大熊猫脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及miRNAs富集分析

大熊猫脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)通过旁分泌所释放的外泌体在大熊猫保健与疾病治疗方面具有一定的应用前景。本研究旨在建立大熊猫UC-MSCs外泌体分离方法,开展生物学特征分析和分子鉴定,并研究UC-MSCs外泌体中miRNAs的种类与功能。采用超速离心法从大熊猫UCMSCs培养上清中成功分离外泌体,通过透射电子显微镜进行形态学观察,纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径大小,蛋白免疫印迹法检测特异性分子标记表达。采用Small RNA测序技术对UC-MSCs外泌体中的miRNAs进行鉴定,并对其靶基因进行了预测与功能分析。结果显示,大熊猫UC-MSCs外泌体呈圆形杯托状结构,直径为(79.15±4.81)nm,外泌体标志蛋白CD81与TSG101呈阳性表达而CALNEXIN呈阴性表达。大熊猫UC-MSCs外泌体中的miRNA主要为miR-148-3p(30.28%)与miR-21-5p(21.72%)。本研究首次从大熊猫UC-MSCs培养上清中分离出外泌体,并对其所含的miRNAs进行富集分析及功能预测,为大熊猫UC-MSCs外泌体后续的功能研究及应用奠定基础。

基于.NET的课程资源与教学管理平台设计与开发

系统采用三层架构开发模式,以构建基于.NET技术的课程资源与教学管理系统为核心,探索通过WEB技术的方式实现课程资源与教学管理平台解决方案。分别实现了不同用户的用户管理、课程管理、用户课程管理、课程资源管理、课程公告管理、课程留言板管理、作业管理、点名管理、在线答疑、教师管理等系统功能。

高等农业院校动物繁殖学教学改革问题与思考

动物繁殖学是高等农业院校动物科学专业的主干课程之一,实践性和实用性强。如何对动物繁殖学课程的理论教学和实验实践教学进行科学、有效的教学改革,是当前亟需解决的问题。本文从动物繁殖学理论和实验实践教学中存在的问题着手,分析了当前动物繁殖学的教学现状,并提出进一步教学改革的建议和措施。

基于.NET的精品课程网络平台分析与设计

系统采用三层架构开发模式,以构建基于.NET技术的精品课程教学管理平台的设计与开发,探索通过WEB技术的方式实现精品课程教学管理平台解决方案。分别实现了前台精品课程申报网站、课程网站的浏览以及不同用户的后台管理功能。

基于椭圆曲线密码体制的安全电子邮件系统

基于椭圆曲线的公钥密码体制是密码学研究的一个新课题,这种密码体制具有速度快、安全性高的优点。该文构造了一类椭圆曲线加密算法,并设计了基于该算法的安全电子邮件系统。

用ADO.NET实现三层结构

基于ADO.NET数据库访问模式,采用Visual Studio2005开发平台,通过实例介绍一种三层体系结构程序的实现方法。

一种通用的精品课程网络平台设计算法

采用三层架构开发模式,构建基于.NET技术的精品课程教学管理平台的设计,探索通过WEB技术的方式实现精品课程教学管理平台解决方案。实现了通用精品课程申报网站、课程网站的菜单信息与相应页面内容的设计算法。

PHP在动态网页中的应用

以服务器端嵌入式脚本语言PHP在动态网页中的应用为题,从PWSWeb服务器、PHP系统、Mysql数据库的安装、设置入手,叙述了动态网页制作所需的工作环境,并给出应用实例。

基于移动Agent的选课系统的分析与设计

对W eb选课系统进行了详细的分析,提出了一种基于移动Agent的W eb选课系统系统设计方案、体系结构和总体框架,并给出了系统实现的关键技术和相关的数据库设计。

IT技术类实验教学建设与改革设想

本文从实验教学体系建设、师资队伍建设、实验室建设改革与设想等方面,探讨了计算机IT实验室建设的思路及体会。

项目教学在“C#.NET程序设计”教学中的应用

.NET是微软公司推出的一种新的战略,是微软面向互联网时代构筑的新一代平台,随着互联网和移动设备的发展,它的应用得到了迅猛的发展。为了提高学生在实际中解决问题的能力与创新能力,改革与创新计算机教学的方法势在必行。在"C#.NET程序设计"教学中,通过基于项目的协作学习活动的开展,给学生创设真实问题情境和协作学习的环境,激发学生学习兴趣的同时,提升学生的综合能力,对计算机类教学有借鉴意义。本文通过一个具体的案例来描述这样一个过程,来探讨项目教学过程中应注意的一些问题和项目教学的优劣。

基于.NET的多层架构应用系统设计方法

基于ADO.NET数据库访问模式,采用Visual Studio 2008开发平台,通过实例介绍一种多层体系结构程序的设计方法。

“ASP.NET程序设计”课程与实践性教学研究

"ASP.NET程序设计"是计算机专业的一门重要的专业选修课,也是计算机专业学生在学习阶段综合性、实践性比较强的一门程序设计课程。文章结合本课程在教学以及实践性教学研究实际,提出了一种以"项目导向,任务驱动"为教学模式,"教学练一体化"为教学思想的改革模式。

基于关联规则挖掘的入侵检测系统分析与设计

分析入侵检测方法、入侵检测系统基本框架、关联规则数据挖掘的基本概念、挖掘的基本过程以及网络攻击方法。提出一种基于关联规则挖掘的异常模式入侵检测系统的设计方案。

中国荷斯坦奶牛OPN基因内含子4多态性及其与产奶性状的相关分析

研究采用PCR产物直接测序的方法,对278头中国荷斯坦奶牛的OPN基因内含子4进行单核苷酸多态性分析,并研究了不同基因型与产奶性状的相关关系。结果表明:OPN基因内含子4有TT、CT和CC 3种基因型,基因型频率分别为0.3309、0.5108和0.1583;该位点突变处于Hardy-Weinberg平衡状态,且PIC为0.3676;CC基因型与中国荷斯坦奶牛的乳脂率和乳蛋白率呈显著相关。说明C等位基因对泌乳性状具有加性效应,OPN基因可以作为中国荷斯坦奶牛泌乳性状的候选基因。

孕酮、干扰素τ对牛子宫内膜上细胞外基质及其相关配体表达的影响

为探索干扰素τ(IFN-τ)、孕酮对牛子宫内膜上细胞外基质(ECM)及其配基基因表达的影响,本研究在体外培养的牛子宫内膜细胞(bECs)培养液中,分别添加孕酮、bIFN-τ、孕酮和bIFN-τ混合物培养24h后,通过荧光定量PCR技术,检测bECs上Collagen、Laminin、Fibronectin、THBS和Tenascin等ECM基因和ECM配基基因Syndecan、CD44、CD47和RHAMM的表达。结果表明:在体外培养的牛子宫内膜细胞上,bIFN-τ显著地诱导了Tenascin、Collagen、RHAMM和Laminin基因的表达,孕酮显著地诱导了CD44、Fibronectin、RHAMM和Laminin基因的表达,但当bIFN-τ和孕酮联合作用时,CD44、THBS基因的转录水平受到抑制,Tenascin、Fibonectin、Colla-gen基因的转录水平恢复到对照组转录水平。研究结果显示,在胚胎植入过程中,IFN-τ和孕酮可能对牛子宫内膜上ECM及其配基基因表达具有调控作用。

中国荷斯坦奶牛PPARGC1A基因内含子9的SNP与产奶性状的相关分析

采用PCR产物直接测序的方法,对213头中国荷斯坦奶牛的PPARGC1A基因进行单核苷酸多态性分析,并研究不同基因型与产奶性状的相关关系。结果表明,PPARGC1A基因内含子9存在C>T SNP位点,可分为有CC、CT和TT这3种基因型,基因型频率分别为0.3568、0.6291和0.0141;该位点突变偏离Hardy-Weinberg平衡状态且中度多态;CC基因型与中国荷斯坦奶牛的乳脂肪率显著相关。PPARGC1A基因可以作为研究中国荷斯坦奶牛泌乳性状的候选基因。

哺乳动物胚胎体外共培养系统研究进展

该文较全面地概括了哺乳动物胚胎体外共培养系统的发展和现状 ,从共培养系统的体细胞类型以及胚胎发育的阶段等方面阐述了影响体外共培养效果的因素 。

小鼠腔前卵泡的分离采集和体外成熟研究

采用机械法和酶法结合机械法分离采集小鼠卵巢 ,每只小鼠可获腔前卵泡 5 3 2 5和 5 7 2 9枚 (P <0 0 5 )。成年小鼠腔前卵泡在体外培养 9d ,换用成熟培养液继续培养 2 4～ 2 8h后 ,3种不同培养系统中卵泡的成熟分裂率分别为 5 47%、3 85 %和 9 31%。表明EMEM +5 %FCS +0 2 3mmol/mL丙酮酸钠 +2 0 μg/mLFSH +0 0 5mmol/mL次黄嘌呤 +2 0 0IU/mL青

波尔公羊精液的品质、保存稀释液和冷冻技术的研究

本试验对 3只 1～ 2岁德国波尔公羊的精液品质、精液保存稀释液和制作冻精技术进行了研究。结果表明 :①引进的波尔公羊的射精量、精液 pH值、密度、颜色、活率和畸形率均属正常范围 ,精子密度高达 5 5亿 /ml左右 ,但个体间差异较大。②比较 3种精液保存稀释液 [三羟甲基氨基甲烷—卵黄—柠檬酸 ( 1号 )、葡萄糖—卵黄—柠檬酸三钠 ( 2号 )、葡萄糖—卵黄—柠檬酸 ( 3号 ) ]对保存精子活力的影响 ,3号稀释液的保存效果极显著优于 1号和 2号 (P <0 .0 1)。③在制作冻精技术方面 ,对增进稀释液中的抗菌作用、防止冷冻对精子的致死作用、防止加入甘油可能对抗菌素抑制作用产生干扰和可能使精子形态受到损伤等方面进行了研究 。