拉曼光谱及其在非法添加物快速筛检中的应用

拉曼光谱是一种基于拉曼散射原理的分子光谱指痕鉴定方法。当光与分子相互作用发生散射时,大部分光子发生弹性散射,只有少数光子发生拉曼散射(非弹性散射),并将部分能量转移给分子,使散射光频率发生位移(位移量携带分子信息)。由于分子结构不同,位移量不同,相应的拉曼图谱也有所不同,所以根据所得到的拉曼图谱可以检测样品中化学物质的存在及相对含量。

茉莉酸甲酯对芽期苦荞黄酮积累及相关基因表达的影响

茉莉酸甲酯(Me JA)是一种新型植物内源激素,该激素可以参与植物黄酮类物质的合成代谢途径。本实验用100μmol/L茉莉酸甲酯溶液对芽期苦荞进行叶面喷施处理,于0~12 h采样。采用Al Cl3法测定处理前后苦荞的总黄酮含量,利用半定量RT-PCR检测苦荞黄酮代谢相关的3个Ft JAZ蛋白基因、3个Ft MYB转录因子以及6个关键酶的基因表达量,并对基因表达量与总黄酮含量进行了相关性分析。结果表明,经茉莉酸甲酯处理后,苦荞芽菜叶片总黄酮含量有所升高,各基因表达模式有所不同,其中Ft JAZ1、Ft JAZ2、Ft JAZ3、Ft MYB2以及Ft PAL基因表达量与总黄酮含量变化趋势相似,而Ft MYB3与Ft F3’H表达量与总黄酮含量变化趋势相反。相关性分析表明,总黄酮含量与Ft MYB2(相关系数为0.864)和Ft JAZ1(相关系数为0.863)显著正相关,与Ft MYB3负相关(相关系数为-0.70),与所有黄酮合成关键酶基因均成正相关。本研究为进一步揭示茉莉酸甲酯参与苦荞黄酮代谢调控的机制奠定了基础。

苦荞类黄酮3′-羟化酶基因的克隆及其冷胁迫下的组织表达

目的克隆苦荞Fagopyrum tataricum类黄酮3′-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase,F3′H)基因全长cDNA序列,对该基因进行序列分析和原核表达,以及冷胁迫条件下该基因表达量和花青素定量测定。方法采用同源克隆和RACE技术从苦荞花蕾中克隆苦荞F3′H(FtF3′H);构建FtF3′H原核表达载体pET-30b(+)-FtF3′H,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达;采用半定量RT-PCR分析FtF3′H基因在冷胁迫下芽期苦荞不同组织的表达量,并采用分光光度计法测量花青素量。结果苦荞FtF3′H基因含有一个1 470 bp的ORF,编码489个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450家族;SDS-PAGE分析表明,目的蛋白相对分子质量54 000;芽期苦荞冷胁迫处理前后子叶和胚轴中FtF3′H表达量以及花青素量的变化分析表明,冷胁迫显著增强了FtF3′H的表达和花青素的积累(P<0.05)。结论成功克隆FtF3′H基因,并实现了FtF3′H基因的异源表达;芽期苦荞在冷胁迫下,可能通过提高FtF3′H基因表达量进而促进花青素的合成,参与其抗逆生理过程。

拉曼光谱技术与便携式拉曼光谱仪

1引言 1928年印度科学家拉曼在实验中发现，当一束单色光照射在某些物质上时，会产生一些不同于原单色光、非常微弱的散射光。这部分散射光的波长与原激发光的波长总是相差一个恒定的数量。这一发现在当时立刻引起了轰动，并被英国皇家学会称为“20年代实验物理学中最杰出的发现之一”。这种散射后频率发生变化的现象称为拉曼效应。