六味地黄丸含药血清对人成骨样细胞OS-732增殖的影响

目的:研究六味地黄丸含药血清对成骨样细胞的增殖作用。方法:选择合适浓度的OS-732成骨样细胞,给予体积分数为10%的六味地黄丸高、中、低剂量含药血清和空白血清连续培养7 d,分别采用细胞计数生长曲线绘制、MTT、ALP测定。结果:生长曲线的分析,含药血清具有促增殖作用,其中以中剂量组的作用最强,与空白对照组比较差异显著(P<0.05);MTT法测定,含药血清具有促增殖作用,24、48 h药物组与空白对照组比较未见明显差异,但在第3、4、5天药物作用较强,以中剂量作用最显著,与空白对照组比较差异显著(P<0.05);ALP测定值显示高、中、低各剂量组均比空白对照组高,但以中剂量组最为显著(P<0.05)。结论:六味地黄丸含药血清对0S-732成骨样细胞具有促增殖作用。

人成骨样细胞OS-732酒精干预和六味地黄丸含药血清的治疗作用

目的:阐明酒精性股骨头坏死及补肾中药对其治疗作用的机制。方法:以浓度0.3、0.9、1.5mol/L的酒精对OS-732成骨样细胞进行干预,通过流式细胞仪等观察其坏死和凋亡的情况;选择浓度为0.15mol/L酒精干预后的细胞模型用六味地黄丸含药血清治疗,观察其治疗作用。结果:成骨样细胞凋亡率和坏死的程度与干预酒精的浓度及干预时间正相关,其中多形状的细胞变成圆形,细胞突起短缩变细,核糖体、内质网减少,线粒体部分皱褶消失。经六味地黄丸治疗后的细胞突起恢复,内质网、线粒体数量有所增加,结构部分恢复。结论:酒精可引起成骨样细胞死亡和凋亡,且与酒精浓度及干预时间成正相关,六味地黄丸对恢复细胞的活性有一定作用。

补肾法对酒精干预人成骨样细胞OS-732蛋白质表达的影响

目的观察成骨样细胞在酒精干预后的变化和补肾中药对其的治疗作用。方法首先用新西兰兔14只,随机分配成中药六味地黄丸治疗组和生理盐水空白对照组。依据人与兔关系换算出治疗组每日用药5.4 g,用温生理盐水10 mL融解灌胃;空白对照组灌胃等量生理盐水,1次/d,连续3 d,末次双倍量灌胃2 h后采血制备含药血清。然后将含药血清与RPMI 1640细胞培养基配成浓度为5%、10%、20%培养液,对细胞进行培养,通过观察细胞生长曲线,得出最佳含药血清浓度为10%。最后将人成骨样细胞OS-732分为酒精干预组、药物治疗组、空白对照组进行培养并收集细胞。每组细胞提取总蛋白后进行双向凝胶电泳技术分离,得出蛋白质点电泳凝胶图谱,利用计算机图像分析软件分析找出差异蛋白质点。结果酒精干预组、药物治疗组、空白对照组比较,表现明显差异的蛋白点有5个(即SSP1002、SSP1401、SSP1602、SSP8501、SSP8504),酒精干预组与空白组比较蛋白点表达均降低;药物治疗组与酒精干预组比较,这5个蛋白点表达均得到不同程度的逆转。结论补肾中药可能能够提高受损成骨细胞的蛋白表达。