百草枯对血红密孔菌胞外漆酶活性和胞内抗氧化酶活性的影响

研究了百草枯对血红密孔菌(Pycnoporus sp.SYBC-L3)产胞外漆酶活性和胞内抗氧化酶活性的影响,以期对提高木质素降解酶活性提供理论依据。结果表明:百草枯能够提高漆酶和抗氧化酶的活性,但对胞外漆酶活性的促进作用比对胞内抗氧化酶活性的促进作用明显。百草枯加入后,羟自由基活性和丙二醛的浓度均呈先升高后下降趋势,说明对血红密孔菌产生了氧化胁迫,但菌株的抗氧化系统能够有效地清除自由基,从而阻止氧化剂对菌体的氧化伤害。百草枯作为一种氧化胁迫剂,可以提高木质素降解酶活性,有利于木质素的降解。

基因芯片技术及其在微生物检测中的应用

基因芯片是一种新型发展的高级技术,引用基因芯片能够对很多遗传信息进行高速和高质量的检测,基因芯片的特点是具有高通量和并行检测.传统检测模式会遇到很多难题,但是基因芯片的应用很好地解决了这些问题,基因芯片的应用范围非常广泛,在基因表达分析、核酸多态性分析、基因测序等生物学领域发挥巨大的作用.

无菌注射剂生产中污染的控制及无菌检查

本文阐述了无菌注射剂生产中存在的污染问题,从剂型选择的合理性到无菌检查的局限性进行分别介绍,同时阐述了不同灭菌方式可以保证的无菌水平,最后根据目前国内注射剂的情况提出关于提高注射剂无菌保证水平的相关对策与建议。

象山港中部养殖区细菌群落结构的特征及其在生境修复过程中的变化

象山港地处浙江中部沿海(121°25′122°03′E,29°05′29°46′N),港内平均水深20 m左右,最深达55 m。近年来,象山港网箱养殖规模不断增大,陆源污染加重,导致象山港的环境问题日益严重。为了找到象山港网箱养殖环境的有效修复方法及修复效果评价方法,采用海带和龙须菜等大型藻类对象山港中部网箱养殖区进行生境修复,同时应用总DNA提取、PCR-变性梯度凝胶电泳分析及克隆、测序和生物信息学分析等方法,研究了网箱养殖区和藻类养殖区沉积环境中细菌群落的特征及其在生境修复过程中的变化。结果表明,象山港网箱养殖区细菌种类丰富,由7个门的细菌组成。生境修复使网箱养殖区细菌多样性有增加趋势,优势种群由放线菌门、海仙菌属和苍白杆菌属的细菌代替了不动杆菌属、嗜氨基杆菌和假单胞菌属的细菌;藻类养殖区由5个门的细菌组成,细菌群落结构相对比较稳定。冗余分析结果显示,氨氮和COD是沉积环境细菌群落结构的主要影响因子,细菌群落结构的好转趋势与化学因子的好转是一致的,这说明采用大型藻类对网箱养殖区环境进行生境修复具有明显的效果,同时可以确定细菌群落结构可作为生境修复效果评价的指标之一。本研究通过科学分析藻类养殖对养殖区环境的影响及评价生境修复的效果,可为实现生态系统调控与管理、以及养殖业的可持续发展提供理论参考依据。

真菌漆酶的性质、生产及应用研究进展

作为一种含铜的多酚氧化酶,真菌漆酶比细菌漆酶、植物漆酶等具有更好的热稳定性、金属离子耐受性及更高的底物催化氧化性,在工农业及环境领域的应用中得到了较高的关注。目前普遍认为,限制漆酶广泛应用的因素在于漆酶的生产规模、成本与性质。真菌漆酶的生产模式包括固态发酵和液体发酵,工业生产基本以液体发酵为主。除了在染料脱色、染织废水处理、纸浆漂白等过程中的应用,最新的研究不断拓展了漆酶新的用途,对近年来真菌漆酶的发酵生产、酶学性质及应用研究中的最新结果进行了概述。

高温大曲中两株产酱香菌的分离鉴定

为提高酱香型白酒风味,以高温大曲为原料,采用高温培养法和麸皮固体培养基固态发酵筛选出20株芽孢杆菌.通过对各菌株产香实验筛选出2株产酱香的芽孢杆菌(GX07和GX08),并结合菌株生理生化和16S rDNA基因序列对两株菌株进行鉴定.结果表明,GX07为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),GX08为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).

应用技术大学发酵工程课程教学改革探索

发酵工程是一门实践性和应用性很强的课程,发酵生产过程中很多问题的解决都离不开理论的支持,更离不开经验的积累。为了提高发酵工程课程的教学效果,高校应坚持"走出去"与"请进来"相结合,加强教师队伍建设;教师应通过精心组织和选择教学内容、灵活选用教学手段、合理开展双语教学,激发学生的学习兴趣,充分提高教学效果;教师要正确认识实践教学环节的重要作用,在重视基础实验和综合性实验的基础上,通过开放式实验室、设置大型实验等途径,不断提高学生的知识运用能力、团队合作能力和创新意识。

黑曲霉菌渣综合利用研究进展

黑曲霉菌渣是黑曲霉经过工业发酵所需产物之后的副产物,资源储量丰富。目前利用黑曲霉生产的制剂种类繁多,对菌渣综合利用的报道却相对较少。已有的研究表明黑曲霉菌渣不仅可作为饲料添加剂、有机肥料或土壤改良剂得到直接应用,也可用于精制,作为食品、药品和化妆品等行业的主要原材料,实现高附加值转化应用。还可作为生物吸附剂用于去除水体中的污染物等。本文结合目前国内外对黑曲霉菌渣在各领域研究及利用现状,综述了黑曲霉菌渣高附加值转化与利用的研究进展,可以为工业发酵废渣资源化利用提供理论参考。

动物微生物学课程体系的建设与教学改革探索

动物微生物学课程在动物科学专业教学中发挥着积极作用。随着高校教育制度改革的推进,动物微生物学课程体系的改革也势在必行。本文通过改变传统教学模式,激发学生学习激情;丰富授课内容,增加课堂趣味性;理论应用于实践,加强实验教学等三个方面的实践和探索,提高了动物微生物学教学质量,以调动学生的学习积极性和主动性,全面培养学生的综合素质和创新能力,适合时代发展的需要。

槲皮素对铜绿假单胞菌LasB诱导THP-1巨噬细胞应激反应的保护作用

目的:探讨槲皮素对LasB诱导THP-1巨噬细胞凋亡、炎症反应和氧化应激的保护作用,旨在为槲皮素作为毒力抑制剂用于铜绿假单胞菌感染治疗提供借鉴和参考。方法:采用实验性研究。实验菌株为标准菌株,利用重组蛋白表达技术获得LasB蛋白,弹性蛋白刚果红法和荧光标记弹性蛋白法检测LasB酶活性。构建LasB诱导的THP-1巨噬细胞感染模型并使用槲皮素干预,CCK-8比色法检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态。TUNEL联合Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡。RT-qPCR和ELISA检测炎症细胞因子和环氧合酶水平。DCFH-DA荧光染色检测胞内ROS水平。采用单因素方差分析对实验数据进行统计学分析,多重比较采用Tukey检验。结果:成功获得相对分子质量33 000的纯度>90%的具有弹性蛋白水解活性的pLasB蛋白。pLasB(100 μg/ml)刺激下,THP-1巨噬细胞活力显著下降,细胞完整率明显降低,细胞凋亡率显著升高,炎性细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12和TNF-α水平显著上调,细胞内ROS荧光强度和 COX-2 水平明显增加。而在2.5 μmol/L、5 μmol/L和10 μmol/L浓度槲皮素干预下,THP-1巨噬细胞活力明显改善,细胞凋亡率从18.32%±0.17%分别降低至13.17%±0.20%、11.43%±0.06%和7.74%±0.04%( F=1 679, P<0.05);促炎细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-12和TNF-α显著下调,抗炎细胞因子IL-10显著上调;细胞内ROS荧光强度( F=86.92, P<0.05)和 COX-2表达水平( F=24.62, P<0.05)均明显下降。 结论:槲皮素能有效干预铜绿假单胞菌LasB诱导的THP-1巨噬细胞凋亡、炎症和氧化应激,可能作为铜绿假单胞菌的毒力抑制剂。

基于RNA-seq技术分析黄芩苷抑制铜绿假单胞菌生物膜的分子机制

目的探讨黄芩苷抑制铜绿假单胞菌生物膜的分子机制,为黄芩苷用于铜绿假单胞菌感染的辅助治疗提供理论依据和数据支撑。方法使用结晶紫染色、光学显微镜和荧光显微镜观察亚抑菌浓度黄芩苷对铜绿假单胞菌PAO1生物膜的影响,同时利用转录组测序(RNA-seq)技术分析PAO1基因表达情况,对差异表达基因进行功能富集和信号通路分析,并通过实时荧光聚合酶链反应(qPCR)和表型试验对涉及多个生物过程和代谢途径的差异基因进行验证。结果黄芩苷作用下,RNA-seq共筛选出差异表达基因1821个,其中下调基因1054个,上调基因767个,主要在生物膜形成、吩嗪类生物合成、群体感应系统及双组分系统等信号通路富集。黄芩苷对PAO172 h内形成的生物膜均具有抑制作用;qPCR和表型验证结果显示,黄芩苷可有效下调生物膜关键组分(包括胞外多糖和蛋白质)及其调控基因(包括pelA、pslA、algR、algD、pilA和filC)的表达水平;同时下调蛋白酶LasA、弹性蛋白酶LasB、绿脓菌素的产生和转录以及群体感应系统相关基因(包括lasR、rhlR、pqsR)和Ⅵ型分泌系统相关基因(hcp1、hcp2、hcp3)的转录水平。结论黄芩苷可通过下调群体感应系统和Ⅵ型分泌系统调控铜绿假单胞菌生物膜相关组分的表达和转录,进而抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,具有多靶点和多途径的特点。

象山港内西沪港海域沉积环境细菌群落结构的时空变化及其主要环境影响因子

为从微生物学角度揭示象山港内西沪港海域生态环境的健康状况,于2009年8月,2010年3月、5月、8月,2011年5月、8月采集了港底部和中东部的沉积物和水体样品,利用PCR-变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术分析了沉积物中细菌群落结构的时空变化,并结合冗余分析(Redundancy analysis,RDA)方法分析了细菌群落结构与水环境因子的相关性.PCR-DGGE分析表明西沪港内沉积物环境中的细菌类群主要有变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、绿弯菌门、酸杆菌门等,其中变形菌门细菌种类最多;沉积物样品分析结果表明,港底沉积环境2009年8月的优势菌群并不明显,之后的5个时期优势菌群依次变为红螺菌目、假单胞菌目、交替单胞菌目、绿弯菌门、伯克氏菌目;港中东部沉积物的优势菌群变化比较明显,6个时期依次变为乳杆菌目、假单胞菌目、假单胞菌目、弧菌目、假单胞菌目、乳杆菌目.RDA分析表明活性硅酸盐、无机氮、化学需氧量是影响港底细菌群落结构的主要水环境因子;活性硅酸盐、无机氮、氨氮是影响港中东部细菌群落结构的主要水环境因子,表明西沪港沉积物细菌群落结构的变化是多种环境因子共同作用的结果.

任务驱动法在微生物学实验教学中的应用

本实验以黄淮学院生物工程系生物工程专业大一学生作为实验对象,在其第一学期采用任务驱动教学模式开展微生物学实验课程教学。实验中,把40名学生随机分成两组,每组20人,以任务驱动教学模式教授实验组学生,以传统教学模式教授对照组学生。学期末,采用考试方法评估学生学习成绩,采用问卷调查方法评估学生对两种教学模式的满意度和对知识的掌握程度。实验结果表明两种教学模式中,学生更倾向于选择用任务驱动教学模式学习,实验组学生的期末成绩显著高于对照组学生的期末成绩(p < 0.05),说明任务驱动教学模式教学效果要优于传统教学模式的教学效果,该模式比传统教学模式更能提高学生的学习成绩。