三裂叶豚草花粉新型过敏原钙结合蛋白分子克隆,表达及致敏活性

目的研究三裂叶豚草花粉过敏原钙结合蛋白(Amb t polcalcin1)的基因信息和致敏情况。方法通过转录组测序分析结果,鉴定出一个潜在的Amb t polcalcin1基因序列;克隆Amb t polcalcin1基因,获得Amb t polcalcin1蛋白。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验(Western blot)研究Amb t polcalcin1基因的致敏性;并用ESPript3.0软件进行同源性分析。结果ELISA结果显示,三裂叶豚草花粉过敏原Amb t polcalcin1在三裂叶豚草花粉过敏患者血清中的IgE结合率为14%(14/100)。Western blot结果显示14份阳性血清中4份显示阳性条带。进化树分析结果显示,三裂叶豚草花粉Amb t polcalcin1与其近缘物种矮豚草属花粉中的两个过敏原Amb a 9.0101和Amb a 9.0102的同源性最高,分别为95.18%和93.98%。结论三裂叶豚草花粉过敏原钙结合蛋白Amb t polcalcin1在豚草花粉过敏患者的致敏率为14%。