表达非洲猪瘟病毒p72蛋白重组猪痘病毒的构建及鉴定

【目的】旨在构建能高效表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组猪痘病毒,为探索猪痘病毒(SPV)作为非洲猪瘟新型活疫苗载体的可行性。【方法】本研究优化合成非洲猪瘟病毒B646L基因,克隆至重组猪痘病毒通用转移载体pUSG11/P28,构建重组转移质粒pUSG11/P28-B646L,经脂质体介导转染预先感染猪痘病毒的PK15细胞,出现病变后通过绿色荧光标记筛选和纯化重组病毒。拯救的重组病毒经PCR和基因测序鉴定后,通过Western blotting和间接免疫荧光试验检测p72蛋白的表达情况,并测定重组病毒的增殖特性和遗传稳定性。【结果】重组转移质粒pUSG11/P28-B646L在PK15细胞内和SPV成功进行了同源重组,纯化得到的重组病毒含有B646L基因,且基因序列正确。Western blotting和间接免疫荧光试验结果表明,重组病毒rSPV-B646L在PK15细胞中能表达非洲猪瘟病毒p72蛋白,表达的蛋白大小正确,且能与p72单克隆抗体发生特异性反应。一步生长曲线显示,重组病毒与亲本病毒的增殖特性没有明显差异。重组病毒在PK15细胞上连续传15代后,插入的外源基因没有发生突变或缺失。【结论】研究以SPV为载体,成功构建了正确表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组猪痘病毒,重组病毒在PK15细胞中有良好的遗传稳定性,B646L基因的插入没有影响重组病毒在PK15细胞上的增殖能力,表达的p72蛋白具有反应原性。研究成果为非洲猪瘟多基因重组猪痘病毒载体疫苗的研发提供依据。

壳聚糖修饰载鲎血蛋白-白蛋白微球的制备及其活性研究

文章通过分析壳聚糖修饰的牛血清白蛋白为载体制备包载鲎血蛋白的微球,考察制备微球的最佳工艺和活性。载药微球粒径大小较为均一,粒径范围为(285±54)nm。Zeta电位值为(-42.69±3.69)mV,包封率为(83.075±4.86)%,载药量为(34.25±2.41)%,在人工血液(pH=7.4)、肠液(pH=6.8)、胃液(pH=1.2)中24 h的累积释放量分别为55.63%、55.25%、48.75%。载药微球生物相容性高,稳定性好,药物释放具有明显的缓释效果。

黄瓜花叶病毒基因沉默载体的病毒含量和症状分析

病毒诱导的基因沉默(Virus-induced Gene Silencing,VIGS)已被广泛应用于植物基因功能研究,具有操作容易、较短时间内即可观察到沉默效果、成本较低的特性.黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic Virus,CMV)VIGS载体已经应用于沉默辣椒、烟草、大豆等植物基因,对于研究植物基因功能有重要作用.研究以CMV的Fny株系(CMV-Fny)RNA2中2b基因缺失载体CMV-F209△2b和表达2b基因N端61个氨基酸的载体CMV-F2092b61aa为对象,插入不同长度的外源基因gfp片段后,分析CMV VIGS载体在本氏烟植株上的病毒表达含量及诱导产生的病毒症状.结果表明,插入外源基因片段后,病毒外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因RNA表达水平均明显降低.携带不同长度gfp序列的重组病毒CMVF2092b61aa-gfp 100、CMVF2092b61aa-gfp 200和CMVF2092b61aa-gfp 350其CP RNA含量比装载最适长度gfp序列的CMVF209△2b-gfp 350高10倍左右,且同样不引发明显病毒症状.由此可见,CMVF2092b61aa相比CMV-F209△2b更适合作为高效的VIGS载体,且初步探明它的最适插入片段长度为200~350 nt.

应对美国经济政策不确定性的对策研究

本文基于2008-2020年经济政策不确定性指数,运用DCC-GARCH模型和SVAR模型证实美国经济政策不确定性对我国存在显著的溢出效应。针对我国汇率、进出口贸易以及跨境资本流动三大领域的研究表明,美国经济政策不确定性增强会使人民币汇率产生非预期波动,对我国进出口贸易规模产生负面冲击,影响我国跨境资本流动走势。据此,本文提出在坚定不移扩大对外开放战略指引下,我国汇率、进出口贸易和跨境资本流动领域应采取相关措施积极应对美国经济政策不确定性的溢出效应。

美国宽松财政政策对中国宏观经济的溢出效应

为了应对新冠肺炎疫情对经济的负面冲击,美国近几年推出了一系列的财政刺激计划。美国宽松财政政策的实施必然会通过消费、贸易、投资等渠道对我国经济产生深远影响。从美国的财政支出、财政收入以及财政赤字三方面综合研究美国宽松财政政策对我国相关经济领域的溢出效应。研究发现,美国宽松财政政策对我国实际产出、利率、汇率、进出口贸易、跨境资本流动等领域都产生了一定的影响。对此,基于经济周期视角就我国经济发展遭遇外部政策冲击问题提出相关对策建议。