麦芽总生物碱颗粒剂的制备

目的:在前期药效实验的基础上,提取麦芽总生物碱,优选麦芽总生物碱颗粒剂成型制备工艺,得到稳定均一,质量合格的颗粒制剂。方法:利用超声提取法,提取麦芽总生物碱;采用酸性染料比色法测定麦芽中总生物碱的含量;拟选6个处方完成颗粒剂的制备,并以休止角、成型率、堆密度和吸湿性等为指标,应用综合评分法对各处方进行打分,筛选出最优的辅料处方,完成辅料用量比例的优化,并筛选出最佳润湿剂;对制备所得到的麦芽总生物碱颗粒的溶化性,粒度及干燥失重等进行测定。结果:以糊精和乳糖比例为1∶1的混合物作为辅料,并按1∶1的比例混合麦芽总生物碱浸膏粉与辅料,选取80%的乙醇作为润湿剂,制备所得颗粒剂大小均一,成型率最高。结论:本文成功优选出了麦芽总生物碱颗粒剂的制备工艺,制成的颗粒溶化性好,成型率佳,制备方法稳定可靠。

回乳抑增方抗泌乳素腺瘤的药效及作用机制研究

目的:研究中药复方回乳抑增方抗泌乳素腺瘤的药效及作用机制。方法:建立SD雌性大鼠泌乳素腺瘤模型,大鼠随机分为7组,分别为正常组、模型组各14只,手术对照组、溴隐亭阳性药组、回乳抑增方高剂量组、回乳抑增方中剂量组、回乳抑增方低剂量组各6只。除正常组和手术对照组外,其他5组模型大鼠灌胃给予相应药物30 d,每天1次。应用基因芯片筛选正常组大鼠和泌乳素腺瘤模型组大鼠垂体组织基因间的差异。运用Western Blot测定各组大鼠垂体组织中泌乳素(PRL)、胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白含量。结果:大鼠泌乳素腺瘤模型建立成功。与正常组相比,模型组大鼠垂体组织的PI3K基因表达显著。与正常组相比,模型组大鼠垂体组织中PRL、PI3K、AKT和mTOR表达显著升高(**P<0.01),而与模型组相比,高、中和低剂量的回乳抑增方给药组大鼠垂体组织中PRL、PI3K、AKT和mTOR表达显著降低(##P<0.01)。结论:回乳抑增方可显著抑制泌乳素腺瘤的增长和泌乳素的过度分泌,作用机制与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

复方足疡平促进糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合及对RAGE/NF-κBp65/VEGF表达的影响

目的:探讨复方足疡平对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的作用及其作用机制。方法:将50只SPF级SD大鼠分成正常对照组、皮肤溃疡模型组、凡士林组、足疡平组、rhEGF(重组人表皮生长因子外用溶液)组,每组10只。大鼠糖尿病模型通过高脂高糖饮食结合腹腔注射链脲佐菌素诱导。50只大鼠背部制造皮肤溃疡创面,各组给与相应药物外敷创面。观察创面愈合情况计算创面愈合率;分别在治疗第7,14天时采集创面肉芽组织制作HE染色切片,进行组织病理学观察;Western blot检测创面肉芽组织中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:干预治疗第7,14天时,与皮肤溃疡模型组比较,足疡平组和rhEGF组能明显提高创面愈合率(P<0.01),而凡士林组大鼠创面愈合率与皮肤溃疡模型组无显著性差异(P>0.05);足疡平组和rhEGF组大鼠创面组织胶原纤维沉积、毛细血管、肉芽组织生长均明显增加;足疡平组能显著降低RAGE、NF-κB p65蛋白表达,升高VEGF蛋白表达(P<0.01),rhEGF组在第7天时NF-κB p65蛋白表达与皮肤溃疡模型组比较差异无显著性(P>0.05),其余指标均有显著性差异(P<0.01)。结论:复方足疡平可有效促进糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合,其作用机制与抑制糖尿病大鼠皮肤溃疡创面中RAGE、NF-ΚB p65表达,促进VEGF的表达相关。

70例脑梗患者CYP2C19基因多态性与中医证型分布的相关性

目的:探究脑梗患者CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因多态性与中医证型分布的相关性。方法:将我院2017年4月-2019年7月中医科的脑梗患者根据中医证型进行分型,并且采集其静脉血,提取基因组DNA,然后进行扩增及结果判定,观察CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17基因位点多态性与中医证型分布的相关性。结果:某院中医科的脑梗患者根据中医分型,分为阴虚风动型、气虚血瘀型、痰热腑实型和风痰瘀阻型,其中,气虚血瘀型占比50%,占比明显高于其他证型(P<0.05)。基因检测分析发现,脑梗患者CYP2C19基因的突变易发于2、3位点,CYP2C19*2突变等位基因频率为0.3072;CYP2C19*3突变等位基因频率为0.0857;CYP2C19*17突变等位基因频率为0.0215。其中,气虚血瘀型患者中CYP2C19*2基因突变率最高,并且CYP2C19*2突变型比率高于野生型(P<0.05)。结论:脑梗患者的中医证型分布与CYP2C19*2基因多态性具有显著的相关性;气虚血瘀证型为脑梗患者的主要分型,并且气虚血瘀证型脑梗患者大多数存在CYP2C19*2基因突变,并且呈正相关。

高效液相色谱法测定大鼠血浆中大麦芽碱的研究

目的:利用高效液相色谱法(HPLC)建立大鼠血浆中大麦芽碱(Hordenine)浓度的测定方法。方法:色谱柱为Thermo Hypersil GOLD C18(250 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为Thermo Hypersil GOLD C18(10 mm×4.6 mm,5μm),以酪胺(Tyramine)为内标,流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾(三乙胺调节pH 7.10)(5∶95,V∶V),流速1.0 mL·min-1,等度洗脱,紫外检测波长226 nm,柱温25℃,进样量20μL,甲醇沉淀蛋白法处理血浆样品,取上清液进样分析检测。结果:大鼠血浆中大麦芽碱在6.25~800μg·mL-1的范围内呈良好的线性关系,回归方程为:Y=0.0056X+0.0169(r=0.9980),定量下限为6.25μg·mL-1。日内精密度在2.94%~8.15%之间,日间精密度在4.30%~7.23%之间,提取回收率大于80%,血浆样品稳定性符合生物样品方法学验证要求。结论:HPLC方法用途广、操作简便、速度快、重复性高、线性范围广、结果准确,可用于测定大鼠血浆中大麦芽碱的血药浓度。