幽门螺杆菌感染所致人脐静脉内皮细胞功能异常及炎性反应的作用机制研究

目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)通过激活转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖、迁移、凋亡及炎性反应的影响。方法将HUVEC分为对照组(未感染Hp)和Hp感染组(Hp感染复数=25),通过倒置显微镜观察感染Hp的HUVEC形态变化;细胞计数试剂盒8细胞增殖实验和平板克隆实验检测2组HUVEC增殖能力,Transwell实验和划痕愈合实验检测HUVEC的迁移能力,流式细胞术检测HUVEC的凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应检测2组HUVEC中Hp细胞毒素相关基因A、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)信使核糖核酸表达情况;Western blot检测HUVEC细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、原癌基因(C-Myc)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B淋巴细胞瘤2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、STAT3/NF-κB信号通路蛋白表达情况。结果与对照组比较,Hp组细胞增殖、纵向、横向迁移能力明显降低,CyclinD1、PCNA、C-Myc、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax、磷酸化STAT3/STAT3、磷酸化NF-κB P65/NF-κB-P65蛋白表达量和HUVEC凋亡率升高(P<0.05,P<0.01),炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-αmRNA水平升高(2.71±0.05 vs 1.06±0.41,1.42±0.02 vs 0.92±0.11,2.50±0.29 vs 1.00±0.10,5.34±0.57 vs 1.00±0.16,P<0.01)。结论Hp通过激活STAT3/NF-κB通路抑制HUVEC增殖、迁移,并诱导其凋亡和炎性反应的发生。

尿酸通过下调lncRNA MIR22HG的表达促进前列腺癌细胞增殖及迁移

目的:探讨尿酸(uric acid,UA)是否通过lncRNA MIR22HG调控前列腺癌细胞的增殖和迁移。方法:选用前列腺癌DU145细胞,将其分为对照组和尿酸处理组(400μmol/L),转染si-MIR22HG或si-NC组,转染pcDNA-MIR22HG或pcDNA组,以及UA+pcDNA-MIR22HG或UA+pcDNA组。应用qRT-PCR法检测DU145细胞中MIR22HG的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和P21的表达,Transwell测定细胞迁移能力。结果:与对照组比较,400μmol/L尿酸处理后,DU145细胞的MIR22HG表达显著下降(P<0.01),同时前列腺癌DU145细胞活力及迁移能力均显著增强(P均<0.01),Cyclin D1、CDK4蛋白表达水平亦显著升高(P均<0.01),P21蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。与相应对照组相比,下调MIR22HG能够显著促进前列腺癌DU145细胞增殖、迁移(P均<0.01),而上调MIR22HG可以抑制其增殖、迁移(P<0.01)。同时,过表达MIR22HG能够逆转尿酸对DU145细胞增殖和迁移能力的促进作用(P均<0.01)。结论:尿酸通过下调MIR22HG的表达促进前列腺癌DU145细胞的增殖和迁移。

β-桉叶醇抑制内皮细胞血管新生的机制研究

目的探讨中药小分子单体β-桉叶醇对内皮细胞血管新生的影响及其分子作用机制。方法将小鼠脑微静脉内皮细胞分为空白组、DMSO组、β-桉叶醇组(n=3),分别采用0.1%磷酸盐缓冲液,0.1%DMSO,0.1%20 mg/L的β-桉叶醇药物溶液(溶剂为DMSO)的完全培养液培养。分析各组CD31、血管内皮生长因子A(VEGFA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、原癌基因C-Myc、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、活化Caspase-3、P53、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)蛋白表达。结果空白组与DMSO组各项指标比较,无统计学差异(P>0.05),与空白组及DMSO组比较,β-桉叶醇组细胞增殖能力、S期细胞比例、细胞周期相关蛋白C-Myc、CyclinD1、PCNA、MMP-2、MMP-9、CD31、VEGFA、HMGB1及Bcl-2表达显著下降(P<0.05),G1期细胞比例、细胞早期凋亡率、Bax、P53及活化Caspase-3表达上升[(73.73±1.70)%vs(61.33±3.04)%和(60.96±0.98)%,(26.33±2.67)%vs(9.31±0.52)%和(9.53±0.94)%,0.92±0.07 vs 0.33±0.05和0.32±0.02,0.50±0.07 vs 0.30±0.09和0.27±0.10,0.49±0.13 vs 0.14±0.08和0.13±0.11,P<0.05]。结论β-桉叶醇抑制内皮细胞血管新生,其机制可能是影响细胞增殖、迁移能力、调控细胞周期和凋亡相关信号通路。