血管内皮生长因子在哺乳动物细胞中的表达

目的 :建立血管内皮生长因子 (VEGF)的真核表达系统 ,获得具有生物活性的VEGF蛋白质。方法 :采用RT PCR方法 ,从人胎肝组织中克隆VEGF全长cDNA ,构建重组真核表达质粒pcDNA3 VEGF16 5 ,用Lipofectin介导转染入Hela细胞 ,收集转染的Hela细胞培养上清 ,用RT PCR和Westernblot法检测外源基因的转录和表达 ,Miles及人脐静脉内皮细胞增殖实验检测上清中VEGF16 5的生物学活性。结果 :转染的Hela细胞有VEGF16 5的转录和表达 ,且证实所表达的VEGF16 5具有增加血管通透性和内皮细胞增殖活性。结论 :构建的VEGF16 5真核表达系统能够表达具有生物活性的VEGF16 5蛋白质。

一种简易的制备感受态大肠杆菌细胞的新技术

本文报道了一种制备和贮存感受态大肠杆菌细胞的新技术。该方法具有简单、省时、稳定、重复性好及转化率高等优点。所制备的感受态细胞,可用于转化和转染;对于空质粒和重组质粒,具有同样的转化效果。

DHCCR重组DNA细菌克隆

我们分别采用Ca^(2+)和Mg^(2+)处理大肠杆菌JM109进行转化实验,使含有1.25——双羟胆钙化醇受体(1,25—Dihydroxy cholecalciferol receptor,DHCCR)基因的质粒转化到细菌中进行克隆获得成功。经氨苄青霉素(AMP)培养基上筛选及限制性酶切分析,证明转化子为阳性。

血管内皮生长因子研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种能特异地作用于血管内皮细胞的生长因子。在生理和病理情况下均有表达。本文就VEGF的分子特征、VEGF受体及信号传导机制、表达调节和生物学特征作一综述。