体外膜氧合联合介入取栓救治蛋白C基因突变所致高危肺栓塞一例

遗传性蛋白C缺陷症是由蛋白C基因突变引起的一种染色体遗传病,可导致静脉血栓形成,多与外显子4~9和内含子8的突变有关。蛋白C基因突变引起的致死性肺栓塞罕见,治疗面临巨大挑战。本文报道1例由蛋白C基因8号外显子移码突变引起的致死性肺栓塞,采用体外膜氧合进行呼吸、循环支持,并成功实行介入取栓的救治经验,为该疾病的诊断及救治提供参考。

造血干细胞移植后CIK细胞生物治疗的临床观察

目的：观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）对造血干细胞移植后血液肿瘤患者维持治疗的疗效。方法2005年9月至2010年6月收治血液恶性肿瘤患者12例，其中行自体造血干细胞移植8例，异基因造血干细胞移植4例；移植造血重建后1~3个月内，利用血细胞分离机分离患者（自体移植）及供者（异体移植）的外周血单个核细胞，在体外用多种细胞因子[抗CD3单克隆抗体（OKT3）、白介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）等）]共同培养后获得CIK细胞，分次回输给患者。随访观察患者接受治疗后血常规及骨髓等指标的变化及不良反应，同时记录患者的生存期。结果8例自体干细胞移植患者有2例复发，其中1例17个月后死亡，其余6例长期生存；4例异体干细胞移植患者有1例复发，5个月后死亡，其余3例长期生存；4例患者静脉滴注CIK细胞时出现畏寒、寒战、发热，经对症处理均缓解，其余未见不良反应。结论造血干细胞移植后CIK细胞生物治疗延长了患者的生存期，改善了患者的生活状况，未见明显不良反应。

重庆地区幽门螺杆菌临床株耐药性研究

目的了解重庆地区幽门螺杆菌（HP）临床分离株对常用抗幽门螺杆菌抗生素甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林等的体外敏感性及耐药性，为临床根除治疗HP感染提供依据，以指导临床用药。方法HP菌株取自重庆医科大学附属第二医院胃镜室，分离培养后，采用琼脂稀释法进行体外抗生素敏感性实验，检测HP对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、替硝唑、四环素、呋喃唑酮的敏感性，各种抗生素的MIC范围均为0．125～256μg／mL。结果从887例患者胃黏膜中培养出HP96株，其对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、替硝唑、四环素及呋喃唑酮的耐药率分别为91．67％、29．17％、4．17％、4．17％、0％和8．33％。结论重庆地区HP对阿莫西林、呋喃唑酮和替硝唑有较好的敏感性；而对甲硝唑和克拉霉素的耐药率较高，分别为91．67％和29．17％；未发现对四环素耐药。

盐酸沙格雷酯对动脉硬化闭塞症膝下动脉腔内治疗术后后续治疗的疗效及安全性探讨

目的探讨动脉硬化闭塞症膝下动脉腔内治疗术后应用盐酸沙格雷酯后续治疗的疗效及安全性。方法选择我院2010年4月至2013年1月收治的100例采用膝下动脉腔内治疗成功的动脉硬化闭塞症患者作为研究对象,按术后治疗方案分为实验组和对照组各50例,对照组采用阿司匹林联合硫酸氢氯吡格雷治疗,实验组患者在此基础上加用盐酸沙格雷酯治疗,比较两组患者术前、术后1个月、3个月和6个月的踝肱指数(ABI)、血管通畅率以及截肢、静息痛和间歇性跛行情况。结果实验组患者在术后6个月时间歇性跛行发生率远低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但两组患者在其他时段的截肢、静息痛、间歇性跛行发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后两组患者ABI指数较术前均有较大改善,术后1个月、3个月和6个月与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05),但两组患者在各时段的ABI指数和血管通畅率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸沙格雷酯可在一定程度上降低动脉硬化闭塞症膝下动脉腔内治疗术后间歇性跛行的发生风险,安全性良好,对改善预后有着积极的促进作用。

β-连环素对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响

目的:探讨信号分子β连环素(β-catenin)在多个卵巢癌耐药细胞系中的表达及其对顺铂耐药性的影响。方法:首先在2个卵巢癌耐药细胞系(C13K,SKOV-3),2个卵巢癌敏感细胞系(OV2008,A2780),A2780顺铂敏感株、A2780-cis顺铂耐药株,COC10顺铂敏感株、COC1-cis顺铂耐药株中检测β-catenin蛋白的水平。通过小干扰RNA(si RNA)介导的RNA干扰技术靶向沉默细胞中β-catenin的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证β-catenin基因沉默效果。台盼蓝染色方法分析β-catenin基因沉默对细胞化疗药物顺铂敏感性的影响,流式细胞术检测顺铂处理后β-catenin基因沉默细胞的凋亡率。Western blotting筛选多个凋亡相关信号分子的改变。结果:β-catenin在2个卵巢癌耐药细胞系C13K,SKOV-3中蛋白水平较敏感细胞系明显上调。与亲本A2780和COC10细胞相比,在耐药株A2780-cis和COC1-cis中表达水平也明显增高。β-catenin si RNA能显著抑制细胞中β-catenin蛋白的水平。β-catenin基因沉默后,卵巢癌耐药细胞C13K,SKOV-3对顺铂敏感性显著增高;流式细胞术进一步分析发现β-catenin基因沉默可以促进顺铂介导的卵巢癌耐药细胞的细胞凋亡。Western blotting发现β-catenin基因沉默后,顺铂处理可以显著上调促凋亡分子p53和caspase-3蛋白水平。结论:β-catenin在卵巢癌耐药细胞系表达明显增高,β-catenin沉默可以促进卵巢癌耐药细胞对顺铂的敏感性,并同时促进了顺铂介导的细胞凋亡。

血液内科学术学位研究生科研能力培养的探讨

随着现代医学的飞速发展,血液病学的固有学习模式已经不能适应新形势进步的需要。学术学位研究生是未来临床科研的的主力军,临床新技术的发展和推广也需要强大的科研实力作为指导和支撑。本文主要从临床与科研的关系,以及当前学术学位研究生教育模式存在的问题进行分析,对学生科研能力提升办法进行初步探讨。

互联网分级诊疗平台在医院高血压优化管理中的应用

目的探究互联网分级诊疗平台在医院高血压优化管理中的应用效果。方法选取高血压患者400例为研究对象,随机分为实验组和对照组,各200例。实验组实行互联网分级诊疗高血压优化管理模式,对照组实施传统高血压管理和诊疗模式。比较2组患者干预12个月后血压水平、药物治疗依从性、高血压并发症发生率、治疗满意度及相关卫生经济成本。结果实施干预后,实验组患者血压控制水平以及高血压并发症的发生率均显著优于对照组(P<0.05);实验组治疗依从性和治疗满意度显著高于对照组(P<0.05)。结论互联网分级诊疗下高血压管理模式相比传统管理模式更具优势。

利什曼病合并噬血综合征1例

噬血细胞综合征(HPS)又称噬血细胞性淋巴组织细胞增生症,是一种全身高度炎性反应的状态。HPS患者的临床特征为发热、肝脾大、全血细胞减少及血清铁蛋白升高等 [1] 。HPS分为原发性和继发性2类。HPS病因复杂,可由感染、恶性肿瘤、自身免疫病等引起,确诊患者常病情凶险,病死率极高。由利什曼原虫感染引起的HPS国内文献少有报道,该类患者常被误诊、漏诊。现将本院成功治疗的1例由内脏利什曼病引起的HPS病例报道如下。

采用卡介苗结核蜡酸合酶启动子构建分枝杆菌穿梭表达质粒

目的采用卡介苗(BCG)结核蜡酸合酶(Mycocerosic acid synthase,Mas)启动子,将分枝杆菌穿梭质粒pJEM11改建为分枝杆菌穿梭表达质粒。方法 PCR扩增BCG基因组中Mas启动子,定向克隆至质粒pJEM11的ApaⅠ与SnaBⅠ位点之间,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pJMas。将幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)UreB基因克隆至pJMas质粒,转化耻垢分枝杆菌(Mycobacteria smegmatis,M.smegmatis)mc2155,SDS-PAGE检测重组UreB蛋白在M.smegmatis mc2155中的表达,Western blot分析其反应原性。结果克隆的Mas启动子序列与结核杆菌H37Rv株的Mas启动子序列(gi31619628)同源性达99%;重组穿梭表达质粒pJMas经PCR及双酶切鉴定证明构建正确;UreB基因在M.smegmatis mc2155中成功表达,表达的蛋白可与Hp阳性病人血清发生特异性反应。结论成功构建分枝杆菌穿梭表达质粒pJMas,为构建以耻垢分枝杆菌为载体的多价疫苗奠定了基础。

人幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因穿梭质粒的构建及表达

目的构建人幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒,并在耻垢分枝杆菌中进行表达。方法PCR扩增幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI编码基因全长片段,克隆入pET32a(+)质粒,鉴定正确后,再亚克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pJHSP70,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70-UreI,转化耻垢分枝杆菌,诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot检测。结果从幽门螺杆菌基因组中扩增出585bp的UreI基因片段。重组质粒pJHSP70-UreI经酶切和PCR鉴定,与预期结果一致。目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的18.5%,且具有良好的反应原性。结论已成功构建了幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI基因大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒,并在耻垢分枝杆菌中获得表达。

重组融合蛋白IL-3-PE38KDEL对急性髓性白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的观察重组融合蛋白IL-3-PE38KDEL对急性髓性白血病(Acute myelocytic leukemia,AML)细胞HL-60(IL-3R阳性)和NB4(IL-3R阴性)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的IL-3-PE38KDEL分别作用HL-60和NB4细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制作用,计算抑制率及半数抑制浓度(IC50)。将HL-60和NB4细胞分别分为IL-3-PE38KDEL组和IL-3+IL-3-PE38KDEL组,IL-3+IL-3-PE38KDEL组加入IL-3(100 ng/ml),孵育4 h后,IL-3-PE38KDEL组和IL-3+IL-3-PE38KDEL组均加入IC50浓度的IL-3-PE38KDEL,计算细胞增殖抑制率;流式细胞术检测2种AML细胞细胞周期的变化及凋亡情况。结果 IL-3-PE38KDEL对HL-60和NB4细胞的增殖均有抑制作用,且呈浓度依赖性,对HL-60细胞的抑制作用强于NB4细胞(P<0.05),IC50值分别为2.5μg/ml和259.2μg/ml。当IL-3-PE38KDEL浓度为IC50时,经IL-3处理后,对HL-60和NB4细胞增殖的抑制率均值分别为32.20%和49.00%。经IL-3-PE38KDEL作用后的HL-60细胞大部分被阻滞于G1/S期。HL-60细胞IL-3-PE38KDEL组的细胞凋亡率均值(19.71%)显著高于IL-3+IL-3-PE38KDEL组(9.39%)(P<0.05),NB4细胞两组差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 IL-3-PE38KDEL能抑制IL-3R阳性的AML细胞HL-60增殖,并诱导其凋亡,但对IL-3R阴性的AML细胞NB4的抑制作用较弱。

ABO血型不合异基因造血干细胞移植后纯红再障分析

目的探讨ABO血型不合对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)及纯红再障(PRCA)发生的影响。方法对该院2010年4月至2015年6月51例ABO血型不合allo-HSCT患者的病例资料进行回顾性分析,并选取同期ABO血型相合alloHSCT患者作比较。结果 ABO血型不合对中性粒细胞植入、血小板植入、急性移植物抗宿主病(aGVHD)、巨细胞病毒(CMV)感染均无影响;在ABO血型主要不合患者中红系恢复时间显著延长,输注红细胞量明显增多;其中3例患者发生PRCA,均为0型受者;2例用美罗华或血浆置换后缓解,1例因严重aGVHD死亡。结论 ABO血型主要不合影响allo-HSCT红系造血恢复并可发生PRCA。美罗华、血浆置换是有效的治疗措施。