miR-377调控THEM4对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT的作用

目的:探讨微小RNA-377(miR-377)对硫酯酶超家族成员4(THEM4)的靶向作用及对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)的影响。方法:将人近端肾小管上皮细胞HK-2分为正常葡萄糖组(NG组:5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组:30 mmol/L葡萄糖)、HG+miR-NC组(HG+转染miR-NC)、HG+miR-377组(HG+转染miR-377)、HG+antimiR-NC组(HG+转染anti-miR-NC)、HG+anti-miR-377组(HG+转染anti-miR-377)、HG+miR-377+pcDNA3.1组(HG+共转染miR-377+pcDNA3.1)、HG+miR-377+pcDNA3.1-THEM4组(HG+共转染miR-377+pcDNA3.1-THEM4)、HG+miR-377+si-NC组(HG+共转染miR-377+si-NC)和HG+miR-377+si-THEM4组(HG+共转染miR-377+si-THEM4)。qPCR检测miR-377表达,Western blot检测Vimentin、E-cadherin、THEM4蛋白表达,生物信息学预测和双荧光素酶实验分析miR-377与THEM4的靶向关系。结果:与NG组相比,HG诱导的HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量明显增加,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05)。与HG+miR-NC组相比,HG+miR-377组HK-2细胞的miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量显著升高,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05)。与HG+anti-miR-NC组相比,HG+anti-miR-377组HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量显著升高(P<0.05)。miR-377靶向调控THEM4表达。与HG+miR-377+pcDNA3.1组相比,HG+miR-377+pcDNA3.1-THEM4组HK-2细胞中THEM4、E-cadherin蛋白水平明显升高,Vimentin蛋白表达量显著降低(P<0.05)。与HG+miR-377+si-NC组相比,HG+miR-377+si-THEM4组HK-2细胞的THEM4、E-cadherin蛋白表达量明显降低,Vimentin蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论:miR-377通过靶向THEM4调控高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT。