼠肾脏的病理变化。结论组分配伍四逆汤对膜性肾病大鼠发挥明显治疗作用,其作用机制可能与抑制ERK/c PLA2信号通路激活相关。

组分配伍四逆汤对甲状腺功能减退症大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴动态变化的调节作用

目的动态观察组分配伍四逆汤对甲减大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响。方法 ig 0.1%丙基硫氧嘧啶(PTU)混悬液法分别造模6、11、16、20周,用左甲状腺素钠片(9μg/kg)及组分配伍四逆汤(生药9.6 g/kg)对模型动物治疗4周,酶联免疫吸附法测定大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、促甲状腺素释放激素(TRH)水平的变化。结果甲减程度随着造模时间的延长而加重。造模6、11、16周甲减大鼠与对照组比较,模型组大鼠血清T3、T4、TRH水平显著降低(P<0.05、0.01),TSH水平显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,左甲状腺素钠片组及组分配伍四逆汤组大鼠血清中T3、T4、TRH水平均显著升高(P<0.05、0.01),TSH水平显著降低(P<0.05、0.01)。造模20周甲减大鼠与对照组比较,模型组大鼠血清T3、T4、TRH水平显著降低(P<0.01),TSH水平明显升高(P<0.01),左甲状腺素钠片组和组分配伍四逆汤组血清T3、T4水平均显著降低(P<0.05、0.01);与模型组比较,左甲状腺素钠片组及组分配伍四逆汤组大鼠血清T3、T4无统计学差异,TRH水平显著升高(P<0.05、0.01),TSH水平显著降低(P<0.01)。结论下丘脑-垂体-甲状腺轴在甲减发展过程中整体功能在退化,组分配伍四逆汤的调节作用是动态变化的,应在初期及早给予。