Hsa-miR-663诱导型表达载体的构建及验证

为了研究hsa-miR-663在肿瘤细胞辐射应答通路中的功能,人工合成其前体并构建入表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-miR-663,进一步通过BP/LR重组反应将hsa-miR-663表达框转移至诱导型表达载体pTREx-DEST30中。然后将hsa-miR-663的诱导型载体转染构建的四环素操纵子稳定表达细胞系HeLa-TetR,通过定量反转录PCR及荧光蛋白的表达检测证实了hsa-miR-663在四环素诱导时表达水平升高。本载体的构建为深入研究hsa-miR-663的功能奠定了基础。

DNA-PKcs基因组不稳定性和辐射超敏感性

本研究旨在揭示DNA-PKcs(DNA损伤修复的关键酶之一)与基因组不稳定性、辐射超敏感性的关系。以人神经胶质瘤细胞系M059K(DNA-PKcs野生型)和M059J(DNA-PKcs缺陷型)为实验模型,用常规克隆形成法测定细胞存活率、cytochalasin-B(细胞松弛素B)阻断-微核法跟踪克隆形成过程中基因组不稳定性变化。实验结果表明,存在辐射超敏感性的DNA-PKcs野生型细胞M059K在0.2Gy辐照后随着培养时间的延长基因组不稳定性与0.6Gy辐照水平一致;不存在辐射超敏感性的DNA-PKcs缺失型细胞M059J经0.6Gy辐照后,基因组不稳定性水平明显高于0.2Gy辐照。这些结果提示,DNA-PKcs可能是导致辐射超敏感性的关键因素之一。

外籍教师管理研究

近年来,我国高等教育国际化日新月异,对外引智力度也逐步加强,在此过程中怎样规范外籍教师的管理工作和充分发挥外籍教师的作用,日益成为教育行政管理部门和高校关注的重要问题。本文对外籍教师的人员组成及教学特点、外籍教师的聘用、教学督导、评估激励机制、日常管理等多个方面进行了探讨,并提出了管理外籍教师的建议。本文旨在促进外籍教师聘用和管理制度的有序发展,充分发挥外籍教师的才智能力,提升外籍教师的工作效益。

ATM与BRCA1的双杂合性通过影响若干通路增加肿瘤发生风险

目的:流行病学统计数据表明杂合性与肿瘤发生相关。ATM和BRCA1都是DNA损伤修复通路中的多功能基因,其单杂合性对于肿瘤易感性的影响已见报道。

DNA—PKcs在细胞辐射超敏感性中的作用研究

的 研究DNA-PKcs在细胞辐射超敏感性中的作用。方法 X射线照射M059K和M059J细胞后，克隆形成法实验检测其存活分数；微核分析法和γ-H2AX焦点形成实验检测DNA损伤；Western blot实验检测M059K，M059J细胞中磷酸化Chk1、Chk2和总Chk1、Chk2蛋白的表达。结果 在X射线照射剂量〈1 Gy时，M059K细胞呈现出辐射超敏感性；DNA损伤水平不能用于表征低剂量区的HRS/IRR；0.2 Gy X射线照射后，M059K细胞中pChk1/Chk1在20-60 min内显著高于M059J细胞（t=14.157、13.661、14.177、11.317、14.512， P〈0.05）；0.2 Gy X射线照射后，M059K细胞中pChk2/Chk2在20-50 min内显著高于M059J细胞（t=13.182、13.868、14.155、14.477， P〈0.05）。结论 DNA-PKcs野生型的人胶质瘤M059K细胞中存在着低剂量辐射超敏感性现象，其发生可能与DNA-PKcs介导的G2/M期检验点相关蛋白激活有关。