肉苁蓉多糖的免疫活性作用及机制

目的 :研究肉苁蓉多糖 ( CDPS)的免疫活性作用及其体外免疫调节作用的机制。方法 :采用噻唑蓝比色法 ( MTT)观察 CDPS体外对 ISO、DEX、TNF- β抑制小鼠胸腺淋巴细胞增殖的调节作用 ;采用流式细胞仪进行了CDPS对细胞周期及其胞内 Ca2 +的测定。结果 :CDPS在较高浓度能对抗 ISO、DEX对淋巴细胞增殖的抑制作用 ,及对抗高浓度 TNF- β对淋巴细胞增殖的抑制作用 ,协同低浓度 TNF- β对淋巴细胞的增殖促进作用 ;10 0 μg/m l、2 0 0μg/m l CDPS均能使分裂期的细胞明显增加 ;较高浓度 ( 10 0μg/m l)的 CDPS对小鼠胸腺细胞内 Ca离子浓度有明显的促进升高作用。结论 :CDPS能促进细胞进入分裂期 ,并推断其对小鼠胸腺淋巴细胞增殖的促进作用与其促进小鼠胸腺淋巴细胞内钙释放有关。

肉苁蓉多糖的分离、纯化和鉴定

目的 分离、纯化和鉴定壮阳中药肉苁蓉 Cistanche deserticola中的多糖成分。方法 经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白得到的粗多糖 ,再经 DEAE- Sephadex A- 5 0离子交换层析和 Sephacryl S- 2 0 0凝胶柱层析得到纯净的肉苁蓉多糖 (CDPS) ,用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖。结果 红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰 ,紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰。结论 本实验所提取的肉苁蓉多糖为单一、纯净的多糖。

肉苁蓉多糖的纯化及其对T细胞功能调节的研究

研究肉苁蓉主要成分之—─—多糖对小鼠胸腺T细胞的功能调节。方法：采用沉淀法获肉苁蓉粗多糖，以DEAE－SephadexA－50和SephacrylS－200柱层析，获得肉苁蓉多糖（CDPS）。再采用噻唑蓝比色法（MTT）观察CDPS对小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应的影响及对正常小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的影响。结果：CDPS纯化后经SephacrylS－200鉴定为单一对称峰。CDPS体外实验，在12．5～200μg／ml浓度范围内，有单独和协同ConA、PHA促进小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用（P＜0．01）。CDPS在100μg／ml浓度时，能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的能力．其IL－2活性明显高于对照组（P＜0．01）。结论：肉苁蓉多糖能增加小鼠脾、胸腺淋巴细胞的增殖反应，且与ConA、PHA有协同刺激小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用；并能显著提高小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL－2。

DR双能量减影技术在胸部外伤肋骨骨折的应用和诊断价值

目的:评价DR双能量减影技术在胸部外伤性肋骨骨折诊断价值。方法:收集2008年12月～2009年5月来我院就诊的47例胸部外伤患者,对疑似肋骨骨折患者选择性进行DR双能量减影胸部正位及肋骨斜位X线检查,分别获得标准影像、软组织影像和骨骼影像。结果:本组47例患者共摄取DES(双能量减影)片141幅,肋骨骨折19例,其中膈上肋骨骨折11例,膈下肋骨骨折8例,单侧肋骨骨折18例,双侧肋骨骨折1例,正常28例。结论:DR双能量减影骨骼影像可清晰显示肋骨骨折,明显提高了肋骨骨折的诊断。应用DR双能量减影技术对可疑胸部外伤性肋骨骨折具有较高的应用价值,可提高胸部外伤性肋骨骨折的检出率。

生物电磁学研究的难点及可能突破

文中分析了目前在生物电磁学研究领域中存在的难点和困难,提出了未来研究中可能的突破方向,供我国生物电磁学研究领域的学者参考。

双向凝胶电泳比较三种常用蛋白质提取方法

组织(或细胞)的蛋白质提取效率直接影响蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)的分辨率.为探索建立适用于人乳腺癌细胞株MCF-7蛋白质提取的最佳条件,比较目前在双向凝胶电泳中常用的3种蛋白质提取方法对MCF-7细胞总蛋白的提取效率.MCF-7细胞经培养后,分别采用M-PER试剂、标准裂解液或含硫脲裂解液提取其总蛋白质,然后进行双向凝胶电泳,并根据凝胶上蛋白质斑点的丰度和分布特点判断所得双向电泳图谱的质量,以确定MCF-7细胞蛋白质提取的相对最佳方法.结果显示,M-PER试剂法得到的图谱分辨率较低,蛋白质主要集中分布在分子量15～70 kD,pH 4.7～6.3的范围内;标准裂解液法得到的图谱分辨率有所提高,蛋白质分布比M-PER试剂法得到的图谱广;硫脲裂解液法得到的图谱是三者中分辨率最高的,尤其是高丰度蛋白和高分子量蛋白分离效果比前两者好.结果表明,在3种常用的蛋白质提取方法中,硫脲裂解液对细胞蛋白质的溶解性最佳,相对更适合于提取MCF-7细胞的蛋白质,并与双向凝胶电泳条件更兼容.

细胞裂解液对蛋白质定量方法的影响

目的：观察不同细胞裂解液对Bradford法和bicinchoninic acid（BCA）法的影响，以确定适合蛋白质组学研究中细胞全蛋白含量的定量方法。方法：采用Bradford法和BCA法测定牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）样品溶液，样品BSA溶液分别由双蒸水和不同裂解液（荧光差异双向凝胶电泳裂解液、三种传统双向凝胶电泳裂解液）配制；然后，采用这两种方法测定上述裂解液所提取的细胞全蛋白样品；采用Bradford法定量反复冻融、不同比色杯和不同时期标准曲线下的样品。结果：各细胞裂解液对Bradford法均有显著性影响，使所定量的BSA浓度普遍偏高1．2至2倍，但定量值可随着加样浓度的增加而增加（r=0．989～0．996，P〈0．05）；各裂解液对BCA法也均有显著性的干扰，多数定量结果超出仪器读数范围；对于同批全蛋白溶液样品，BCA法的定量结果与Bradford法相比可有千倍差异；反复冻融后蛋白浓度变化统计学上无显著性差异，但有下降趋势，不同比色杯和不同时期标准曲线对Bradford法无显著影响。结论：Bradford法是蛋白质组学中细胞全蛋白定量的较适方法，但需根据具体实验进行优化。

工频磁场对人晶状体上皮细胞DNA双链断裂的影响

目的:采用γH2AX免疫荧光法观察工频磁场对人晶状体上皮细胞DNA双链断裂的影响。方法:将人晶状体上皮细胞暴露于0.4 mT、50 Hz工频磁场2 h、6 h、12 h、24 h、48 h,以0.1μmol/L的DNA损伤剂4-硝基喹啉-1-氧化物作用1 h作为阳性对照,结束处理后进行γH2AX免疫荧光检测。计算细胞平均焦点数。将细胞平均焦点数及焦点阳性细胞率作为评价细胞DNA双链断裂程度的指标。结果:工频磁场暴露24 h的平均焦点数、γH2AX焦点阳性细胞率分别为(2.93±0.43)、(27.88±2.59)%,与假辐照组(1.77±0.37)、(19.38±2.70)%相比,差异具有显著性(P<0.05);工频磁场暴露48 h的平均焦点数、γH2AX焦点阳性细胞率分别为(3.14±0.35)、(31.00±3.44)%,与假辐照组相比,差异具有显著性(P<0.01);而工频磁场暴露2 h分别为(2.11±0.61)、(22.44±5.09)%,6 h分别为(2.18±0.47)、(22.59±3.08)%和12 h分别为(2.35±0.43)、(23.35±2.93)%,与假辐照组比较,差异没有显著性(P>0.05)。结论:体外实验表明,0.4 mT工频磁场长时间辐照可以使人晶状体上皮细胞DNA双链断裂增加。

射频电磁场对人树突状细胞的表型和功能影响的体外研究

目的:研究手机射频电磁辐照对人树突状细胞(DC)的表型和功能的影响,为评价手机射频电磁场对免疫系统功能的影响提供实验依据。方法:用比吸收率(SAR)为4 W/kg的1800 MHzGSM射频电磁场间断(5 min开10 min停模式)辐照DC细胞0 h、1 h、12 h或24 h,以流式细胞仪检测各处理组DC表面HLA-DR和协同刺激分子(CD80、CD86、CD40及CD11c)的变化;以CCK-8试剂检测各组DC的同种混合淋巴细胞反应(MLR)能力的差异;以ELISA双抗体夹心法检测各组DC分泌细胞因子IL-12p70、TNF-α功能的差异。结果:与假辐照组相比,各辐照处理组DC表型分子HLA-DR、CD80、CD86、CD40的阳性细胞百分率均明显下降(P<0.05),但CD11c无明显变化;各辐照处理组DC的同种MLR能力明显降低(P<0.05),尤其以24 h处理组为甚。各辐照处理组DC的IL-12p70、TNF-α的分泌无显著差异。结论:在本实验条件下,射频电磁场辐照对DC表面分子的表达及对同种T细胞的刺激能力具有一定的抑制作用。

玉米赤霉烯酮对细胞间隙连接通讯的影响

目的 了解真菌性雌激素玉米赤霉烯酮 (ZEA)对细胞间隙连接通讯 (GJIC)的影响。方法 用荧光漂白后恢复 (fluorescenceredistributionafterphotobleaching ,FRAP)技术 ,在激光扫描共聚焦显微镜下观察ZEA对HaCaT细胞GJIC功能的影响。结果 ZEA在 0 1μmol/L对HaCaT细胞的GJIC没有明显影响 ,但在 1～ 10 0 μmol/L浓度下都有明显的抑制作用。ZEA不能有效地拮抗TPA引起的GJIC抑制。结论 ZEA在 1μmol/L以上就能抑制GJIC功能 ,提示它在一定条件下可能有促癌作用。

儿童胸部DR降低辐射剂量的可行性分析

目的探讨儿童胸部数字化X线摄影(DR)降低辐射剂量的可行性。方法将0～14岁的儿童分为0～1岁、1～3岁、3～7岁、7～11岁、11～14岁5个年龄段,每个年龄段180例,共900例,随机分成A、B、C 3组,A组为Kodak DR 3000固定毫安秒组,B组为Kodak DR 3000自动毫安秒组,C组为Philips DR自动毫安秒组。对3组之间的毫安秒(mAs)均数(辐射剂量)和图像质量进行比较。结果 (1)3组mAs均值比较,C组比A组和B组分别降低4.89mAs、2.01mAs,降低幅度为81.5%、64.5%,3组毫安秒均值组间比较差异有统计学意义(F=16 814.679,P<0.01),即C组mAs均值最小,辐射剂量最低。(2)3组共900幅图像质量均能够满足临床诊断的要求,差异无统计学意义(χ2=5.095,P>0.05)。结论在获得满意图像质量前提下,Philips DR自动毫安秒组更能体现儿童摄影正当化及最优化原则。

数字化动态观察下静脉肾盂造影应用的体会

目的:探讨动态观察下静脉肾孟造影应用的价值。方法:分析200例常规静脉肾孟造影后即行X线电视动态观察平片及X线电视动态观察征象。结果:15 min内全肾盂、肾盏、输尿管、膀胱显影满意者120例,占60%,一侧肾盂、肾盏输尿管显影满意,另侧满足诊断显影共36例,占18.4%,其中26例单侧显示稍慢,仍能在30min内满足诊断要求显示,占13%,8例一侧不显影,占4%,5例造影失败。肾孟肾盏显影正常情况下可见肾盂及输尿管蠕动征象。结论:X线电视动态观察应用于静脉肾孟造影有很高的应用价值。

视频显示终端脉冲磁场对细胞间隙连接通讯功能的影响研究

目的：研究视频显示终端（ＶＤＴ）脉冲磁场对细胞间隙连接通讯功能的影响。方法：用１５．６ｋＨｚ、峰值强度为２００ μＴ的脉冲磁场（ＰＭＦ）和（或）十四酰基咐拜醇酯（ＴＰＡ：５ ｎｇ／ｍ ｌ）对培养的中国仓鼠肺成纤维细胞（ＣＨＬ）进行辐射２４ ｈ，采用离子电渗注射法观察荧光黄向与其接触的周围细胞的传递情况。结果：ＴＰＡ对细胞间隙连接通讯（ＧＪＩＣ）功能具有抑制作用，与空白对照组相比有显著差异（Ｐ＜ ０．０１），单纯ＶＤＴ组对ＧＪＩＣ无抑制作用（Ｐ＞ ０．０５），亦未见该脉冲磁场对ＴＰＡ的抑制作用有增强效应。结论：视频显示终端脉冲磁场（１５．６

高等学校公共卫生实验教学示范中心建设与体会

通过分析国内高校"公共卫生类"实验教学示范中心建设和实验教学改革情况,总结了示范中心建设的指导思想、"模块化"实验教学体系的意义和内涵以及整合与优化校内外教学资源的思路,并结合本中心实践,提出了几点建议。

儿童胸部DR图像质量优化的临床研究

目的探讨依儿童年龄设置DR管电压优化儿童胸部图像质量的可行性。方法 0至14岁儿童被分成0～、1～、3～、7～、11～14岁五个年龄段,每个年龄段再被随机分成优化组与对照组进行DR摄影。优化组：根据年龄设置不同千伏值自动控制曝光DR摄影;对照组：常规千伏值自动控制曝光DR摄影。辐射剂量计量用剂量面积乘积（DAP）,图像质量用可视化分级分析评分（VGAS）,m As、DAP和VGAS均值使用t检验进行统计学处理。结果优化组与对照组之间m As均值差异有明显统计学意义（t=43.276,P=0.000〈0.001）;优化组与对照组之间DAP均值差异没有统计学意义（t=-0.967,P=0.228〉0.05）;优化组与对照组之间VGAS均值差异有明显统计学意义（t=23.738,P=0.000〈0.001）。结论我们认为在不增加儿童辐射剂量的条件下,依儿童年龄设置DR胸部管电压能改善儿童胸部图像质量。

儿童DR胸片图像质量一致性评价分析

目的比较三位影像医师用视觉特征分级方法(VGC)对儿童DR胸片图像质量评价的一致性,并确定该方法在临床工作中的客观稳定性及可重复性。方法由具有不同工作年限,不同职称的三位影像医师用VGC评分法分析496例儿童DR胸片,并对其结果进行一致性分析,比较三位影像医师间的Kappa系数,分析其一致性及可重复性。结果三位影像医师间评价图像质量的一致性高,Kappa系数分别为:0.867、0.883、0.830。结论不同观察者间对儿童DR胸片图像质量评价具有高度一致性,VGC评分法在临床实践中客观稳定,应用价值较高。

电磁辐射的生物学效应及其应用和预防

由中华人民共和国卫生部、世界卫生组织和国际非电离辐射防护委员会联合发起，浙江大学生物电磁学浙江省重点实验室和中同疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所主办的第3届电磁辐射与健康国际研讨会暨2003年全国电磁辐射生物学学术会议于2003年10月13～17日在广西桂林举行。会议得到了世界卫生组织、国家自然科学基金委员会、浙江大学汤永谦学科建设发展基金、浙江大学医学院和移动电话制造商论坛的赞助。