基于TLR4/NF-κB信号通路探讨乙肝宁颗粒对肝纤维化模型大鼠的作用机制

目的从Toll样受体-4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路观察乙肝宁颗粒对肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)模型大鼠的治疗作用及相关的作用机制。方法将64只SD随机分为空白组(12只)和造模组(52只),造模组采用四氯化碳皮下注射联合慢性夹尾应激的方法建立HF模型,造模成功的48只大鼠随机分为模型组(12只)、联苯双酯组(50 mg/kg,12只)、乙肝宁颗粒高剂量组(9.18 g/kg,12只,以下简称高剂量组)、乙肝宁颗粒低剂量组(4.59 g/kg,12只,以下简称低剂量组)。治疗组连续灌胃给药治疗4周。治疗结束后,比较各组大鼠肝功能指标谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总蛋白(total protein,TPO,TP)、白蛋白(albumin,ALB)的水平;HE和Masson染色观察大鼠肝组织纤维化情况,免疫组织化学法和Western blot实验检测肝组织TLR4、NF-κB蛋白表达情况。结果(1)与空白组比较,模型组ALB、TP含量降低(P<0.05),肝组织存在细胞排列紊乱、变性肿胀坏死、脂肪空泡形成、炎性浸润等病理现象;高剂量组肝组织损伤程度均有明显改善,脂肪空泡明显减少,胶原纤维沉积程度减轻;低剂量组改善情况低于高剂量组;联苯双酯组与高剂量组之间无明显差异(P>0.05)。(2)与空白组相比,模型组大鼠肝脏指数、AST、ALT含量明显升高(P<0.05),与模型组比较,高剂量组肝脏指数、AST、ALT含量降低(P<0.05),低剂量组上述指标情况高于高剂量组(P<0.05),联苯双酯组与高剂量组之间无明显差异(P>0.05)。(3)与空白组相比,模型组大鼠肝脏组织中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3蛋白表达增加(P<0.05);与模型组相比,高剂量组大鼠肝脏组织中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3蛋白表达水平降低(P<0.05),高剂量组降低的程度高于低剂量组(P<0.01);与联苯双酯组相比,高剂量组上述蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。结论乙肝宁颗粒可改善HF模型大鼠肝脏指数、肝脏病理表现,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、TGF-β、Smad3的表达有关,且高剂量组疗效优于低剂量组。

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