纳豆激酶液态发酵工艺优化

在单因素实验的基础上,用响应面法和正交实验对Bacillus subtilis液态发酵生产纳豆激酶的培养基和发酵条件进行了优化。实验结果表明,最佳产酶培养基组成为麦芽糖2%,酵母膏4%,CaCl20.03%,pH7.0;最佳发酵条件为接种量1%,培养温度34℃,摇床转速200r/min,装液量100mL/500mL(挡板瓶),培养48h达到产酶高峰,产酶活力可达4300U/mL。

高效溶栓酶——纳豆激酶的纯化及酶学性质研究

采用硫酸铵分步盐析，Sepharose CM FF离子交换层析和Superdex 75凝胶色谱，对纳豆激酶发酵液进行分离纯化，得到电泳纯的纳豆激酶。并研究了纳豆激酶的酶学性质，实验结果表明，纳豆激酶的最适作用温度为37℃，温度对酶稳定性影响显著；NK的最适作用pH为7．4，pH6—8范围内酶活相对稳定；EDTA、pepstatin、aprotinine和PMSF对酶有抑制作用，而SBTI和TPCK对酶有激活作用，其中以EDTA的作用最为明显；Zn^2＋对酶活有较大的抑制作用；Al^3＋、Cu^2＋对酶也有一定程度的抑制；Mg^2＋、Ca^2＋、是较好的酶活稳定剂和促进剂。

纳豆纤溶酶——纳豆激酶的分离提纯及稳定性研究

实验采用硫酸铵分步盐析,SepharoseButylFastFlow疏水层析,SepharoseCMFastFlow离子交换层析和Su鄄perdex75凝胶层析,对纳豆浸提液进行分离纯化,得到电泳纯的纳豆激酶。并研究了纳豆激酶的稳定性,实验结果表明,温度对酶活影响显著;pH6-8范围内酶活相对稳定;Zn2+、亚硫酸钠对酶活有较大的抑制作用;Al3+、Cu2+、苯甲酸钠对酶也有一定程度的抑制;Mg2+、Ca2+、甘油、明胶、蔗糖、香精是较好的酶活稳定剂和促进剂。

高产纳豆激酶液态发酵工艺的优化

通过用纳豆杆菌进行液态发酵生产纳豆激酶的培养基的优化实验,确定最佳产酶培养基组成为麦芽糖2%,酵母膏4%,CaCl20.03%,pH 7.0。在此基础上,设计发酵条件的优化实验,实验结果表明,在接种量为1%,装液量为100mL/500mL挡板瓶,200 r/min的条件下,34℃培养48 h达到产酶高峰,产酶活力可达4300U/mL发酵液。在此基础上,通过Luedking-Piret模型来描述纳豆激酶的生成,确定纳豆激酶的液态发酵属于部分生长偶联型。

金华火腿传统工艺过程挥发性风味物质的分析研究

通过对金华火腿传统工艺过程晒后、中温发酵、高温成熟、成熟下架样品中挥发性风味物质的分析测定,研究传统工艺过程中挥发性风味物质的发展规律,结果表明:共有78种挥发性风味物质检出,醛、羧酸、醇、酯、酮、脂肪族和芳香族碳氢化合物、含硫化合物、吡嗪是主要成分;工艺工程中醛和酮的相对含量随温度的升高而逐渐降低,羧酸、酯、吡嗪和含硫化合物的相对含量逐渐增加。金华火腿的高温成熟工艺使来自于美拉德反应的羧酸有显著增加,这是金华火腿与地中海地区干腌火腿最显著的区别,也是金华火腿具有其独特风味的主要原因。

薄层扫描测定果蔬中绿原酸含量

用薄层扫描测定绿原酸的含量，以３６％乙酸－乙酸乙酯－９５％乙醇为展开剂，用硅胶ＧＦ２５４薄层板分离，绿原酸Ｒｆ＝０．６６，展开效果很好，采用波长λ＝３３０ｎｍ反射扫描仪测定，最低检 为０．０１ｕｇ，回收率为１０５．１％，本试验设三次重复。

金华火腿传统加工过程中游离氨基酸和风味物质的变化及其相关性

通过对金华火腿传统加工过程中游离氨基酸 (FAA)和挥发性风味物质的分析 ,研究确定FAA的形成变化与温度条件、NaCl含量及其传统特色风味的相关性。结果表明 :加工过程中FAA与温度变化呈正相关 (R2 =0 91) ,高温成熟期温度升高使各种FAA和挥发性风味物质显著增加 ;成熟后期和后熟过程中 ,NaCl含量大幅度提高使蛋白质水解酶活性降低 ,其与FAA提高呈负相关 (R2 =0 98) ;特定比例的各种FAA产生金华火腿滋味和风味特性 ;来自于Maillard反应的挥发性风味物质与温度提高和FAA的显著增加呈正相关。

金华火腿传统加工过程中脂质分解氧化及其相关性研究

通过对金华火腿传统加工过程中游离脂肪酸(FFA)、硫代巴比妥酸(TBARS)及双烯值和羰基值等的分析,研究其在加工过程中的脂质分解氧化规律及其与温度条件的相关性。结果表明:棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸是火腿中FFA的主要成分,在成熟结束时占FFA总量的93.58%,多不饱和脂肪酸由亚油酸占主导地位;在加工过程中各种FFA均先降低再增加,其总量在发酵中期达到最高点;高温成熟促进脂质分解,同时加速不饱和脂肪酸的氧化,使多不饱和脂肪酸含量和TBARS显著地降低;双烯值、羰基值与温度呈正相关(R2分别为0.938 8和0.841 6)。

水稻叶绿体蛋白质在生长发育过程中的表达研究

在植物中,叶绿体是负责光合作用的细胞器,对叶绿体内的各种生物过程人们已经积累了很多知识,但对叶绿体蛋白质的表达还所知甚少.为了解水稻叶绿体蛋白质在正常生长发育过程中的表达情况,尝试基于抗体的水稻蛋白质组学策略.选取了10个水稻叶绿体基因,利用表达的蛋白质或合成的抗原决定簇片段制备了抗体,用Westernblotting检测了相应蛋白质在5个发育时期的根、茎、叶及穗组织中的表达.发现10个蛋白质均在叶片中表达,在根中不表达.与原初反应相关的叶绿素A/B结合蛋白1和2(CAB1和CAB2)、与电子传递相关的放氧增强蛋白1(OEE1)及与活性氧清除相关的过氧还蛋白过氧化物酶(2-CysP)和硫氧还蛋白(Trx)在茎中表达.而在卡尔文循环中发挥作用的Rubisco活化酶(RCA)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、果糖二磷酸醛缩酶(FBPA)和景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)蛋白质在茎中不表达.在穗中,这些蛋白质的表达时序不同,CAB2和2-CysP在穗发育的全程表达,CAB1和OEE1在中后期表达,而卡尔文循环中的蛋白质只在中期表达.有意思的是,卡尔文循环中的蛋白质表达模式相似,这一结果从蛋白质表达水平支持它们之间的相互衔接关系.此外,实验还揭示了可能的蛋白质修饰、二聚体及不同的转录本现象.将目标基因的表达谱与转录谱进行比较,发现二者间有一定的平行性,但也有明显的区别.以水稻叶绿体蛋白质为对象,直观并相对定量地揭示了它们的表达模式,为阐释其功能提供了信息,也为基于抗体的水稻蛋白质组学策略提供了一个初步数据.

注采比与产水率的关系研究

为了改进钟德康推导的砂岩油田注采比曲线的通用预测公式,基于王怒涛关于甲乙型和丙丁型综合水驱特征曲线的研究成果,结合注水开发砂岩油田的注采关系曲线,推导出了预测注采比变化规律的甲乙型和丙丁型注采比曲线。两类曲线方程均表明注采比变化全过程是水油比(含水率)的单值函数,根据方程可以预测油藏开发后期的注采比或产水率。实例应用研究结果表明,丙丁型注采比曲线有时并不适用。此外将实际注采比曲线与理论图版进行拟合,得到拟合效果较好的n值,从而可以反过来确定哪一种水驱特征曲线可更好地描述油藏的开发动态。

金华火腿工艺过程蛋白质水解及其相关性研究

本文通过对金华火腿工艺过程总氮、非蛋白氮及游离氨基酸的分析研究,来确定其蛋白质分解与工艺过程产品水分、NaCl含量及温湿度条件的相关性;结果表明:工艺过程中非蛋白氮和游离氨基酸的变化与工艺过程湿度和产品水分的降低、温度和NaCl含量的提高呈正相关,且蛋白质在工艺过程中发生了持续降解。

溶栓纳豆芽孢杆菌的筛选鉴定及产纳豆激酶条件的研究

利用目标纳豆芽孢杆菌(Bacillus Natto)所应具有的耐热性、耐盐性、显著的蛋白酶活性及生物素缺陷等生物学特性,设计了定向选育方案,从日本传统食品纳豆中筛选出具有较高纤溶活性的8株枯草芽孢杆菌,命名为 NK-1～NK-8；根据菌落形态、生理生化特征,鉴定为纳豆芽孢杆菌。NK-4菌株经过发酵培养,液体培养指数生长期为4～12h,最佳产酶条件是 pH7．0,培养温度34℃,装液量100mL/500mL。

一株产乙酸乙酯酵母C42的分离与鉴定

从采自沧州良种枣繁育基地的200份枣果实样品中利用含有10%乙醇的YPD平板分离、筛选得到了36株耐酒精酵母菌株,其中一株酵母能产生愉悦的水果香味,命名为C-42。通过形态学,生理生化实验和18S rDNA序列同源性比对,证明该株酵母菌是异威克汉逊酵母(Wickerhamomyces anomalus)。气相色谱分析表明酵母菌株C-42在麦芽汁培养基中发酵一周后可产生乙酸乙酯,浓度可达154mg/L,说明该菌株在发酵工业中具有应用潜力。

干腌火腿品级风味品质指标分析研究

本文分析金华火腿一、二品级后熟6个月样品的游离氨基酸(FAA)、氯化钠含量、水分含量和挥发性风味物质,研究确定了品级火腿的风味品质等级差别,结果表明:一、二品级火腿FAA总量分别为7.492%和4.865%(干样),差异显著,其中谷氨酸(Glu)、丙氨酸(Ala)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)4种金华火腿特征性滋味FAA一级比二级分别增加26%、24%、55%和107%;氯化钠含量偏高、水分含量偏低;一、二品级火腿肌肉和脂肪中分别检出77和80～82种挥发性物质,其中醛、羧酸、醇、酯四类为主要挥发性风味物质,火腿皮下脂肪的挥发性风味物质比肌肉更丰富;金华火腿传统工艺手工作坊方式和原始落后的生产条件是产生一、二品级甚至品外级火腿的主要原因,干腌火腿传统工艺的现代化和标准化是提高其风味品质的必要条件。

稠油蒸汽驱注采参数优化设计——以河南油田井楼油田三区稠油区块为例

以河南油田井楼油田三区的稠油区块为研究层,通过数值模拟的方法,利用已有的油田实际开发数据,通过设计程序中各注采参数不同的搭配方式,进行新的生产动态预测。并通过正交分析的方法对各种注采参数的组合进行优化分析,然后在正交设计的结果上再次进行经验性分析,从而找出各模型的最终优化结果,并得出在75m井距条件下,以五点法注汽开发,以注汽干度55%、注汽速度130m3/d、采注比1.6的参数搭配可以获得最优的蒸汽驱效果。

杜洛克纯种母猪断奶至配种间隔与胎次和繁殖性能的关系

以广东省温氏集团种猪公司杜洛克原种一场和杜洛克原种二场纯种杜洛克母猪2012年1月1日至12月31日断奶配种记录为依据,统计其下一胎及上一胎窝产仔数和窝产健仔数,分析断奶至配种间隔与母猪胎次和产仔成绩的关系。结果显示,杜洛克母猪主要集中在断奶后第5天和第4天发情配种,断奶后第3天、第4天和第5天配种分娩的母猪窝产仔数和窝产健仔数相对较高,但组间差异不显著;断奶至配种间隔在第2至第5天的母猪,上一胎的窝产仔数和窝产健仔数也相对稳定,略高于其他时间段,但组间差异不显著。

后备母猪生长发育规律的探索研究

选择健康4月龄(长×大)二元杂后备小母猪186头,根据天龄、体重和健康状况,通过测定4、5、6、7和8月龄体长、胸围和背膘,研究后备母猪的生长发育规律。结果表明:4-5月龄体长、胸围增长最快,6月龄后备背膘有极显著的上升。

后备母猪生长发育规律的探索研究

选择健康的4月龄长大二杂后备小母猪186头,根据日龄、体重和健康状况,通过测定4月龄、5月龄、6月龄、7月龄和8月龄的体长、胸围和背膘,研究后备母猪的生长发育规律。结果表明:4～5月龄体长、胸围增长最快,6月龄时背膘有极显著的上升。

多表达构件实体及其层次结构研究

多表达(多型)构件是指不同接口的构件具有相同的语义行为或者不同语义行为的构件具有相同的接口.通过建立构件之间一种多型分类机制,并建立构件的分层结构,可实现对构件的全面的定义,也可以用于软件设计过程中构件模型的自动转换和自动求精。

枯草芽孢杆菌TKPG011聚谷氨酸发酵培养基的优化

本文通过单因素试验和正交实验设计研究了碳源、氮源、前体物L-谷氨酸钠和初始pH对Bacillus subtilis TKPG011生物合成γ-PGA的产量的影响,结果表明优化后的发酵培养基为:葡萄糖50g/L,酵母膏10g/L,L-谷氨酸钠30g/L,初始pH值6.5,K2HPO41.5g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L。采用优化培养基能使γ-PGA发酵产量达9.20g/L。