绵羊磷脂酶C zeta基因对绵羊卵母细胞孤雌激活的初步研究

旨在应用绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)基因对绵羊卵母细胞进行激活,探究是否可以作为一种新的卵母细胞激活物质。本研究构建了pEGFP-N1-PLCζ重组质粒,并将质粒注入绵羊MⅡ期卵母细胞,观察及统计PLCζ对卵母细胞的激活效果和胚胎发育的影响。结果表明,pEGFP-N1-PLCζ重组质粒可在卵母细胞中表达,并可自发激活卵母细胞孤雌发育。

口服中药促孕散对产后奶牛子宫复旧的影响

为了研究中药促孕散对奶牛产后子宫复旧的影响，试验采用中药促孕散对卵巢、子宫和恶露排放情况进行检查并统计发情率和受胎率。结果表明：处理组0—30d,0-45d的发情率分别是75％、90％，60d内的受胎率为65％；恶露排尽的平均时间为12．4d，比对照组提前6．6d；子宫颈、子宫孕角及卵巢活动的时间与对照组相比均极显著提前（P〈0．01）。说明促孕散能够加快子宫复旧过程以及奶牛生殖系统的恢复作用。

中药复方理囊散对奶牛子宫复旧期间生殖激素的影响

为探讨中药理囊散对产后奶牛生殖激素的影响,使20头荷斯坦奶牛于产后0、15 d口服中药理囊散,统计受胎率,通过酶联免疫法(ELISA)分析理囊散对产后奶牛血清中促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)含量的影响。结果显示,试验组(A组)45 d内的受胎率为70%,显著高于对照组(B组)。血清中FSH含量于产后15、30 d达到最大值,LH含量于产后20 d达到最大值,E2含量于产后20、30 d达到最大值,均极显著高于对照组同时期FSH、LH、E2的含量(P<0.01)。P4含量从产后15 d开始上升,于产后20 d达到最大值,极显著高于对照组(P<0.01),并于产后30 d下降,极显著低于对照组(P>0.05)。理囊散能刺激卵巢活动,提高产后奶牛血清中FSH、LH、P4、E2分泌水平,提升早期受胎率,缩短产犊间隔,对产后奶牛子宫机能的恢复具有显著作用。

中国美利奴绵羊磷脂酶C zeta基因表达载体的构建及原核表达

构建美利奴绵羊磷脂酶C zeta(PLCζ)融合蛋白表达载体,并在原核细胞内表达及纯化,为其特异性抗体的制备及生物学功能研究奠定基础。用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,亚克隆到原核表达载体pCzn1中,导入Arctic Express TM(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,收样后进行SDS-PAGE电泳或Western blot检验PLCζ的表达情况。用镍离子亲和层析的方法大量纯化融合蛋白。结果显示,重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明载体构建正确。pCzn1表达载体在Arctic Express TM(DE3)表达菌中能很好地表达融合蛋白。表达纯化后可获得了分子量约74ku的融合蛋白,符合预期大小。成功构建pCzn1-PLCζ原核表达载体,表达并纯化了其融合蛋白,Western blot试验表明其蛋白分子的完整性良好,这将有利于对PLCζ蛋白进行深入的研究。

口服中药促孕散对产后奶牛子宫复旧期间内分泌的影响

试验口服促孕散处理产后奶牛,通过直肠检查卵巢变化、子宫形态的恢复情况及统计发情率和受胎率,再结合酶联免疫吸附法(ELISA)检测中药处理组奶牛血清中FSH、LH、E2和P4激素水平的动态变化,进一步验证了促孕散对子宫复旧期间内分泌的影响。结果显示:1处理组30、45 d发情率分别是75%、90%,60 d内的受胎率为65%;2处理组血清中:FSH含量在5 d开始有上升趋势,30 d达到峰值,相比对照组试验中同一时期FSH含量差异极显著(P<0.01);LH含量在15 d有上升趋势,20 d达到峰值,相比对照组试验中同一时期LH含量差异极显著(P<0.01),30 d与对照比较差异不显著(P>0.05);P4含量在20 d后开始上升,20 d的含量极显著高于对照组(P<0.01),25 d达到最大值,与对照组比较差异不显著(P>0.05);E2含量在20和30 d出现2个波峰,均极显著高于对照组(P<0.01)。由此得出:促孕散可以加强产后奶牛的内分泌水平,进而起到了加快生殖系统恢复的作用。

理囊散对奶牛产后子宫复旧的影响

为探讨中药理囊散对产后奶牛子宫机能恢复的治疗效果,通过对荷斯坦奶牛产后2、15 d口服中药理囊散处理,直肠检查子宫形态、观察子宫内恶露排放情况以及发情时间,统计受胎率,血清学分析理囊散对产后促黄体素(LH)、促卵泡素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)浓度的影响。结果表明,处理组(A组)第1情期受胎率为65%,处理组中恶露排尽的时间、子宫孕角以及子宫颈恢复的时间要比对照组(B组)提前5 d;A组血清中FSH、E2含量均出现2个高峰期,FSH含量在产后15、30 d达到最大值,E2含量在产后20、30 d达到最大值,相比B组同一时期FSH、E2含量差异极显著(P<0.01);LH含量在产后20 d达到最大值;P4含量在产后15 d开始上升,20d达到(3.69±1.71)ng/m L,与B组同一时期P4含量差异极显著(P<0.01),产后25 d达到最大值,为(5.67±1.98)ng/m L,与B组同一时期P4含量差异不显著。理囊散能加快产后子宫恶露的排放,刺激卵巢活动,提高早期受胎率,缩短产犊间隔,对产后奶牛子宫机能的恢复具有显著的作用。