结直肠癌患者肠道菌群及粪便SDC2基因甲基化检测意义及其关系研究

目的探讨粪便Syndecan-2(SDC2)甲基化与肠道菌群失调在结直肠癌(CRC)中的意义。方法将70例CRC患者(CRC组)、65例结直肠腺瘤性息肉(CAP)患者(CAP组)及50例健康志愿者(对照组)作为研究对象,检测其粪便DNA SDC2甲基化与肠道菌群失调情况,实时荧光定量PCR法定量分析粪便菌群,Spearman相关系数分析CRC患者粪便SDC2甲基化与其定量分析结果之间的相关性。结果实时荧光定量PCR法在分析粪便菌群中的稳定性及特异性良好,CRC组粪便SDC2甲基化阳性率及肠道菌群失调率均高于对照组与CAP组(P<0.05);与对照组相比,CRC组及CAP组有益菌定量分析水平降低,CRC组肠道菌群中有害菌水平上升(P<0.05)。CRC患者粪便SDC2甲基化与肠道乳酸杆菌、双歧杆菌定量水平呈负相关(P<0.05),与大肠杆菌、粪肠球菌以及脆弱拟杆菌定量分析水平呈正相关(P<0.05)。结论CRC患者存在明显的肠道菌群紊乱表现及高水平SDC2甲基化阳性率,肠道菌群可能通过影响SDC2甲基化参与CRC发生与发展。

降钙素原诊断重症急性胰腺炎的系统评价

目的系统评价当前研究降钙素原(PCT)预测重症急性胰腺炎(SAP)的文献质量,PCT作为SAP诊断标志物的价值。方法制定检索策略及纳入和排除标准,系统检索MEDLINE、Pub Med、the Cochrane clinical trials register数据库收集潜在的文献,并根据诊断性研究质量评价工具(QUADAS)评估纳入文献的质量,提取数据,进行Meta分析。结果共检索到相关文献188篇,符合纳入标准的文献12篇。PCT预测SAP的合并灵敏度和特异度分别为72%和86%;诊断优势比(DOR)为14.9(95%CI=5.6～39.8),SROC曲线下面积为0.87。结论目前研究表明PCT对SAP进展有较好的预测价值。

全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病的疗效观察

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(ATO)治疗早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法对35例APL患者应用ATRA联合ATO治疗,观察PML-RARα融合基因转阴率、达到血液学完全缓解(CR)所需时间和不良反应情况,并与18例单独使用ATO和19例单独使用ATRA患者的上述指标进行比较。结果联合用药患者PML-RARα融合基因转阴率为94.3%,单独使用ATO患者转阴率为88.9%,单独使用ATRA患者转阴率为94.7%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);联合用药组达到CR时间为(24.2±5.7)d,ATO组为(36.0±7.1d),ATRA组为(40.9±8.5)d,三者比较差异有统计学意义(P<0.05);3组比较,联合用药患者转氨酶升高(P<0.05),ATO组心肌损伤标志物升高(P<0.05),ATRA组血脂高(P<0.05)。结论 ATRA联合ATO治疗APL完全缓解率高,所需时间短,对血脂和心脏影响较小,但肝脏毒性较大。

ROC曲线评价红细胞沉降率在14种疾病中的诊断价值

目的探讨红细胞沉降率(ESR)的ROC曲线分析在14种疾病中的诊断价值,为临床医生提供合理的数据解释和辅助诊断。方法借助泸州医学院附属医院信息系统(HIS)和实验室信息系统(LIS)平台,回顾性分析了2536份ESR测定结果。采用SPSS统计分析软件对14种常见疾病的ESR结果进行ROC和基于人工神经网络模型(ANN)的ROC曲线分析,以期建立一种较好的疾病辅助诊断和评估模式。结果 ESR指标增高对结核、肾脏疾病、多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、川崎病和糖尿病的诊断具有一定的准确性(ROC曲线下面积均大于0.6,P<0.01)。结论对不同疾病的ESR结果进行信息挖掘并结合患者临床表现进行综合分析,有助于疾病的正确诊断和风险评估。

顺铂对bcr/abl转化BaF3-P210细胞DNA损伤与修复能力的影响

目的:研究顺铂(cisplatin,Cis)对白血病BaF3-MIGR1细胞和bcr/abl转化BaF3-P210细胞中DNA损伤修复能力的影响。方法:锥虫蓝染色法检测2种细胞经0.5、1、5、10、20和40μg/mL Cis处理0、2、4、6、8、12、24和48 h时的存活率,免疫荧光法检测上述6种浓度Cis处理细胞8 h后诱导的γH2AX焦点数,Western印迹法检测DNA修复0、4、12和24 h后的γH2AX蛋白表达情况。结果:随着Cis处理时间和剂量增加,2种细胞的存活率降低,BaF3-P210转化细胞的存活率比BaF3-MIGR1细胞高(P<0.05);随着Cis剂量上升,2种细胞的γH2AX焦点数上升,BaF3-P210转化细胞的焦点数比BaF3-MIGR1细胞少(P<0.05);随着DNA修复时间延长,2种细胞的γH2AX蛋白表达均下调,BaF3-P210转化细胞的γH2AX蛋白表达量比BaF3-MIGR1细胞低。结论:Cis对BaF3-MIGR1细胞和BaF3-P210转化细胞的损伤呈时间、剂量效应,2种细胞的γH2AX焦点数与损伤之间存在剂量效应,bcr/abl可增强BaF3-P210转化细胞的DNA修复能力。

最优生化指标检测模型在4种疾病中的应用价值初探

目的建立4种疾病最优生化指标的检测模型,探讨不同模型在疾病诊断中的应用价值。方法以肺癌、乳腺癌,直肠癌和淋巴瘤患者为研究对象(113例),采用受试者工作特征(ROC)曲线和人工神经网络(ANN)建立诊断模型。结果 ANN模型中31项生化检测项目在肺癌、乳腺癌,直肠癌和淋巴瘤中的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.777,0.848,0.827和0.733,而优化检测项目后4种疾病的AUC分别为0.869,0.949,0.859,0.947。结论不同疾病最优生化检测模型的建立提高了疾病诊断的准确,有助于减轻患者医疗费用。

钟基因Per2对白血病K562细胞增殖、分化、凋亡的影响及其机制研究

目的研究钟基因Period2(Per2)对慢粒急变K562细胞株增殖、分化、凋亡的影响及可能的分子机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株。瑞氏染色观察细胞形态,台盼蓝拒染法和MTT法检测K562细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,电镜观察细胞凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53、cyclin B1和c-myc等的表达。结果筛选到稳定表达Per基因的稳定表达细胞株K562/Per2细胞,与空载体转染组及未处理对照组细胞相比,K562/Per2细胞体积缩小,但是分化不明显;台盼蓝拒染法和MTT实验发现Per2抑制细胞生长与增殖能力;流式细胞仪检测周期结果K562/Per2细胞中G2期细胞增多[转染组(36.1±5.5)%,空载组(12.5±2.9)%,未处理对照组(9.7±2.3)%,P<0.05],凋亡检测显示转染组细胞凋亡明显增加[14.8%P<0.05];电镜结果显示染色质浓集、断裂,核固缩和凋亡小体;RT-PCR及Western blot显示Per2明显上调p53基因的mRNA和蛋白表达,而抑制cyclin B1、c-myc基因mR-NA和蛋白的表达。结论钟基因Per2能抑制K562细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,但对分化无明显作用。其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的。

CCAAT/增强子结合蛋白α对K562细胞分化和凋亡的影响及其机制

目的:研究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein-alpha,C/EBPα)对K562细胞株分化和凋亡的影响及对相关基因的调控,为慢性粒细胞白血病的治疗提供新的治疗靶点。方法:将C/EBPα表达质粒pEGFP-C/EBPα及空载体对照质粒pEGFP分别经阳离子脂质体2000介导转染K562细胞,用G418筛选出C/EBPα稳定表达细胞株。Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化,FCM分析细胞表面分化抗原CD11b的表达、细胞周期及细胞凋亡,电子显微镜观察细胞凋亡,RT-PCR和Western印迹法检测细胞中相关基因Per2、cyclin B1和C-myc的表达。结果:筛选得到稳定表达C/EBPα的细胞株pEGFP-C/EBPα-K562。与空载体转染组及对照组细胞相比,转染组K562细胞分化明显,同时粒系细胞表面分化抗原CD11b表达增加;细胞周期分析发现,转染组细胞中G2期细胞增多,与空载体组和对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),同时出现细胞凋亡峰。细胞凋亡检测结果显示,转染组细胞凋亡明显增加(21.1%),与空载体组(6.0%)和对照组(4.2%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);电子显微镜观察发现,转染组细胞中出现染色质浓集、断裂和核固缩等现象,并见凋亡小体;RT-PCR和Western印迹法检测发现,C/EBPα明显上调Per2 mRNA和蛋白表达,抑制cyclinB1、C-myc mRNA和蛋白的表达。结论:C/EBPα能促进K562细胞分化,并诱导细胞凋亡,其机制可能是通过对细胞周期相关基因的调控来实现的。

COX-2 siRNA诱导人肝癌Hep3B细胞凋亡实验研究

目的:观察COX-2在人肝癌细胞Hep3B中的表达及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默COX-2基因对COX-2 mRNA和蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:将siRNA-COX-2质粒载体转染Hep3B细胞,WST-8法检测细胞增殖抑制情况,透射电镜观察凋亡小体出现情况;筛选单克隆细胞株Hep3B-sh,采用RT-PCR和Western blotting检测COX-2 mRNA和蛋白情况。结果:siRNA-COX-2能抑制Hep3B细胞的增殖,稳定转染pshRNA-COX-2可使Hep3B细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达明显减弱(P<0.01);透射电镜下可见凋亡小体出现,发生凋亡细胞数增加。结论:COX-2siRNA能有效抑制肝癌Hep3B细胞中COX-2的表达和细胞的增殖,促进凋亡发生,为肝细胞癌基因治疗提供实验依据和治疗靶点。

基于一流专业的《临床血液学检验技术》课程改革与探索

选取两届医学检验技术专业本科学生作为研究对象,进行近2年的研究,对2018届医学检验技术专业本科生进行传统教学,对2019届医学检验技术专业本科生进行课程改革后的新方式的教学,在此过程中对教学模式持续优化和转型,在教学内容、实践环节、课程改革等方面进行连续改革,从专业认知、技能知识到职业素养对学生进行综合培养,形成适用于医疗、IVD的应用复合型人才培养模式。基于以上改革后,通过多元化考核方式对学生考核后发现接受虚拟仿真实验平台、翻转课堂、科普制作等改革教学的学生更容易提高学习兴趣,有助于提高细胞形态辨识能力和理论知识的掌握,毕业生质量在区域内有很高的社会声誉,在行业内发挥了良好的桥梁骨干作用。本次课程改革效果较为显著。

PRIMUS-PDQ Plus床旁检测仪与BIO-RAD D10糖化血红蛋白分析仪的一致性评估

目的探讨糖化血红蛋白PRIMUS-PDQ Plus型床旁检测仪与BIO-RAD D10型分析仪的一致性。方法该文按照美国临床实验室标准化协会(NCCLS)EP9-A2文件要求用患者标本进行方法比对及偏差评估。结果回归方程Y=0.970 2 X+0.274 7,相关系数r=0.996 5,医学决定水平处偏倚均小于美国临床病理协会(ASCP)室间质评的要求。结论 PRIMUS-PDQ Plus床旁检测仪与BIORAD-D10型分析仪具有较好的一致性,两套仪器检测结果无区别,能够满足临床诊断、治疗和监测糖尿病的目的。

循环miRNA21在肝细胞癌早期诊断中的价值

目的探讨血浆中miRNA21作为肝细胞癌早期生物标志物的诊断价值。方法采用定量RT-PCR(quantitative RT-PCR)检测55例肝细胞癌患者、60例慢性肝炎患者、50例健康对照者血浆中miRNA21的表达水平。结果血浆miRNA21在肝细胞癌组中水平显著高于慢性乙肝组(P<0.01)和健康对照组(P<0.01)。通过绘制受试者工作曲线(receiver-operator characteristic curve,ROC curve)分析,miRNA21作为肝细胞癌和慢性乙肝的诊断标志物,其诊断价值分别为:灵敏度(65%),特异度(85%),受试者工作曲线下面积(AUC)为0.771,而miRNA21作为肝细胞癌和健康对照者的诊断标志物,其诊断价值分别为:灵敏度(89%),特异度(95%),AUC为0.956。结论 miRNA21是肝细胞癌潜在的早期诊断标志物。

染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测无精子或少精子症的临床应用研究

目的对男性无精子或少精子症患者进行染色体遗传学病因诊断与分析,探讨染色体核型分析与Y染色体微缺失联合检测对无精子或少精子症的临床应用价值。方法收集四川泸州地区240例男性无精子或少精子症患者的临床资料及外周血样本。外周血淋巴细胞按常规染色体培养G显带行核型分析,Y染色体微缺失检测采用多重PCR技术。结果240例男性无精子或少精子症患者中无精子症患者179例、严重少精子症患者61例。单一染色体核型分析异常检出率为22.92%(55/240),包括单纯染色体数目异常30例、单纯染色体结构异常21例和合并异常4例。单一Y染色体微缺失异常检出率为10.42%(25/240),其中AZFc缺失异常率最高为7.08%。采用核型分析与Y染色体微缺失联合检测的异常检出率为30.83%(74/240),其中6例患者两项结果均异常,两种方法联合应用时较单一方法的检出率高(χ^(2)=30.24,P<0.001)。结论系统地报道了泸州地区男性无精子或少精子症患者的染色体核型及Y染色体微缺失的发生率及类型,同时提出两种方法联合应用可提高异常检出率,对男性不育症患者的病因诊断、遗传咨询及生殖治疗提供了重要指导作用。

缺铁性贫血对孕中期孕妇心电图的影响研究

目的利用心电图(ECG)检测并比较缺铁性贫血孕中期孕妇和健康孕中期孕妇的心肌功能,以分析缺铁性贫血对孕中期心肌功能的影响。方法选择2015年12月至2017年12月来该院就诊的110例孕中期(孕周为13～27周)孕妇,对照组为55例健康孕中期孕妇,研究组为55例贫血孕中期孕妇,采用Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪和西门子Advia XP分析仪检测两组的血液学参数和生化指标,ECG检测并评估两组孕妇的心肌功能。结果研究组的QRS间期明显降低(P<0.05),QTc间期明显增高(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ、AVF导联和V2～V4导联出现T波异常低平和负性T波,其频率明显增高(P<0.05);研究组中92%患者均出现心动过速和ECG异常。结论缺铁性贫血可导致孕中期ECG各种异常改变。

儿童β-珠蛋白生成障碍性贫血与缺铁性贫血的鉴别研究

目的分析儿童小细胞性贫血的各种血液学指标,以期找到鉴别诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血(β-TT)和缺铁性贫血(IDA)的可靠指标。方法选择该院年龄2～15岁的患儿100例[排除合并2种疾病的患儿,IDA患儿接受口服铁剂治疗16周,治疗后作血红蛋白A2(HbA2)检查],分析其血红蛋白为8.7～11.4g/dL的12个鉴别指标:红细胞计数(RBC)、红细胞分布宽度(RDW)指数、Mentzer指数、Shine and Lal指数、England and Fraser指数、Srivastava and Bevington指数、Green and King指数、Ricerca指数、Sirdah指数、Ehsani指数、每升血平均血红蛋白(MDHL)密度、平均红细胞血红蛋白(MCHD)密度。结果 Mentzer指数是综合诊断价值最高的指标,其鉴别诊断β-TT和IDA的灵敏度为97.9%,特异度为82.6%,约登指数为80.5%。结论 Mentzer指数有望成为鉴别β-TT和IDA的可靠指标。

大数据背景下高校临床检验诊断学教学思考

大数据背景下医学检验已逐步向检验医学转变,教师在讲授检验基本理论、知识和技能的同时,更需结合临床实践和科研需求进行教学改革,以提供精准、实时、高效、创新的医疗和咨询服务。检验医学教学活动中多指标综合统计分析、科研知识普及与临床应用等环节仍较薄弱,教学模式有待改进和优化。该文对大数据背景下高校临床检验诊断学教学模式进行探讨,为丰富检验医学课堂教学、激发学生求知欲和培养综合性检验医学人才提供新思路。