职业本科护理专业基础医学课程教学设计——以“人体形态学”课程“心脏解剖”为例

马克思主义基本原理教学是中国特色社会主义高等教育的本质特征之一,也是实现职业本科“职业性”与“本科性”的关键。本研究以护理职业教育基础医学课程中“人体形态学”课程“心脏解剖”一节为例,从教学分析、教学策略、教学实施过程、教学反思四个方面探讨马克思唯物辩证原理融入信息化教学设计的应用与实施,旨在为职业本科教育的专业基础课程建设提供参考。

从AMPK-mTOR信号途径研究淫羊藿总黄酮对衰老大鼠皮层自噬的调节作用

目的探讨淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对自然衰老大鼠皮层自噬的调节作用及分子机制。方法HE染色和Nissl染色观察大鼠皮层神经元形态学变化,Western blot检测自噬相关蛋白LC3、p62、Beclin1以及AMPK-mTOR信号途径关键蛋白在皮层组织中的表达水平。结果HE染色和Nissl染色结果显示,与青年对照组大鼠相比,衰老模型组大鼠皮层神经元丢失,排列散乱,且变性神经元数量增多,给予淫羊藿总黄酮干预后,神经元数量增多,变性神经元数量减少;Western blot结果表明,与青年大鼠相比,自然衰老大鼠下调p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达水平,上调p-mTOR/mTOR、p62蛋白表达水平,给予淫羊藿总黄酮干预后可上调p-AMPK/AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1蛋白表达水平,下调p-mTOR/mTOR、p62蛋白表达水平。结论TFE可上调自然衰老大鼠皮层自噬,其机制可能与调节AMPK-mTOR信号途径有关。

竹节参总皂苷对高脂高糖小鼠脑组织凋亡的保护作用

观察竹节参总皂苷(saponins from Panax japonicas,SPJ)对高脂高糖饮食小鼠脑组织凋亡的保护作用。昆明小鼠随机分成正常对照组、高脂高糖模型组和药物低(100 mg/kg)、高(300 mg/kg)剂量组,分别给予普通饲料、高脂高糖饲料、竹节参总皂苷低、高剂量饲料喂养。Western blot法检测抑凋亡相关蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、细胞色素C(Cytochrome C)、半胱天冬蛋白酶(Caspase-3和Caspase-12)、炎性因子诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)、IL-1β和NLRP3炎症小体包括NOD样受体家族3(NOD-like receptors,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1和抗氧化应激蛋白沉默信息调节因子1(Silence information regulator 1,SIRT1)、腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)磷酸化水平。与高脂对照组相比,竹节参总皂苷高剂量组中Bcl-2、SIRT1和p-AMPK分别升高了1.31倍、1.05倍、1.33倍,Bax、Caspase 3、Caspase 12、Cytochrome C、COX-2、iNOS、IL-1β、NLRP3、Caspase 1和ASC分别下降了34%、39%、60%、37%、41%、25%、43%、49%、31%、52%。竹节参总皂苷对高脂高糖小鼠具有抗凋亡作用,其机制与其调节NLRP3炎症小体及炎性因子,增加抗氧化应激相关蛋白有关。

竹节参多糖对LPS致小胶质细胞炎症反应的作用

目的:探讨不同浓度竹节参多糖对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞炎症反应的保护作用及其机制。方法:采用MTT比色法筛选出竹节参多糖对小胶质细胞的安全用药范围;一氧化氮试剂盒检测小胶质细胞NO释放水平;PCR法检测炎症因子IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA表达水平;免疫荧光法检测小胶质细胞中NF-κB的表达及定位。结果:3.125~50μg/mL竹节参多糖及1μg/mL LPS单独或共同作用对小胶质细胞增殖无明显影响。与LPS模型组比较,3.125、6.25、12.5、25、50μg/mL竹节参多糖均能不同程度抑制NO释放量,并能减少炎症相关因子IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA表达;25、50μg/mL竹节参多糖均能有效抑制小胶质细胞中NF-κB的核转移。结论:竹节参多糖可减轻LPS诱导的小胶质细胞炎症反应,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。

竹节参总提物对LPS诱导BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用

本文研究了竹节参总提物对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激所致的BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用及其机制。MTT筛选不同浓度竹节参总提取对小胶质细胞增殖影响;一氧化氮试剂盒检测NO表达水平;PCR检测IL-1β、TNF-α和i NOS的m RNA表达;免疫荧光检测NF-κB表达及定位。竹节参总提物在3.125~50mg/L对正常状态及LPS1μg/m L诱导的炎症状态下小胶质细胞生长均无明显影响;与正常组比较,模型组NO释放量是其11.82倍,TNF-α、IL-1β和i NOS的m RNA表达量分别是正常组的1.35、1.78和2.50倍,并且NF-κB核移位明显;与模型组比较,竹节参总提物在3.125~50mg/L均能不同程度抑制NO释放量,并减少IL-1β、TNF-α和i NOS的m RNA表达水平;25、50 mg/L竹节参总提物有效抑制了小胶质细胞中NF-κB的核移位。竹节参总提物可减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,其主要机制为抑制NF-κB的核移位,进而降低了炎症因子的分泌。

竹节参乙酸乙酯提取物对脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的影响及其机制研究

目的探讨竹节参乙酸乙酯提取物(EtOAc-PJ)对脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症损伤的保护作用及其机制。方法采用LPS(1μg·mL^-1)对BV2小胶质细胞进行诱导炎症反应,并以EtOAc-PJ 3.125、6.25、12.5、25μg·mL^-1进行干预。采用噻唑蓝法(MTT)检测EtOAc-PJ对BV2细胞增殖的影响;Griess法检测BV2细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量;逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平;免疫荧光法(IF)检测BV2细胞中核转录因子κB(NF-κB)的表达及定位;免疫印迹法(Western Blot)检测炎症小体3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)及IL-1β的蛋白表达情况。结果 3.125、6.25、12.5、25μg·mL^-1EtOAc-PJ单独作用或与1μg·mL^-1LPS共同培养24 h,对BV2细胞存活率均无明显影响(P>0.05)。与正常对照组比较,LPS模型组的BV2细胞上清液中NO含量显著增加(P<0.01);BV2细胞iNOS、IL-1β及TNF-αmRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);BV2细胞NF-κB p65核移位的水平明显增加;BV2细胞NLRP3、ASC、Caspase-1及IL-1β蛋白表达水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。与LPS模型组比较,EtOAc-PJ 6.25、12.5、25μg·mL^-1剂量组的BV2细胞NO释放水平明显降低(P<0.05,P<0.01);EtOAc-PJ 12.5、25μg·mL^-1剂量组的iNOS、TNF-αmRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),EtOAc-PJ 25μg·mL^-1剂量组的IL-1βmRNA表达水平明显降低(P<0.01);EtOAc-PJ 12.5、25μg·mL^-1预处理能明显抑制LPS诱导的BV2细胞NF-κB p65核转位;EtOAc-PJ各剂量组的BV2细胞NLRP3、ASC、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P<0.01),EtOAc-PJ 6.25、12.5、25μg·mL^-1剂量组的Caspase-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。结论 EtOAc-PJ可以通过抑制BV2小胶质细胞激活,减少炎症介质释放和促炎细胞因子表达,从而减轻LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应,其作用机制可能与抑制NF-κB活化及NLRP3炎症小体激活有关。