闽产厚朴叶的生药显微鉴定

目的:对闽产厚朴叶进行生药显微鉴定观察,为其准确鉴别及今后的开发利用提供参考。方法:主要采用组织切片和粉末制片的方法对厚朴叶进行显微鉴别。结果:厚朴叶的主脉髓部呈椭圆形,较大,外韧型维管束约20个排列成环,含维管束鞘;下表皮非腺毛由多细胞组成,多为2个细胞,粉末中纤维大多成束存在,导管多为螺纹导管。显微鉴别可以较好、较快地鉴别厚朴叶片。结论:通过对闽产厚朴叶进行显微鉴别,对道地药材的准确鉴定提供了参考依据,为后期开展相关研究及将来的开发利用提供参考。

闽产厚朴的枝皮与干皮的生药鉴定

目的:为了正确鉴别闽产厚朴,对其枝皮和干皮进行一系列的生药学鉴定观察研究。方法:采用组织切片和粉末制片的方法对其进行性状鉴别和显微鉴别。结果:厚朴的枝皮薄,单筒状,干皮呈卷筒状或双卷筒状,稍厚;枝皮皮层油细胞少见,干皮皮层散有多数油细胞和石细胞群;干皮粉末油细胞较多,可以很好的鉴别厚朴的枝皮和干皮。结论:通过对闽产厚朴的枝皮和干皮进行性状鉴别和显微鉴别,为道地药材的准确鉴定提供参考,也为后期开展相关的研究以及开发利用提供参考。

黄草乌实时荧光定量PCR内参基因的筛选

筛选合适的内参基因是应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析基因表达的前提。为黄草乌Aconitum vilmori-nianum中基因表达分析研究提供可靠的内参基因,基于黄草乌转录组数据,筛选出19个候选内参基因(ACT1、ACT2、ACT3、aTUB1、aTUB2、bTUB、18S rRNA、UBQ、eIF2、eIF3、eIF4、eIF5、CYP、GAPDH1、GAPDH2、PP2A1、PP2A2、ACP、EF1α),用qRT-PCR技术检测各候选内参基因在黄草乌根、茎、叶和花4个器官中的表达情况,Ct值分析结果表明,18S rRNA在各器官中表达丰度过高,GAPDH2的波动范围较大,二者均不宜作为黄草乌的内参基因。对其他候选基因的表达稳定性进行分析,geNorm和NormFinder分析结果基本一致,稳定性排名前三的内参基因均为PP2A1、EF1α和CYP,BestKeeper分析结果表明,稳定性排名前三的内参基因为EF1α、ACT3和PP2A1。不同软件分析得出的候选内参基因表达稳定性排名存在差异,因此,采用几何平均值法综合分析黄草乌各候选内参基因的表达稳定性,结果表明,PP2A1、EF1α和ACT3的稳定性最佳。基于geNorm、NormFin-der、BestKeeper和几何平均值法综合分析结果,PP2A1和EF1α在黄草乌不同器官中的表达最稳定,是黄草乌不同器官基因表达分析的最佳内参基因。

参与植物三萜生物合成的细胞色素P450酶研究进展

三萜是许多药用植物的活性成分,目前已对其生物合成途径进行了大量研究并取得了重大进展。细胞色素P450(CYP450)主要参与三萜的后修饰过程,对三萜的多样性起着关键作用。目前,已从多种植物中克隆得到与三萜生物合成相关的CYP450基因。对参与三萜生物合成的CYP450的功能研究进行综述,为三萜生物合成途径的解析及CYP450的功能研究提供借鉴。

越南参变种实时荧光定量PCR内参基因的筛选和验证

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术被广泛用于基因表达分析,筛选适宜的内参基因是运用这项技术的前提。本研究采用q RT-PCR筛选适用于越南参变种(Panax vietnamensis var.fuscidiscus)不同组织器官(根、根茎、茎和叶)的内参基因。基于越南参变种转录组数据,筛选出13个候选基因(ACT1、ACT2、bTUB1、bTUB2、aTUB、GADPH、UBQ、elF、EF-1a、F-box、CYP、QCR、TCTP)。利用qRT-PCR技术检测候选内参基因在越南参变种四个组织部位中的表达情况,并用geNorm、NormFinder和BestKeeper综合分析候选基因的表达稳定性,发现ACT1和aTUB在越南参变种不同组织部位中表达稳定性最好。用内参基因ACT1和aTUB分析PvfDS在越南参变种不同组织部位的表达,发现二者表达规律一致。结果表明,越南参变种不同组织部位适宜的内参基因为ACT1和aTUB。