乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素通过Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子-κB信号通路缓解脂多糖诱导的断奶仔猪肠道炎症

本试验旨在研究乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪肠道炎症缓解作用的分子机制。试验选取24头健康、体重接近的27~28日龄“杜×长×大”三元杂交断奶阉公猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头猪。对照组(CON组)和LPS组饲喂基础饲粮,金霉素组(CTC组)饲喂基础饲粮+75 mg/kg的金霉素,合生素组(SYN组)饲喂基础饲粮+10 g/kg的乳果糖和2×109 CFU/kg的凝结芽孢杆菌。试验期32 d。试验结束时,对LPS组、CTC组和SYN组仔猪腹腔注射100μg/kg BW LPS,CON组注射相同剂量的生理盐水;注射4 h后屠宰,采集血清和空肠黏膜样本,测定炎症细胞因子含量及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路相关基因和蛋白表达。结果表明:1)与CON组相比,LPS刺激不仅显著提高血清促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)含量(P<0.05),还显著提高空肠黏膜促炎因子IL-6、IL-12和IFN-γ以及抗炎因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-10和转化生长因子-β1(TGF-β1)含量(P<0.05)。此外,与CON组相比,LPS刺激还显著提高空肠黏膜TNF-α、IL-1β与IL-10 mRNA相对表达量(P<0.05),且显著提高空肠黏膜TLR4、MyD88和NF-κB mRNA和蛋白相对表达量(P<0.05)。2)与LPS组相比,CTC组和SYN组血清IL-1β和IL-10以及空肠黏膜IL-6、IL-12、IL-4和IL-10含量显著降低(P<0.05),空肠黏膜TGF-β1含量显著提高(P<0.05),空肠黏膜TNF-α、IL-1β与IL-10 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),空肠黏膜NF-κB mRNA相对表达量以及TLR4和NF-κB蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);SYN组血清IL-6、IL-8、IL-12和TNF-α以及空肠黏膜IL-1β含量显著降低(P<0.05),空肠黏膜TLR4和MyD88 mRNA相对表达量以及MyD88蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。综上所述,在无抗饲粮中添加乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素替代金霉素可通过抑制断奶仔猪空肠黏膜TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,降低TNF-α和IL-1βmRNA相对表达量,改善空肠和血清炎症细胞因子水平,从而缓解LPS诱导的应激反应,提高断奶仔猪的抗应激能力。