腺病毒介导的心肌营养素-1对大鼠骨髓间充质干细胞神经分化的影响

目的探讨腺病毒（Adv）介导的心肌营养素-1（CT-1）对大鼠骨髓问充质干细胞（rBMSCs）向神经方向分化的影响。方法全骨髓贴壁筛选法分离培养rBMSCs，流式细胞术鉴定细胞表面标记性蛋白。将已纯化细胞分为4组：对照组、重组腺病毒增强型绿色荧光蛋白（Adv-EGFP）＋诱导州组（空病毒组）、Adv-EGFP-CT-1＋诱导剂组（CT-1组）及诱导剂组，分别向各转染组中加入对应的腺病毒液。转染后2d，除对照组外，其他各组均予神经分化诱导处理，于诱导后5h、3d和7d观察各组细胞形态，细胞免疫荧光检测各组巢蛋白（Nestin）、神经元特异性核抗原（NeuN）及神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果诱导处理后，除对照组外，其他各组均显示类神经细胞样形态改变，其中CT-1转染组变化最明显。诱导后5h Nestin检出阳性率最高，其中CT-1组阳性率[（86．31±4．27）％]均高于其他各组，差异均有统计学意义（P均〈0．001），随后逐渐下降，CT-1组较其他各组变化明显，差异均有统计学意义（P均〈0．001）；各时间点空病毒组与诱导剂组Nestin的阳性率差异无统计学意义（P均〉0．05）。诱导后5h，CT-1组NeuN、GFAP即有少量表达，随后NeuN、GFAP阳性率逐渐升高，至第7天时其阳性率[（64．41±3．65）％、（47．14±4．29）％]最高，其中，CT-1组各时间点NeuN、GFAP阳性率均高于其他各组，差异均有统计学意义（P均〈0．001）；各时间点空病毒组与诱导刑组NeuN、GFAP的阳性率差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论CT-1可促进rBMSCs向神经方向分化。